Abstract:
การศึกษาครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาเชื้อสาเหตุ อาการโรค ความรุนแรงในการทำให้เกิดโรค และคัดเลือกแบคทีเรียที่สามารถยับยั้งการเจริญของเส้นใยเชื้อรา Colletotrichum spp. สาเหตุโรคแอนแทรคโนสของแก้วมังกรในระดับห้องปฏิบัติการและในสภาพโรงเรือนปลูกพืชทดลอง โดยเก็บตัวอย่างกิ่งและผลแก้วมังกรที่เป็นโรคมาแยกเชื้อรา Colletotrichum spp.จากนั้นนำมาศึกษาเชื้อสาเหตุโดยใช้ลักษณะทางสัณฐานวิทยาร่วมกับการวิเคราะห์ลำดับเบสของเชื้อรา สามารถจำแนกเชื้อรา Colletotrichum spp. ได้ทั้งหมด 4 ไอโซเลต คือ C. siamense, C. aenigma, C. gloeosporioides และ C. truncatum จากนั้นนำมาศึกษาความรุนแรงในการทำให้เกิดโรค พบเชื้อรา C. gloeosporioides ก่อให้เกิดโรคในผล กิ่งแก้วมังกร และในผลพริกเหลืองได้รุนแรงที่สุด จากการคัดเลือกแบคทีเรียที่มีความสามารถในการยับยั้งการเจริญของเส้นใยเชื้อรา Colletotrichum spp. บนอาหาร PDA ที่ทดสอบกับ แบคทีเรีย 265 ไอโซเลต พบว่า แบคทีเรีย B. methylotrophicus ไอโซเลต PB182, PB255, PB257 และ B. subtilis ไอโซเลต PB223 มีความสามารถสูงในการยับยั้งการเจริญของเส้นใยเชื้อราบนอาหาร PDA จากนั้นนำแบคทีเรียทั้ง 4 ไอโซเลต มาทดสอบกับเชื้อรา C. gloeosporioides และ C. truncatum ในการยับยั้งการงอกของสปอร์เชื้อราและความยาวของ germ tube การยับยั้งการเจริญของเส้นใยเชื้อราในอาหารเหลว การศึกษาฤทธิ์ของสารระเหยจาก แบคทีเรียในการยับยั้งการเจริญของเส้นใยเชื้อราบนอาหารแข็ง และการศึกษาฤทธิ์สารระเหยจากแบคทีเรียในการลดความสามารถของเชื้อราที่ก่อโรคได้บนผลแก้วมังกร พบว่า B. methylotrophicus ไอโซเลต PB257 สามารถยับยั้งการงอกของสปอร์ ลดความยาวของ germ tube ยับยั้งเจริญของเส้นใยเชื้อราในอาหารเหลว มีฤทธิ์จากสารระเหยในการยับยั้งการเจริญของเส้นใยเชื้อราบนอาหาร PDA และลดความสามารถของเชื้อราที่ก่อโรคบนผลแก้วมังกรได้ดีที่สุด การทดสอบความสามารถแบคทีเรียในการควบคุมโรคแอนแทรคโนสบนผล และกิ่งแก้วมังกรในสภาพห้องปฏิบัติการกับเชื้อรา C. gloeosporioides และ C. truncatum พบว่ากรรมวิธีการฉีดพ่นเซลล์แขวนลอยของแบคทีเรีย B. methylotrophicus ไอโซเลต PB257 ก่อนวางเชื้อรา 24 ชั่วโมง สามารถลดความรุนแรงของเชื้อสาเหตุโรคทั้งบนผลและกิ่งได้ดีที่สุด ส่งผลให้แผลมีขนาดเล็กที่สุดโดยมีค่าความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติเมื่อเปรียบเทียบกับชุดควบคุม สำหรับการทดสอบการควบคุมโรคแอนแทรคโนสบนกิ่งแก้วมังกรในสภาพโรงเรือนโดยทดสอบกับเชื้อรา C. gloeosporioides พบว่าในกรรมวิธีการฉีดพ่นเซลล์แขวนลอยแบคทีเรีย B. methylotrophicus ไอโซเลต PB257 ก่อนวางเชื้อรา 24 ชั่วโมง และกรรมวิธีฉีดพ่นสารเคมี prochlolaz ในอัตราแนะนำพร้อมกับการวางเชื้อราสาเหตุโรค สามารถลดความรุนแรงของเชื้อรา C.gloeosporioides สาเหตุของโรคแอนแทรคโนสบนกิ่งได้ที่สุดใกล้เคียงกันทั้ง 2 กรรมวิธี โดยมีค่าความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติเมื่อเปรียบเทียบกับชุดควบคุม
This study aims to study the causal agent, symptom, aggressiveness of the pathogens and screening the bacteria which are effective in inhibiting the mycelial growth of Colletotrichum spp., the causal agant of anthracnose of dragon fruit in the laboratory and greenhouse conditions. Plant samples with anthracnose symptom are collected and subsequently eight isolates of Colletotrichum spp. are obtained. Based on morphological and molecular characteristics, they are identified as C. siamense, C. aenigma, C. gloeosporioides and C. truncatum. C. gloeosporioides is the most aggressive isolate in causing anthracnose symptom in the fruits, twigs of dragon fruit and yellow chilli. Among 265 isolates of the isolated bacteria, B. methylotrophicus isolates PB182, PB255, PB257 and B. subtilis isolate PB223 are highly effective in inhibiting the mycelial growth of Colletotrichum spp. These four bacteria are subsequently tested against C. gloeosporioides and C. truncatum to assess their capability in inhibiting spore germination, reducing the length germ tube, decreasing mycelial mass in liquid culture, inhibiting the radial growth of the pathogenic fungi from the volatile compounds and suppressing the aggressiveness of the fungi in causing disease on the fruits of dragon fruit. B. methylotrophicus PB257 is effective in all aspects in these laboratory tests. The volatile compounds produced by B. methylotrophicus PB257 in inhibiting the radial growth of pathogenic fungi. The compounds produced by B. methylotrophicus PB257 also suppress the aggressiveness of the fungi in causing disease on the fruits of dragon fruit. In the laboratory, spraying the cell suspension of B. methylotrophicusPB257 to the fruits and the twigs of dragon fruit 24 hours before inoculating these plant tissues with C. gloeosporioides and C. truncatum, is effective in suppressing anthracnose symptom on the fruits and the twigs of dragon fruit with statistical significant difference to the nil control treatment. In the greenhouse, spraying the cell suspension of B. methylotrophicusPB257 to the dragon fruit plants 24 hours before inoculating these plant tissues with\C. gloeosporioides is as effective as spraying the dragon fruit plants with prochlolaz with statistical significant difference to the nil control treatment