การแสดงออกของยีน CBD (cellulose binding domain) ในยาสูบดังแปลงพันธุกรรม ภายใต้การควบคุมของโปรโมเตอร์ CaMV35S และ AtExp4

Expression of a CBD (cellulose binding domain) gene in transgenic tobacco (Nicotiana tabacum) under the control of the CaMV36S and AtExp4 promoter

Name: พรเทพ เกียรติดำรงค์กุล

ThaSH: มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์ -- วิทยานิพนธ์. ปร.ด. (พันธุศาสตร์) 2562

Classification :.LCCS: QH450

ThaSH: มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์. สาขาพันธุศาสตร์ -- วิทยานิพนธ์

ThaSH: การแสดงออกของยีน

ThaSH: เซลลูเลส

ThaSH: ยาสูบ -- การตัดแต่งพันธุกรรม

ThaSH: ยาสูบ -- สัณฐานวิทยา

ThaSH: เซลล์ -- การเจริญเติบโต

ThaSH: เซลล์พันธุศาสตร์พืช

ThaSH: การเจริญเติบโตของพืช

ThaSH: การเปลี่ยนสภาพของเซลล์

ThaSH: โปรตีนเซลล์

Abstract: วิทยานิพนธ์เล่มนี้เป็นการเปรียบเทียบการแสดงออกของยีน CBD (cellulose binding domain) ของจากเอนไซม์ endoglucanase CenB ใน Cellulomonas fimi ที่ถ่ายเข้าสู่ต้นยาสูบภายใต้การควบคุมของโปรโมเตอร์ 2 ชนิดคือ CaMV35S และ AtExp4ผ่าน Agrobacterium tumefaciens ผลปรากฎว่าได้ต้นยาสูบดัดแปลงพันธุกรรมที่มีโปรโมเตอร์ CaMV35S ควบคุมยีน CBD (โคลน 35SCBD) จำนวน 9 โคลน และต้นยาสูบดัดแปลงพันธุกรรมที่มีโปรเตอร์ AtExp4 ควบคุมยีน CBD (ExpCBD) จำนวน 8 โคลน เมื่อตรวจสอบการแสดงออกของยีนด้วยวิธี real time RT-PCR และ western blot พบว่า ต้นยาสูบดัดแปลงพันธุกรรมที่มีโปรโมเตอร์ CaMV35S ควบคุมยีน CBD มีการแสดงในระดับอาร์เอ็นเอ และระดับโปรตีนมากกว่า ต้นยาสูบดัดแปลงพันธุกรรมที่มีโปรเตอร์ AtExp4 ควบคุมยีน CBD เมื่อตรวจสอบการเจริญเติบโตของยาสูบดัดแปลงพนธุกรรมที่มีโปรโมเตอร์ CaMV35S ควบคุมยีน CBD และโปรเตอร์ AtExp4 ควบคุมยีน CBD โดยวัดความยาวลำต้น น้ำหนักสด และน้ำหนักแห้งของต้นยาสูบดัดแปลงพันธุกรรมอายุ 40, 60 และ 90 วัน หลังการปลูก พบว่า ความยาวลำต้น น้ำหนักสด และน้ำหนักแห้งของต้นยาสูบดัดแปลงพันธุกรรมที่ทั้งหมดไม่แตกต่างจากต้นที่ไม่ได้รับการถ่ายยีน (control) นอกจากนี้ยังตรวจสอบโครงสร้างภายในต้นยาสูบดัดแปลงพันธุกรรมที่อายุ 60 วัน ได้แก่ ขนาดพื้นที่ของไซเล็มทุติยภูมิ พบว่า ขนาดเซลล์ไซเล็มทุติยภูมิของต้นยาสูบดัดแปลงพันธุกรรมที่มีโปรโมเตอร์ CaMV35S ควบคุมยีน CBD มีขนาดใหญ่กว่าต้นยาสูบที่ไม่ได้รับถ่ายยีน ในขณะที่ขนาดเซลล์ไซเล็มทุติยาภูมิของต้นยาสูบดัดแปลงพันธุกรรมที่มีโปรโมเตอร์ AtExp4 ควบคุมยีน CBD มีขนาดเล็กกว่า ต้นยาสูบที่ไม่ได้รับถ่ายยีน This thesis has comprared the expression of CBD gene derived from endoglucanase CenB of Cellulomonas fimi. CBD gene under the control of the CaMV35Spromoterand AtExp4 promoter were transferred by Agrobacterium tumefaciens. The result have showed nine independent transgenic tobacco clones of CBD gene under the control of the CaMV35S promoter (35SCBD) and eight independent transgenic tobacco clones of CBD gene under the control of the AtEpx4 promoter ( ExpCBD) which were regenerated after Agrobacterium- mediated transformation. Expression of CBD gene in transgenic tobacco plants were detected by real time RT-PCR and western blot. Real time RT-PCR and western blot revealed these of expression in RNA level and protein level in transgenic tobaccoplantsof CBD gene under the control of the CaMV35Spromoter were higher than that of transgenic tobacco plants of CBD gene under the control of the AtExp4 promoter. The growth of transgenic tobacco plants of CBD gene under the control of the CaMV35S promoter and the growth of transgenic tobacco plants of CBD gene under the control of the AtExp4 promoter were evaluated useing length, fresh weight and dry weight of 40, 60 and 90 days after planting. It was found that there was no signigicant difference between stem length, fresh weight and dry weight of all transgenic tobacco plant and the wild-type control plant. Furthermore, the60 days-old transgenic tobacco plants were crossed section to observe their size of secondary xylem cell. The secondary xylem cell size of transgenic tobacco plants of CBD gene under the control of the CaMV35S were significantly bigger than that of wild-type control plant but the size secondary xylem cell of transgenic tobacco plants of CBD gene under the control of the AtExp4 were significantly smaller than that of the wild-type control plant.

มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์. สำนักหอสมุด

Address: กรุงเทพมหานคร

Email: tdckulib@ku.ac.th

Name: ศุภชัย วุฒิพงศ์ชัยกิจ

Role: อาจารย์ที่ปรึกษาวิทยานิพนธ์หลัก

Created: 2562

Modified: 2567-06-05

Issued: 2567-06-05

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

URL: https://kasetsart.idm.oclc.org/login?url=https://www.lib.ku.ac.th/KUthesis/2562/pornthep-kea-all.pdf

CallNumber: QH450.พ17

tha

DegreeName: ปรัชญาดุษฎีบัณฑิต

Level: ปริญญาเอก

Descipline: พันธุศาสตร์

Grantor: มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์

©copyrights มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	pornthep-kea-all.pdf	3.36 MB

ใช้เวลา

0.021313 วินาที