Abstract:
งานวิจัยนี้มีจุดมุ่งหมายในการคัดเลือกราย่อยไม้ในประเทศไทยที่สามารถผลิตโปรตีนไฮโดรโฟบิน โดยคัดเลือกเบื้องต้นจากการวัดค่ามุมสัมผัสบนผิวโคโลนีของราย่อยไม้ทั้งหมด 17 ชนิด ผลการคัดเลือกราย่อยไม้ที่มีค่ามุมสัมผัสสูงสุด 5 อันดับแรก ได้แก่ Ganoderma gibbosum RN01, Fomes fomentarius BKN01, Pleurotus ostreatus, Schizophyllum commune และTrametes elegans unkD มีค่ามุมสัมผัสเท่ากับ 136.9, 120.1, 120, 115.9 และ 115.4 องศาตามลำดับ ได้ปริมาณโปรตีนต่อน้ำหนักเส้นใยเท่ากับ 2.7, 2.5, 1.3, 1.5 และ 2.3 มิลลิกรัมโปรตีนต่อกรัมเส้นใยแห้งตามลำดับ เปรียบเทียบประสิทธิภาพการผลิตโปรตีนไฮโดรโฟบินจากราย่อยไม้ที่คัดเลือกพบว่า ราย่อยไม้ T. elegans unkD มีประสิทธิภาพการผลิตโปรตีนไฮโดรโฟบินที่สูง โดยใช้เวลาในเพาะเลี้ยง 7 วัน จากการวิเคราะห์ขนาดโมเลกุลของโปรตีนไฮโดรโฟบินพบว่า โปรตีนไฮโดรโฟบินของราย่อยไม้ทั้ง 5 ชนิด มีขนาดโมเลกุลอยู่ในช่วง 8.5 - 9.8 กิโลดาลตัน สารสกัดโปรตีนไฮโดรโฟบินจากราย่อยไม้ F. fomentarius BKN01 สามารถเปลี่ยนพื้นผิวที่ชอบน้ำให้เป็นพื้นผิวที่ไม่ชอบน้ำได้ดีที่สุด และสารสกัดไฮโดรโฟบินจากราย่อยไม้ T. elegans unkD สามารถเปลี่ยนพื้นผิวที่ไม่ชอบน้ำให้เป็นพื้นผิวที่ชอบน้ำได้ดีที่สุด เมื่อวิเคราะห์ลำดับกรดอะมิโนของโปรตีนไฮโดรโฟบินจากราย่อยไม้ทั้ง 5 ชนิดด้วยเทคนิค LC-MS/MS พบว่ามีลำดับกรดอะมิโนคล้ายคลึงกับลำดับกรดอะมิโนของโปรตีนไฮโดรโฟบินที่มีรายงานไว้ในฐานข้อมูล แสดงว่าราย่อยไม้ทั้ง 5 ชนิดนี้สามารถผลิตโปรตีนที่แสดงคุณสมบัติของโปรตีนไฮโดรโฟบินได้
The objective of this study was to identify the potential wood-degrading fungi for hydrophobin protein production. Seventeen isolates of wood-degrading fungi found in Thailand were by measuring the water contact angle of their colony surface. Five isolates of screened for hydrophobin protein wood-degrading fungi with the highest water contact angle value were Ganoderma gibbosum RN01, Fomes fomentarius BKN01, Pleurotus ostreatus, Schizophyllum commune and Trametes elegans unkD with the water contact angle of 136.90, 120.1, 120, 115.9 and 115.4 degree respectively. The hydrophobin yield of these fungi were 2.7, 2.5, 1.3, 1.5 and 2.3 mg/mycelium dry weight, respectively. Additionally, T. elegans unkD could efficiently produce hydrophobin protein within 7 day. The molecular weight of crude extracted proteins from these 5 wood-degrading fungi were 8.59.8 kDA. These protein extracts were able to change the surface properties. Protein extract from F. fomentarius BKN01 could efficiently reduce water contact angle of hydrophilic surface. On the other hand, protein extract from T. elegans unkD could efficiently increase the water contact angle of hydrophobic surface. The amino acid sequences of the hydrophobins identified by LC-MS/MS, were similar to the amino acid sequences of hydrophobin in the database. This study showed that these 5 wood-degrading fungi could produce hydrophobin proteins that were able to exhibit properties of hydrophobin proteins.