Abstract:
สาหร่ายทะเลสีแดงกราซิลาเรียสามารถใช้เป็นทรัพยากรทางเลือกสำหรับการผลิตเอทานอลได้ เนื่องจากสาหร่ายชนิดนี้มีปริมาณพอลิแซ็กคาไรด์สูง ในประเทศไทย Gracilaria fisheri เป็นชนิดที่มีการเพาะเลี้ยงมากในบ่อน้ำทิ้งจากการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำ การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อแยกยีสต์จาก G. fisheri และประเมินศักยภาพของยีสต์ที่คัดแยก ได้ในการผลิตเอทานอลจากชีวมวลสาหร่าย โดยเก็บตัวอย่าง G. fisheri ที่เลี้ยงในบ่อน้ำทิ้งจากการเลี้ยงกุ้ง ในจังหวัดสงขลา ภาคใต้ของประเทศไทย จากนั้นนำมาคัดแยกยีสต์จากตัวอย่างสาหร่าย และจำแนกชนิดของยีสต์โดยวิธีการ ตรวจวิเคราะห์ลำดับดีเอ็นเอที่บริเวณ Internally transcribed spacer region 2 (ITS2) ชีวมวลสาหร่าย G. fisheri ใช้เป็นซับสเตรทสำหรับการหมักเอทานอล และยีสต์ที่คัดแยกได้ใช้ในการผลิตเอทานอล โดยใช้สาหร่ายที่บดเป็นผง 2กรัม นำมาย่อยด้วยกรดซัลฟูริกความเข้มข้น 1 M ปริมาตร 50 ml ที่ อุณหภูมิ 95 °C เป็นเวลา 150 นาที การศึกษาจำแนกชนิดระดับโมเลกุลจำแนกยีสต์ได้ 4 ชนิด ได้แก่ Candida parapsilosis, Candida glabrata, Kodamaea ohmeriและ Aureobasidium pullulans ในจำนวนนี้ C.parapsilosis, C.glabrata และ K.ohmeri เจริญได้ดีในระหว่างการหมักเอทานอลโดยใช้สาหร่าย G. fisheri เป็นซับสเตรท ขณะที่ A. pullulans เซลล์ไม่เจริญ ยีสต์ K. ohmeri มีจำนวนเซลล์สูงสุด 4.43108 cells/ml ในช่วง 18 ชั่วโมงของการหมัก ขณะที่ C. parapsilosis และ C. glabrata มีจำนวนเซลล์สูงสุด 4.19108 และ 4.06108 cells/ml ในช่วง 24 และ 15 ชั่วโมงของการหมัก ตามลำดับ ยีสต์ C. glabrata ให้ปริมาณเอทานอลสูงสุด 2.510-2 g ethanol/g sugars ในขณะที่ C. Parapsilosis ให้ปริมาณเอทานอลต่ำสุด 1.7010-2 g ethanol/g sugars จากการศึกษานี้แสดงให้เห็นว่าอิพิไฟติก ยีสต์ที่คัดแยกจากสาหร่าย G. fisheri มีศักยภาพที่จะนำมาใช้ในการผลิตเอทานอลได้
The red seaweed Gracilariacan potentially be used as renewable resource for bioethanol production because of the high polysaccharide content of this seaweed. In Thailand, Gracilaria fisheri has been cultured using aquaculture effluent. This study aimed to isolate yeast from G. fisheriand evaluate the potential of these yeast in the production of ethanol from the algal biomass. We collected samples of G. fisheri cultivated in shrimp pond effluent in Songkhla province, southern Thailand and subsequently isolated epiphytic yeast from the seaweed. Yeast identification was performed by DNA sequence analysis of the internally transcribed spacer region 2 (ITS2). The G. fisheri biomass was used as a substrate for ethanol fermentation, while the isolated yeast was used as the ethanol producer. The algal powder (2 g) was hydrolyzed with 50 mL of 1 M H2SO4 at 95°C for 150 min. Our molecular study identified four yeast species, namely, Candida parapsilosis, Candida glabrata, Kodamaea ohmeri and Aureobasidium pullulans. Among these species, C. parapsilosis, C. glabrata, and K. ohmeri grew well during the fermentation by using G. fisheri as a substrate, while A. pullulans was unable to grow. The highest yeast cell mass obtained from K. ohmeri was 4.43108 cells/ml after 18 h of fermentation, while the highest cell mass obtained from C. parapsilosis and C. glabrata was 4.19108 and 4.06108 cells/ml, respectively, at fermentation periods of 24 h and 15 h, respectively. The highest ethanol production was obtained from C. glabrata (2.510-2 g ethanol/gsugars), while the lowest ethanol production was obtained from C. parapsilosis (1.7010-2 g ethanol/gsugars). This study revealed that the epiphytic yeast isolated from G. fisherihad potential for use in the production of ethanol