Abstract:
ไส้เดือนฝอยศัตรูแมลงในวงศ์ Heterorhabdtidae และ Steinernematidae และแบคทีเรียร่วมอาศัยสกุล Photorhabdus และ Xenorhabdus, ตามลำดับ จัดเป็นชีวภัณฑ์ควบคุมศัตรูพืชที่มีความสำคัญสำหรับใช้กำจัดแมลงศัตรูพืชหลายชนิดทั่วโลก เนื่องจากไส้เดือนฝอยศัตรูแมลงและแบคทีเรียร่วมอาศัยดังกล่าวสามารถทำให้แมลงศัตรูพืชตายภายใน 48-72 ชั่วโมง และมีความปลอดภัยต่อสิ่งแวดล้อม การศึกษานี้ได้จัดจำแนกชนิดของไส้เดือนฝอยศัตรูแมลงและแบคทีเรียร่วมอาศัยไส้เดือนฝอยศัตรูแมลงเฉพาะถิ่นของประเทศไทยจำนวน 6 ไอโซเลท ด้วยวิธีทางชีวโมเลกุล ผลการวิเคราะห์และเปรียบเทียบลำดับนิวคลีโอไทด์บางส่วนของยีน 28S rRNA กับฐานข้อมูล GeneBank สามารถจัดจัดจำแนกเป็นไส้เดือนฝอยศัตรูแมลง Heterorhabditis indica 3 ไอโซเลท และจำแนกเป็น Steinernema surkhetense 3 ไอโซเลท เมื่อนำแบคทีเรียร่วมอาศัยของไส้เดือนฝอยศัตรูแมลง H. indica และ S. surkhetense ทั้ง 6 ไอโซเลท มาวิเคราะห์และเปรียบเทียบลำดับนิวคลีโอไทด์ บางส่วนของยีน recA กับฐานข้อมูล GeneBank สามารถจัดจำแนกเป็นแบคทีเรีย Photorhabdus luminescens subsp. hainanensis 3 ไอโซเลท และ Xenorhabdus stockiae 3 ไอโซเลท ตามลำดับ นอกจากนั้น การศึกษาประสิทธิภาพเบื้องต้นของไส้เดือนฝอยศัตรูแมลงและแบคทีเรียร่วมอาศัยในการก่อให้เกิดโรคต่อหนอนกินรังผึ้ง (Galleria mellonella) พบว่า หนอนกินรังผึ้งวัย 5 มีความอ่อนแอต่อไส้เดือนฝอยศัตรูแมลง H. indica EPNKU64 มากที่สุด รองลงมาเป็น H. indica EPNKU67, H. indica EPNKU68, S. surkhetense EPNKU63, S. surkhetense EPNKU70 และ S. surkhetense EPNKU85 โดยพบอัตราการใช้ที่ทำให้แมลงตาย 90 เปอร์เซ็นต์ (LC90) ที่ 3 วัน หลังการทดสอบ เท่ากับ 4, 19, 22, 72, 75 และ 75 infective juveniles/หนอน 1 ตัว ตามลำดับ และประสิทธิภาพของแบคทีเรียร่วมอาศัยในการก่อโรคต่อหนอนกินรังผึ้งวัย 5 ที่อัตรา 1×106 CFU/น้ำ 50 ไมโครลิตร/หนอน 1 ตัว มีค่าอยู่ระหว่าง 63.33-83.33 เปอร์เซ็นต์ ที่ 3 วันหลังการทดสอบ
Entomopathogenic nematodes (EPN) in the family Heterorhabdtidae and Steinernematidae with their symbiotic bacteria Photorhabdus spp. and Xenorhabdus spp. are important biological control agents for controlling various insect pests worldwide because the EPN kill insect pests within 48-72 hours and also safe for environments. This study was to identify 6 isolates of EPN and their symbiotic bacteria native to Thailand by a molecular technique. Results of analysis and comparison of 28S rRNA sequences with GeneBank database showed that the EPN isolates were 3 of Heterorhabditis indica and 3 of Steinernema surkhetense. The symbiotic bacteria of the 6 EPN isolates of H. indica and S. surkhetense were analyzed and compared of recA sequences with GeneBank database were identified as 3 isolates of Photorhabdus luminescens subsp. hainanensis and 3 isolates of Xenorhabdus stockiae, respectively. Furthermore, the preliminary tests on the pathogenicity of the 6 EPN isolates and their symbiotic bacteria against the 5th instar larvae of the greater wax moth (Galleria mellonella) were examined. The results showed that the 5th instar larvae of the greater wax moth were highly susceptible to H. indica EPNKU64 followed by H. indica EPNKU67, H. indica EPNKU68, S. surkhetense EPNKU63, S. surkhetense EPNKU70 and S. surkhetense EPNKU85 and their LC90 values were 4, 19, 22, 72, 75 and 75 infective juveniles/insect larva, respectively. The pathogenicity of the 6 symbiotic bacteria against the 5th instar larvae of the greater wax moth at the rate of 106 CFU/water 50 µl/ insect larva was able to kill the insect larvae for 63.33%-83.33% after 3 days of exposure.