การโคลน การผลิต และการทำโปรตีนซี-ไฟโคไซยานินหน่วยย่อยแอลฟาและเบตาจากไซยาโนแบคทีเรียน้ำพุร้อนให้บริสุทธิ์ และการศึกษาสมบัติการต้านอนุมูลอิสระ

Molecular cloning, production, and purification of C-phycocyanin alpha and beta subunits from a thermophilic cyanobacterium and investigation of their antioxidant properties

Name: สิชล ฮวดรักษาสัตย์

keyword: ซี-ไฟโคไซยานิน

Othors: ไซยาโนแบคทีเรีย

; ไซยาโนแบคทีเรียน้ำพุร้อน

Othors: ไฟโคไซยานิน

; โปรตีน CpcA

; โปรตีน CpcB

; สารต้านอนุมูลอิสระ

Abstract: ซี-ไฟโคไซยานิน (C-phycocyanin) คือไฟโคบิลิโปรตีนชนิดหนึ่ง มีสีน้ำเงินและมีความสำคัญต่อการสังเคราะห์ด้วยแสงของไซยาโนแบคทีเรีย ปัจจุบันมีการนำซี-ไฟโคไซยานินมาใช้เป็นสีผสมในอาหารและเครื่องสำอาง อีกทั้งมีการรายงานว่าซี-ไฟโคไซยานินมีสมบัติในการต้านอนุมูลอิสระได้ดี งานวิจัยนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อผลิตและทำโปรตีนซี-ไฟโคไซยานินหน่วยย่อยแอลฟา (CpcA) และเบตา (CpcB) จากไซยาโนแบคทีเรียน้ำพุร้อนให้บริสุทธิ์ และศึกษาสมบัติการต้านอนุมูลอิสระ โดยผู้วิจัยได้โคลนยีน cpcA และ cpcB จากไซยาโนแบคทีเรียน้ำพุร้อน Thermosynechococcus sp. TUBT-T01 เข้าสู่เวกเตอร์ pET28a และผลิตโปรตีน CpcA และ CpcB ใน E. coli Rosetta(DE3) จากนั้นทำโปรตีน CpcA และ CpcB ให้บริสุทธิ์ด้วยนิกเกิลเมทัลแอฟฟินิตีโครมาโทกราฟี เมื่อตรวจสอบด้วยวิธี SDS-PAGE พบว่าโปรตีน CpcA และ CpcB มีขนาดประมาณ 19.3 และ 20.6 กิโลดาลตัน ตามลำดับ ในการทดสอบการต้านอนุมูลอิสระ ABTS พบว่าโปรตีน CpcA, CpcB, ซี-ไฟโคไซยานินจากธรรมชาติ (Native Cpc) และโทรล็อก (Trolox) มีค่า IC50 เท่ากับ 22.35±0.19, 21.50±0.11, 18.65± 0.19 และ 2.80±0.02 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร ตามลำดับ ในการทดสอบการต้านอนุมูลอิสระเปอร์ออกซีพบว่าโปรตีน CpcA, CpcB และซี-ไฟโคไซยานินจากธรรมชาติ มีค่าสมมูลกับสารมาตรฐานโทรล็อกเท่ากับ 1.56±0.08, 2.48±0.02 และ 3.31±0.04 ไมโครโมลาร์ ตามลำดับ แสดงให้เห็นว่าโปรตีน CpcA และ CpcB มีสมบัติในการต้านอนุมูลอิสระที่ค่อนข้างสูง และหากโปรตีน CpcA และ CpcB นี้มีเสถียรภาพที่อุณหภูมิสูงด้วยจักเป็นประโยชน์อย่างยิ่งในการนำไปประยุกต์ใช้กับอุตสาหกรรมอาหารและยาที่มีกระบวนการให้ความร้อนเข้ามาเกี่ยวข้องได้ในอนาคต

มหาวิทยาลัยธรรมศาสตร์. หอสมุดแห่งมหาวิทยาลัยธรรมศาสตร์

Address: กรุงเทพมหานคร

Email: preserv@tu.ac.th

Name: ชนิตโชต ปิยพิทยานันต์

Role: อาจารย์ที่ปรึกษาหลัก

Name: สุเปญญา จิตตพันธ์

Role: อาจารย์ที่ปรึกษาร่วม

Created: 2559

Modified: 2564-05-28

Issued: 2564-05-28

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

DOI: 10.14457/TU.the.2016.569

tha

DegreeName: วิทยาศาสตรมหาบัณฑิต

Level: ปริญญาโท

Descipline: เทคโนโลยีชีวภาพ

Grantor: มหาวิทยาลัยธรรมศาสตร์

©copyrights มหาวิทยาลัยธรรมศาสตร์

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	2521sichon.pdf	3.56 MB

ใช้เวลา

0.029143 วินาที