การระบุและวิเคราะห์เปปไทด์สายสั้นที่มีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระจากน้ำทิ้งที่ได้จากน้ำล้างก่อนกระบวนการดองเค็มแมงกะพรุนลอดช่อง (Lobonema smithii)

Identification and analysis of short peptides derived from wastewater in pre-salted jellyfish (Lobonema smithii) processing

Name: นิชากร โอชา

ThaSH: เปปไทด์ต้านจุลชีพ

ThaSH: แอนติออกซิแดนท์

ThaSH: โครมาโตกราฟี

ThaSH: แมงกะพรุนลอดช่อง -- การแปรรูป

ThaSH: น้ำเสีย -- การบำบัด

ThaSH: คุณภาพน้ำทิ้ง

Abstract: การแปรรูปแมงกะพรุนลอดช่องเพื่อส่งออกในเชิงพาณิชย์นั้น มีส่วนของน้ำล้างจากบ่อพักแมงกะพรุนก่อนกระบวนการดองเค็มที่อุดมไปด้วยเปปไทด์สายสั้นจำนวนมาก เนื่องจากการย่อยโดยธรรมชาติของตัวแมงกะพรุนที่มีกลไกการย่อยตัวเองหลังขึ้นจากทะเล งานวิจัยนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อวิเคราะห์หาเปปไทด์ที่สายสั้นที่มีฤทธิ์ทางชีวภาพโดยเน้นฤทธิ์การเป็นสารต้านอนุมูลอิสระจากน้ำล้างที่เหลือทิ้งดังกล่าว ผลการทดลองพบว่า ส่วนของเปปไทด์ที่มีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระจากน้ำล้างสามารถแยกบริสุทธิ์ได้ด้วยเทคนิค Cation Exchange และ Reversed Phase Chromatography ตามลำดับ ซึ่งลำดับกรดอะมิโนของเปปไทด์จะถูกระบุด้วยเทคนิค LC-MS/MS และได้เปปไทด์ที่คาดว่ามีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระจำนวน 6 ลำดับ ได้แก่ CVICRSIYDRNEIG (P1), NLVDLAEKAQLLHE (P2), ARIKFNSKLKPMLYIM (P3), KNIQYKVVKKK (P4), KEKNPPYLRFLTVL (P5) และ RYRLRKKFPFPPT (P6) ที่ถูกนำมาสังเคราะห์พร้อมทั้งทดสอบฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระในหลอดทดลองเทียบกับสารมาตรฐานโทรลอกซ์ ที่ความเข้มข้น 0.1 mg/mL ด้วยวิธี DPPH, ABTS และ FRAP จากการทดลองพบว่า วิธี ABTS เป็นวิธีสามารถตรวจพบฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของเปปไทด์ทั้ง 6 ลำดับได้ จึงใช้วิธีดังกล่าวทดสอบความเข้มข้นที่ออกฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระได้ 10 เปอร์เซนต์ (IC10) พบว่าอยู่ในช่วงความเข้มข้น 0.23 ถึง 1.34 mg/mL ยกเว้นเปปไทด์ NLVDLAEKAQLLHE (P2) ที่ไม่สามารถหาค่า IC10 ได้ หลังจากทดสอบความเสถียรของเปปไทด์ได้ทั้ง 6 ลำดับ พบว่า เปปไทด์ KNIQYKVVKKK (P4) และ KEKNPPYLRFLTVL (P5) ที่เสถียรเมื่อเปลี่ยนแปลงอุณหภูมิ (30, 50, 70, 90 °C) เปปไทด์ ARIKFNSKLKPMLYIM (P3), KNIQYKVVKKK (P4), KEKNPPYLRFLTVL (P5) และ RYRLRKKFPFPPT (P6) เสถียรเมื่อเปลี่ยนแปลงค่า pH (3.6, 5, 7, 8.5) เปปไทด์ KNIQYKVVKKK(P4) เสถียรในสภาวะจําลองระบบการย่อยในทางเดินอาหารในหลอดทดลอง การศึกษาวิจัยนี้เป็นการศึกษาวิจัยในการพัฒนาเพื่อเป็นองค์ความรู้ที่สามารถต่อยอดไปสู่อุตสาหกรรมอาหารและยาในอนาคต

Abstract: The wastewater produced during the commercial processing of pre-salted jellyfish (Lobonema smithii) from ponds was rich in many short-chain peptides. These peptides are produced during autolysis process of the jellyfish after harvesting them from seawater. This research aimed to analyse bioactive short-chain peptides from wastewater in pre-salted jellyfish (Lobonema smithii) processing with a focus on antioxidant activity. The results showed that the antioxidant peptide fractions from the wastewater were purified by cation exchange and reversed phase chromatography, respectively. Then, the amino acid sequences of the peptides obtained were then identified by the LC-MS/MS technique. The six candidate peptides which might contain antioxidant activity were identified (CVICRSIYDRNEIG (P1), NLVDLAEKAQLLHE (P2), ARIKFNSKLKPMLYIM (P3), KNIQYKVVKKK (P4), KEKNPPYLRFLTVL (P5) and RYRLRKKFPFPPT (P6)). The six peptides were synthesized and their antioxidant activity was evaluated using the standard Trolox at a concentration of 0.1 mg/mL according to DPPH, ABTS and FRAP methods. The experiment revealed that the ABTS method could identify the antioxidant activity of each peptide sequence. Except for NLVDLAEKAQLLHE (P2), the antioxidant activity concentration of 10 percent (IC10) as determined by the ABTS technique was in the range of 0.23 to 1.34 mg/mL. After testing the stability of all six sequences of peptides, KNIQYKVVKKK (P4) and KEKNPPYLRFLTVL (P5) remained stable over a range of temperatures (30, 50, 70, and 90 °C). While the bioactivity of, ARIKFNSKLKPMLYIM (P3), KNIQYKVVKKK (P4), KEKNPPYLRFLTVL (P5), and RYRLRKKFPFPPT (P6) still remained after exposure to pH (3.6, 5, 7, 8.5). KNIQYKVVKKK (P4) showed high activity after an in vitro gastrointestinal digestion. This research provided novel knowledge not only for future food but also pharmaceutical application.

มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าพระนครเหนือ. สำนักหอสมุดกลาง

Address: กรุงเทพมหานคร

Email: library@kmutnb.ac.th

Name: เบญจมาภรณ์ วงศ์อนุ

Role: ที่ปรึกษาวิทยานิพนธ์

Email : benjamaporn.w@sci.kmutnb.ac.th

Name: สิทธิรักษ์ รอยตระกูล

Role: ที่ปรึกษาวิทยานิพนธ์

Created: 2564

Modified: 2566-06-13

Issued: 2566-06-13

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

tha

DegreeName: วิทยาศาสตร์มหาบัณฑิต

Level: ปริญญาโท

Descipline: เทคโนโลยีชีวภาพ

Grantor: มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าพระนครเหนือ

©copyrights มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าพระนครเหนือ

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	B17598485.pdf	2.92 MB	7	2025-06-13 17:46:23

ใช้เวลา

0.021941 วินาที