Neutrophil Extracellular Traps (NETs) formation of Fcgr2b deficient mice in lupus mouse model with ischemic reperfusion injury

การศึกษาการเกิด Neutrophil Extracellular Traps (NETs) ในหนูเม้าส์ที่ขาดยีน Fcgr2b ที่เป็นโรคลูปัสที่เกิดจากภาวะไตขาดเลือด

Name: Wilasinee Saisorn

Abstract: Acute kidney injury (AKI) caused by renal ischemic reperfusion (I/R) is the most prevalent cause of morbidity and mortality in patients. Neutrophil extracellular traps (NETs) are important for the progression of lupus nephritis after renal I/R injury. Because neutrophils are the first immune cell that respond to tissue damage, neutrophils might be an important cell that determines renal I/R injury. Additionally, NET components, including cell-free DNA, histone, nucleosome, and cytoplasmic protein compartment release the auto-antigens that accelerate lupus disease activity. Therefore, this project aimed to compare NETs formation in several internal organs following renal I/R injury in Fcgr2b deficient (Fcgr2b-/-) mice, a lupus mouse model, and wildtype (WT) mice. At 24 h after I/R injury, Fcgr2b-/- mice had a higher level of NET biomarkers; PAD4, IL-1β expression, serum dsDNA, and the co-staining of neutrophil elastase (NE) with myeloperoxidase (MPO), in kidney and peripheral blood when compared with WT mice. Furthermore, the cell apoptosis activated caspase-3 in the kidney, serum anti-dsDNA, and immunoglobulin (IgG) deposition in glomeruli in Fcgr2b-/- mice at 120 h after I/R injury was also higher than the WT mice. Likewise, NETs formation and apoptosis Fcgr2b-/- neutrophils after stimulation with phorbol myristate acetate (PMA) or lipopolysaccharide (LPS) were more prominent than WT neutrophils. These findings support that Fcgr2b-/- mice with renal I/R had a higher NETs formation, cell apoptosis in the kidney and in the remote organs that induced serum anti-dsDNA and accelerated lupus disease aggression.

Abstract: อาการบาดเจ็บจากไตวายเฉียบพลัน (AKI) ที่เกิดจากภาวะไตขาดเลือด (I/R) ถือเป็นสาเหตุสำคัญที่พบได้บ่อยส่งผลให้เกิดการเจ็บป่วยและเสียชีวิตในผู้ป่วย กับดักนิวโทรฟิล (Neutrophil extracellular traps; NETs) ถือว่าเป็นสาเหตุความสำคัญที่ส่งผลให้โรคไตอักเสบลูปัสรุนแรงเพิ่มมากขึ้น หลังการบาดเจ็บจากภาวะไตขาดเลือด เนื่องจากนิวโทรฟิลเป็นเซลล์แรกที่ตอบสนองต่อการบาดเจ็บของเนื้อเยื่อ องค์ประกอบของกับดักนิวโทรฟิล ได้แก่ ดีเอ็นเอที่ปราศจากเซลล์ (Cell-free DNA), ฮิสโตน, นิวคลีโซม รวมถึงโปรตีนในไซโทพลาสมา อาจเป็นแหล่งแอนติเจนของตนเอง (Auto-antigens) ที่กระตุ้นให้มีการพัฒนาไปเป็นโรคไตอักเสบลูปัส ดังนั้นโปรเจคนี้จึงมีวัตถุประสงค์เพื่อเปรียบเทียบการเกิดกับดักนิวโทรฟิลในอวัยวะภายในหลังการบาดเจ็บจากไตขาดเลือดในหนูที่ขาดยีน Fc gamma receptor 2b (Fcgr2b-/-) ซึ่งเป็นโมเดลจำลองของหนูลูปัส และหนูปกติ (Wildtype; WT) ผลการทดลองพบว่าที่ 24 ชั่วโมงหลังการบาดเจ็บจากภาวะไตขาดเลือด หนู Fcgr2b-/- มีการบ่งชี้กับดักนิวโทรฟิลในระดับที่สูง โดยวัดได้จากการแสดงออกของยีน PAD4, IL-1β, dsDNA และการย้อมด้วยสีอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์ ชนิดนิวโทรฟิลอิลาสเตส (Neutrophil elastase; NE) ร่วมกับ ไมอีโลเพอร์ออกซิเดส (Myeloperoxidase; MPO) ภายในไตและในเลือด นอกจากนี้โปรตีนที่เกี่ยวกับการตายแบบอะพอพโทสิส (Activated caspase-3) ภายในไตของหนู Fcgr2b-/- นั้นก็มีการเพิ่มขึ้นส่งผลให้มีการสร้างแอนติบอดีต่อ dsDNA ในซีรัมและมีการสะสมของอิมมูโนโกลบูลิน (Immunoglobulin; IgG) ในโกลเมอรูลัสภายในไต ที่ 120 ชั่วโมงหลังการบาดเจ็บจากภาวะไตขาดเลือด การศึกษาใน in vitro Fcgr2b-/- นิวโทรฟิลที่ถูกกระตุ้นด้วย phorbol myristate acetate (PMA) หรือ lipopolysaccharide (LPS) เกิดกับดักนิวโทรฟิลและการตายของเซลล์นิวโทรฟิลเด่นชัดกว่านิวโทรฟิลของหนูปกติ ผลการศึกษาแสดงให้เห็นว่าหนู Fcgr2b-/- มีการสร้างกับดักนิวโทรฟิลที่สูงกว่า และไวต่อการตายของเซลล์ทั้งในไตและในอวัยวะอื่นๆ ซึ่งเหนี่ยวนำการสร้างแอนติบอดีต่อ dsDNA ในซีรัมมากขึ้นอันเป็นปัจจัยสำคัญทำให้เกิดโรคไตอักเสบที่รุนแรงขึ้น

Chulalongkorn University. Office of Academic Resources

Address: BANGKOK

Email: cuir@car.chula.ac.th

Name: Asada Leelahavanichkul

Role: Advisor

Name: Direkrit Chiewchengchol

Role: Advisor

Created: 2020

Modified: 2023-02-07

Issued: 2023-02-07

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

URL: http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/76563

eng

DegreeName: Master of Science

Level: Master's Degree

Descipline: Medical Microbiology

Grantor: Chulalongkorn University

©copyrights Chulalongkorn University

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	6187224420.pdf	3.44 MB

ใช้เวลา

0.033307 วินาที