Effects of temperature and lime juice on blood cockle (Anadara granosa) and oyster (Saccostrea commercialis) hemolymph proteomes and antibacteria activity
Abstract:
การศึกษาครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาผลของอุณหภูมิและน้ำมะนาวที่มีผลต่อเลือดหอย 2 ชนิด ได้แก่ หอยแครง (Anadara granosa) และหอยนางรมปากจีบ (Saccostrea commercialis) โดยทำการศึกษารูปแบบโปรตีนในเลือดหอยและทดสอบประสิทธิภาพในการยับยั้งเชื้อแบคทีเรีย 3 ชนิด ได้แก่ Vibrio parahaemolyticus, Escherichia coli และ Staphylococcus aureus โดยมีรูปแบบของเลือด 4 รูปแบบ ได้แก่ เลือดหอยสด เลือดหอยที่ผ่านความร้อนอุณหภูมิ 100 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 15 วินาที และ 5 นาที และเลือดหอยผสมน้ำมะนาว พบว่าเมื่อทำการศึกษารูปแบบโปรตีนด้วยเทคนิค Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS-PAGE) และวิเคราะห์น้ำหนักโมเลกุลของโปรตีนด้วยโปรแกรม GelAnalyzer version 2010a พบว่าเลือดหอยแครงพบแถบโปรตีนจำนวน 16-19 แถบ ส่วนเลือดหอยนางรมปากจีบพบแถบโปรตีนจำนวน 10-17 แถบ และเมื่อทดสอบประสิทธิภาพในการยับยั้งเชื้อแบคทีเรีย พบว่าเลือดหอยแครงมีความสามารถในการยับยั้งเชื้อ V. parahaemolyticus สูงสุด รองลงมาได้แก่ S. aureus และ E. coli ตามลำดับ โดยพบว่าเลือดหอยแครงผสมน้ำมะนาวมีประสิทธิภาพสูงสุดในการยับยั้งเชื้อ V. parahaemolyticus โดยมีเปอร์เซ็นต์ยับยั้งเฉลี่ยเท่ากับ 71.76±1.51% ในการยับยั้งเชื้อ S. aureus พบว่าเลือดหอยแครงสดมีประสิทธิภาพสูงสุด มีเปอร์เซ็นต์ยับยั้งเฉลี่ยเท่ากับ 67.63±3.88% และส่วนการยับยั้งเชื้อ E. coli พบว่าเลือดหอยแครงผสมน้ำมะนาวมีประสิทธิภาพสูงสุด มีเปอร์เซ็นต์ยับยั้งเฉลี่ยเท่ากับ 64.90±2.74% และเลือดหอยแครงจะสูญเสียประสิทธิภาพในการยับยั้งเชื้อแบคทีเรียทั้ง 3 ชนิด เมื่อผ่านความร้อนที่อุณหภูมิ 100 องศาเซลเซียส 5 นาที ในส่วนของหอยนางรมปากจีบมีเพียงเลือดหอยนางรมที่ผสมน้ำมะนาวเท่านั้นที่มีประสิทธิภาพในการยับยั้งเชื้อแบคทีเรีย โดยมีความสามารถในการยับยั้งเชื้อ V. parahaemolyticus สูงสุด รองลงมาได้แก่ E. coli และ S. aureus ตามลำดับ มีเปอร์เซ็นต์ยับยั้งเฉลี่ยเท่ากับ 73.08±2.38%, 65.64±5.91% และ 65.45±6.61% ตามลำดับ จากการศึกษาทั้ง 2 ส่วน สรุปได้ว่าความร้อนและความเป็นกรดของน้ำมะนาวมีผลต่อรูปแบบโปรตีนในเลือดหอยและประสิทธิภาพในการยับยั้งเชื้อแบคทีเรีย
This study aimed to determine the effect of temperature and lime juice on the blood of 2 bivalves; Anadara granosa and Saccostrea commercialis. The hemolymph protein pattern and bacterial inhibitory effect on 3 bacterial strains; Vibrio parahaemolyticus, Escherichia coli and Staphylococcus aureus. There were four treatment conditions of hemolymph samples i.e. fresh hemolymph , heated hemolymph at 100 °C for 15 sec and 5 min and fresh hemolymph mixed with lime juice. According to hemolymph protein gel pattern analysis by Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS-PAGE) technique and molecular weight calculation with GelAnalyzer version 2010a, results blood cockle hemolymph consist of 16-19 protein bands. While blood oyster hemolymph contains 10-17 protein bands. The antibacterial activity assay result showed that the blood cockle hemolymph had the highest activity on V. parahaemolyticus followed by S. aureus and E. coli, respectively. The most effective treatment condition was fresh hemolymph mixed with lime juice which could inhibit V. parahaemolyticus and E. coli at 71.76±1.51% and 64.90±2.74% while to fresh hemolymph without lime juice had the highest effect on S. aureus at 67.63±3.88%. Notably, the blood cockle hemolymph lose its antibacterial ability after heated at 100 °C for 5 min. For oyster hemolymph sample, only the lime juice addition treatment gave the positive result in agar well diffusion assay with antibacterial activity against V. parahaemolyticus, E. coli and S. aureus at 73.08±2.38%, 65.64±5.91% and 65.45±6.61%, respectively. From both analyses, it can be concluded that the heat and acidity of lime juice have major effects on the protein pattern and antibacterial efficacy of both bivalve hemolymph