ลักษณะอาการของโรคและการถ่ายทอดทางเมล็ดของเชื้อ Columnea latent viroid ในมะเขือเทศ

Symptomatology and seed transmission of columnea latent viroid in tomato

Name: สุวิมล เหล่ามโนธรรม

ThaSH: มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์ -- วิทยานิพนธ์. วท.ม. (โรคพืช) 2561.

Classification :.LCCS: SB608.T75

ThaSH: มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์. -- สาขาโรคพืช -- วิทยานิพนธ์

ThaSH: มะเขือเทศ -- โรคและศัตรูพืช

ThaSH: โรคไวรอยด์ในพืช

ThaSH: ไวรอยด

Abstract: การศึกษาลกัษณะอาการของเชื้อ Columnea latent viroid(CLVd) ในมะเขือเทศ 2 พันธุ์คือพันธุ์สีดาทิพย์ 4 และ พันธุ์เชอร์รี่ให้ระยะเวลาการเข้าทำลายของเชื้อ CLVd ต่างกันใน 3 ระยะโดยปลูกเชื้อที่ระยะก่อนติดดอกระยะติดดอกและระยะติดผลยืนยันผลการติดเชื้อโดยใช้เทคนิค reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) พบอาการของโรคหลังจากการปลูกเชื้อ 2 สัปดาห์ที่บริเวณยอดแสดงอาการแผลไหม้ที่เส้น ใบเป็นจุดเล็กๆ ใบยอดมีขนาดเล็กลงจากน้นัอาการแผลไหม้กระจายทั่วทั้งใบและต้น ผลด่าง และต้นมีอาการเตี้ยแคระนอกจากนั้นยังพบอาการแผลไหม้ภายในผลที่บริเวณ columella ซึ่งเป็นอาการที่ยังไม่เคยมีรายงานมา ก่อน การวิเคราะห์ข้อมูลความรุนแรงของโรคโดยเปรียบเทียบความสูงต้น และความเสียหายผลผลิต (น้ำหนัก ผลผลิตและขนาดของผล) ในทั้ง 2 พันธุ์ พบว่าอาการเตี้ยแคระในพันธุ์เชอร์รี่ จะแสดงอาการรุนแรงกว่าพันธุ์สีดาทิพย์ 4 แต่มะเขือเทศพันธุ์สีดาทิพย์4 จะแสดงอาการด่างที่ผลชัดเจนกว่าพันธุ์เชอร์รี่่ เมื่อพิจารณาความเสียหายของผลผลิตจะแตกต่างกันทางสถิติขึ้นกับระยะเวลาในการเข้าทำลายของเชื้อในต้นมะเขือเทศที่ระยะการ เจริญเติบโตที่แตกต่างกัน ในพันธุ์สีดาทิพย์4 สำหรับในพันธุ์เชอร์รี่ พบว่าการเข้าทำลายของเชื้อ CLVdในระยะติดผลไม่มีความแตกต่างทางสถิติกับผลผลิตที่ได้จากต้นปกติในการศึกษาการเคลื่อนที่ของเชื้อ CLVd เชื้อสามารถแพร่กระจายทั่วต้น ภายในระยะเวลา4 สัปดาห์หลังการปลูกเชื้อสําหรับความสามารถในการถ่ายทอด โรคโดยวิธีกลผ่านทางการใช้ใบมีดเพื่อจำลองการตดัแต่งกิ่งของเกษตรกร สังเกตอาการและตรวจติดตามเชื้อทุกสัปดาห์ด้วยเทคนิค RT-PCR ในมะเขือเทศพันธุ์สีดาทิพย์ 4 พบว่าเชื้อ CLVd สามารถถ่ายทอดจากต้นที่1 ไป จนถึงต้นที่10 และมีบางต้นที่แสดงอาการช้าถึงจะปรากฏอาการและตรวจพบเชื้อ CLVdได้ในสัปดาห์ที่ 6 ด้วย เทคนิค RT-PCR จากการค้นพบในครั้งนี้ทำให้รู้ว่าการถ่ายทอดโดยวิธีกลเป็นวิธีที่ก่อให้เกิดการแพร่กระจายเชื้อไวรอยด์ในสภาพแปลงปลูกมะเขือเทศในส่วนการถ่ายทอดทางเมล็ดพันธุ์ของเชื้อ CLVdในมะเขือเทศพันธุ์สีดาทิพย์ 4 ตรวจพบเชื้อ CLVd ที่ต้นอ่อนที่ได้จากการเพาะเมล็ดจากเมล็ดมะเขือเทศของต้น ที่ได้รับการปลูกเชื้อในระยะติดผลโดยเพาะบนกระดาษ (Top of paper)ในห้องทดลองเป็นเวลา 10 วัน คิดเป็นอัตราการถ่ายทอดทาง เมล็ดประมาณ 1.5-31.7 % และยืนยันผลด้วยวิธีวิเคราะห์ลำดับเบส เมื่อ เปรียบเทียบความเหมือนของตัวอย่างเชื้อ CLVd ที่ใช้ปลูกเชื้อที่ต้นกับตัวอย่าง จากเมล็ดดำ และต้นอ่อนติดเชื้อพบว่า มีความเหมือนที่ 99.73 และ 99.46 % ตามลำดับ จากนั้นนำ RNA ที่สกัดจากต้นอ่อนที่ตรวจพบเชื้อ CLVdไปปลูกเชื้อลงมะเขือเทศพนัธุ์ Rutgers โดยตรวจพบเชื้อ CLVd และแสดงอาการที่สัปดาห์ที่ 8 หลังการปลูกเชื้อ จากนั้นสุ่มเมล็ดจำนวน 4,230เมล็ด นําไปปลูกทดสอบในโรงเรือนปลูกพืชทดลอง (grow -out test) ซึ่งเป็นอีกวิธีหนึ่งที่ใช้ทดสอบการถ่ายทอดทางเมล็ด ปรากฏว่าตรวจไม่พบเชื้อ CLVd ที่สัปดาห์ที่ 8 หลังการหว่านเมล็ด ซึ่งอาจเนื่องจากเมล็ดที่นำมาทดสอบยงัมี ปริมาณไม่เพียงพอในการทดสอบในสภาพโรงเรือนปลูกพืชทดลอง Symptoms study of Columnea latent viroid (CLVd)by mechanical inoculation on Seedathip 4 and Cherry varieties at 3 different