Abstract:
Chlorella sp. เป็นสาหร่ายสีเขียวขนาดเล็กที่สามารถผลิตน้ำมันได้สูงและมีศักยภาพในการนำมาใช้ในการผลิตไบโอดีเซล วัตถุประสงค์ของงานวิจัยนี้เพื่อทำการกลายพันธุ์ซ้ำสาหร่าย สีเขียวขนาดเล็ก Chlorella sorokiniana DMKU5202-31 สายพันธุ์กลายด้วยรังสี UV ด้วยสาร ก่อการกลายพันธุ์ และศึกษาสภาวะที่เหมาะสมในการเพาะเลี้ยงเพื่อผลิตน้ำมัน จากการกลายพันธุ์ซ้ำด้วย EMS (Ethyl methansulfonate) ความเข้มข้น 0.5 M เป็นเวลา 1 ชั่วโมง จำนวน 40,323 โคโลนี พบว่า C. sorokiniana DMKU5202-D223 ผลิตน้ำมันได้สูงสุด การศึกษาสภาวะที่เหมาะสมในการเพาะเลี้ยงโดยการออกแบบการทดลองทางสถิติ ด้วยวิธี Plackett and Burman design และวิธีพื้นผิวตอบสนอง (Response surface methodology) พบว่า มี 4 ปัจจัยที่มีผลต่อการผลิตน้ำมัน เมื่อทำการเพาะเลี้ยงในสภาวะที่มีกลูโคส 10 กรัมต่อลิตร พีเอช 8 อัตราการให้ก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ 3 เปอร์เซ็นต์ และมีสภาวะความเข้มแสง 3,000 ลักซ์ เป็นเวลา 5 วัน C. sorokiniana DMKU5202-D223 สายพันธุ์กลายซ้ำ มีการผลิตชีวมวลเท่ากับ 6.32 กรัมต่อลิตร ผลิตน้ำมันเท่ากับ 0.65 กรัมต่อลิตร มีน้ำมันสะสมภายในเซลล์เท่ากับ 10.45 เปอร์เซ็นต์ ดังนั้นสาหร่ายสายพันธุ์กลายซ้ำดังกล่าวจึงมีศักยภาพที่จะนำมาพัฒนาเพื่อใช้เป็นวัตถุดิบในการผลิต ไบโอดีเซล
Chlorella sp. is a green microalga and well-known for its ability to accumulate high amount of lipid in the cells. This alga is considering to be a potential energy source for biodiesel production. The objectives of this study was to re-mutate the Chlorella sorokiniana DMKU5202-31 which was the UV mutant strain by using Ethyl methansulfonate, a chemical mutagen and optimization of culture condition of the double mutant strain for oil production. After treatment with 0.5 M EMS for 1 hour 40,323 colonies was obtained and subjected to screening. The double mutant strain C. sorokiniana DMKU5202-D223 was selected due to its high lipid production. For optimization of culture condition the Placket-Burman design and the Response surface Methodology (RSM) were employed. The significant four factors were identified by Placket-Burman design. The experiment model concluded that glucose concentration of 10 g/L, pH 8, 3% CO2 and light 3,000 luxs were suitable to enhance oil production. The optimization of oil production conditions of C. sorokiniana DMKU5202-D223 showed from the RSM-CCD, as followed: 6.32 g/L of biomass production, 0.65 g/L of lipid production, and 10.45% of lipid content within 5 days, respectively. In conclusion, the double mutant strain showed relatively high oil content and could be used as the raw material for biodiesel production.