Abstract:
แอคตโนมัยซีตเป็นแบคทีเรียแกรมบวกที่พบได้ทั่วไปในธรรมชาติ มีความสามารถในการ สร้างสารเมแทบอไลต์ทุติยภูมิที่สำคัญหลายชนิดโดยเฉพาะอย่างยิ่งยาปฏิชีวนะ งานวิจัยนี้จึงมี วัตถุประสงค์เพื่อแยกแอคตโนมัยซีตจากดินตะกอนป่าชายเลน นำมาศึกษาความสามารถในการ สร้างเอนไซม์ไคติเนส และการยับยั้งราก่อโรคพืช โดยนำตัวอย่างดินตะกอน ที่เก็บจากป่าชายเลน จังหวัดระยองและจังหวัดสมุทรสาคร จำนวน 12 ตัวอย่าง มาแยกแอคติโนมัยซีตด้วยอาหาร humic acid vitamin agar และ starch casein agar พบว่าได้แอคตโนมัยซีตทั้งหมด 158 ไอโซเลต เมื่อจัด กลุ่มตามสีสปอร์บนอาหาร ISP medium 3 สามารถจำแนกได้ทั้งหมด 6 กลุ่ม ซึ่งไอโซเลตส่วนใหญ่ จัดอยู่ในกลุ่มสปอร์สีขาว (จำนวน 74 ไอโซเลต คิดเป็น 46.84 เปอร์เซ็นต์ )และการศึกษาชนิดของ กรด diaminopimelic (DAP) ในเซลล์ที่ถูกย่อย พบว่าเป็นกุ่ลม่ Streptomyces จำนวน 154 ไอโซเลต และเป็นกลุ่ม non-Streptomyces จำนวน 4 ไอโซเลต เมื่อนำแอคตโนมัยซีตทั้งหมดมาศึกษาการ สร้างเอนไซม์ไคติเนสบนอาหาร chitin agar พบว่าจำนวน 121 ไอโซเลต สร้างเอนไซม์ไคติเนสได้ โดยไอโซเลต Mg12-6 มีค่าการสร้างเอนไซม์สูงที่สุดเท่ากับ 1.88 นอกจากนี้ในการศึกษาความ สามารถยับยั้งราก่อโรคพืช Alternariabrassicicola และColletotrichum gloeosporioides บน อาหาร potato dextrose agar ด้วยวิธี dual culture พบว่าไอโซเลต Mg3-3 สามารถยับยั้งการเจริญ ของ A. brassicicola ได้อย่างสมบูรณ์ ส่วนไอโซเลต Mg2-10และMg3-3 สามารถยับยั้งการเจริญ ของ C. gloeosporioides ได้ 90.91 และ 98.18 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ ทั้งนี้การวิเคราะห์ลำดับ นิวคลีโอไทด์ของยีน 16S rRNA พบว่าไอโซเลต Mg12-6, Mg2-10และMg3-3คล้ายกับ Streptomyces thermocarboxydovorans (99.11 เปอร์เซ็นต์ ), Streptomyces cellostaticus (99.47 เปอร์เซ็นต์ )และStreptomyces similanensis (100 เปอร์เซ็นต์ ) ตามลำดับ
The actinomycetes are ubiquitous Gram-positive bacteria in the environment and have ability to produce several important secondary metabolites, especially antibiotics. The objectives of this research were to isolate actinomycetes from mangrove sediments, and screened for their ability to produce chitinase and to inhibit phytopathogenic fungi. A total of 158 actinomycetes were isolated from 12 mangrove sediments collected from Rayong and Samutsakorn provinces, using humic acid vitamin agar and starch casein agar. These isolates were separated into 6 distinct groupsbased on their spores colour when grown on International StreptomycesProject medium 3. Members of white series represent the most predominant group (74 isolates,46.84% of the total isolates obtained). Determination of diaminopimelic acid in whole-cell hydrolysates revealed that 154 isolates were characteristically Streptomyces, while 4 isolates were characteristically nonStreptomyces. Screening for chitinase production on chitin agar showed that 121 isolates produced chitinase, which isolate Mg12-6 gave the highest value at 1.88. Additionally, these isolates were observed for their activities to inhibit phytopathogenic fungi (Alternaria brassicicola and Colletotrichum gloeosporioides)by dual culture method on potato dextrose agar. Isolate Mg3-3 completely inhibited the growth of A. brassicicola. Whereas, isolates Mg2-10 and Mg3-3 could inhibit C. gloeosporioides at 90.91% and 98.18%, respectively. Molecular identification based on 16S rRNA gene sequences similarity revealed that isolates Mg12-6, Mg2- 10 and Mg3-3 were closely related to Streptomyces thermocarboxydovorans (99.11%) Streptomyces cellostaticus (99.47%) and Streptomyces similanensis (100%), respectively.