growth stage of preflowering, flowering and fruit setting, the inoculated tomato plants were confirmed infection by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) technique. The infected tomato plants exhibited small spot necrosis on leaf vein as well as small apical leaves and then necrosis symptom was over of leave and stem, fruit mosaic and whole plant stunt. Moreover, the most infected fruit showed necrosis on columella that has not been reported before. Disease virulent analysis by comparison of plant height and yield loss (fruit weight and size) in both varieties, the results showed that Cherry variety was more stunt than Seedathip 4, but Seedathip 4 was expressed mosaic symptom on fruits more than Cherry. For total yield loss in both characteristics, the plant height and yield loss were displayed in significant difference depended on different growth stage of tomato plant during infection in Seedathip 4 tomato. In Cherry tomato, the infected plants at fruit setting stage inoculation showed non-significant difference in disease virulence of uninoculated plant. In CLVd movement study, it could spread all over the whole plant within 4 weeks post inoculation. For mechanical transmission study by using razor blade to perform as tomato cutting of tomato farmers, the inoculated tomato plants were determined by RT-PCR technique in every week for 8 weeks post inoculation. The results showed that CLVd could be transmitted from plant number 1 -10 and some tomato plants expressed late symptoms and were positive for CLVd at 6 weeks post inoculation by RT-PCR technique. Based on this finding, horizontal transmission is a way to spread of the viroid in tomato fields. In CLVd seed transmission of Seedathip 4 tomato, the CLVd was found in seedling from tomato seed of infected plant at fruit setting stage inoculation by using top of paper method at 10 days post sowing. The seed transmission rate was 1.5-31.7 % and confirmed by sequencing. The sequence comparison of CLVd inoculum source with CLVd sequences of black seed and infected seedling, were 99.73 and99.46 %, respectively. The RNA extraction from CLVd infected tomato seedling inoculated into Rutgers tomato seedling was successfully infected on Rutgers seedling by RT-PCR detection and expressed symptoms at 8 weeks post inoculation. And then, 4,230 seeds were sampling for grow-out test in the greenhouse for seed transmission test. The results was negative for CLVd at 8 weeks post sowing that might be less seed number for grow-out test in the greenhouse condition.

มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์. สำนักหอสมุด

Address: กรุงเทพมหานคร

Email: tdckulib@ku.ac.th

Name: คนึงนิตย์ เหรียญวรากร

Role: อาจารย์ที่ปรึกษาวิทยานิพนธ์หลัก

Created: 2561

Modified: 2568-06-27

Issued: 2568-06-27

วิทยานิพนธ์/Thesis

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

URL: https://www.lib.ku.ac.th/KUthesis/2561/suvimol-lao-all.pdf

CallNumber: SB608.T75 .ส471

tha

DegreeName: วิทยาศาสตรมหาบณฑั ิต

Level: ปริญญาโท

Descipline: โรคพืช

Grantor: มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์

©copyrights มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	suvimol-lao-all.pdf	4.44 MB

ใช้เวลา

0.030939 วินาที