การชักนำให้เกิดแคลลัสและการตรวจสอบหาระดับพลอยดีจากการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อของหยาดน้ำค้าง (Drosera indica L.) ในสภาพปลอดเชื้อ)

Callus induction and Ploidy level of sundew (Drosera indica L.) Culture in sterile condition

Name: ชาตรี ตุ้มคำ

ThaSH: มหาวิทยาลัยบูรพา.สาขาวิชาชีววิทยาศึกษา

ThaSH: หยาดน้ำค้าง (พืช)

ThaSH: การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืช

Abstract: การศึกษาครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อชักนำให้เกิดแคลลัสและการตรวจสอบหาระดับพลอยดี จากการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อของหยาดน้ำค้าง (Drosera indica L.) ในสภาพปลอดเชื้อ โดยเพาะเลี้ยงชิ้นส่วนใบของยาดน้ำค้างบนอาหารสูตร ½ MS (Murashige and Skoog, 1962) ที่เติม BA และ NAA ในระดับความเข้มข้นแตกต่างกันเป็นเวลา 4 สัปดาห์จากการทดลองพบว่า ชิ้นส่วนใบที่เพาะเลี้ยงอาหารสูตร ½ MS ที่เติม BA 0.5 mg/l ร่วมกับ NAA 0.1 mg/l สามารถชักนําให้เกิดแคลลัสได้ดีโดยมีเปอร์เซ็นต์การเกิดแคลลัส และน้ำหนักสดของแคลลัสมากที่สุด และชิ้นส่วนใบที่เพาะเลี้ยงบนอาหารสูตร MS ที่เติม BA 1 mg/l ร่วมกับ NAA 0.1 mg/l มีการชักนําให้เกิดยอดจากชิ้นส่วนแคลลัสมากที่สุด จากนั้นนำแคลลัสที่ได้มาเพาะเลี้ยงบนอาหารสูตร ½ MS ที่ไม่เติมสารควบคุมการเจริญเติบโต เป็นเวลา 4 สัปดาห์เพื่อชักนําให้เกิดต้น แล้วนํามาตัดแบ่งเพื่อให้ได้ชิ้นส่วน ข้อขนาด 2± 0.2 เซนติเมตร นํามาจุ่มแช่ในอาหารเหลวสูตร ½ MS ที่เติมสารละลายโคลชิซีน ความ เข้มข้น 0,0.1, 0.5, และ 1.0 mg/l เป็นระยะเวลา 24, 48, 72 ชั่วโมง ตามลำดับ และนำไปเพาะเลี้ยงบนอาหารแข็งสูตร ½ MS เป็นระยะเวลา4 สัปดาห์พบว่า ชิ้นส่วนข้อที่จุ่มแช่ในอาหารเหลวสูตร ½ MS ที่ไม่มีการเติมโคลชิซีน มีเปอร์เซ็นต์การรอดชีวิตมากที่สุด และเปอร์เซ็นต์การรอดชีวิตจะลดลงเมื่อเพิ่มความเข้มข้นและระยะเวลาการจุ่มแช่มากขึ้น และเมื่อวิเคราะห์ระดับพลอยดีด้วยเครื่องโฟลไซ โทรมิเตอร์ พบว่า ในทุกชุดการทดลองมีจํานวนโครโมโซมเป็นดิพลอยด์ทั้งหมด จากนั้นนำต้นกล้าที่ได้จากการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ มาย้ายปลูกในพีทมอสร่วมกับสแฟคนัมมอสในอัตราส่วน 1:2 เป็นระยะเวลา 4 สัปดาห์พบว่า ต้นกล้ามีเปอร์เซ็นต์การรอดชีวิตสูงที่สุด

Abstract: The purpose of this study was to induce callus and determine ploidy level from tissue culture of Drosera indica L. in sterile conditions. By culturing leaf explants of Sundew on ½ MS (Murashige and Skoog, 1962) media supplemented with BA and NAA at different concentrations for 4 weeks.From the results, it was found that leaf explants cultured on ½ MS media containing 0.5 mg / l BA with 0.1 mg / l NAA couldinduce callus well and gave the highest callus induction percentage and callus fresh weight. On the other hand, leaf explants cultured on MS media supplemented with 1 mg / l BA incombination with 0.1 mg / l NAA hadthe highest number of shoot induction from callus. Then the callus was cultured on ½ MS media without plantgrowth regulators for 4 weeks to induce new shoot. After that, cut the shoot to get the node explant size 2 ± 0.2 cm, then dippedin the ½ MS liquid media with the addition of 0, 0.1, 0.5, and 1.0 mg / l colchicine at period of 24, 48, 72 hours respectively. Thennode explants were cultured on ½ MS solid media for 4 weeks. It was found that node explants immersingin liquid MS media without adding colchicine hadthe highest survival percentage. Futhermore, it couldbe seen that the survival percentage decreasedas the concentration increasedas well as the immersion period increased. When analyzing ploidy levels withthe flow cytometry technique, it was found that there were a number of chromosomes in the diploid. Then seedlings from tissue culture were transplanted in peat moss together with the sphagnum moss in the ratio of 1: 2 for 4 weeks. From the experiment, it shownthat seedlings had the highest survival percentage.

มหาวิทยาลัยบูรพา. สำนักหอสมุด

Address: ชลบุรี

Email: buulibrary@buu.ac.th

Name: ศิรศาธิญากร จันทร์ขศิราพร

Role: อาจารย์ที่ปรึกษาหลัก

Created: 2562

Modified: 2563-12-21

Issued: 2563-12-21

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

CallNumber: ว 612.028 ช514ก

tha

DegreeName: วิทยาศาสตรมหาบัณฑิต

Level: ปริญญาโท

Descipline: ชีววิทยาศึกษา

Grantor: มหาวิทยาลัยบูรพา

©copyrights มหาวิทยาลัยบูรพา

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	57920086.pdf	2.77 MB	3	2022-04-04 17:19:56

ใช้เวลา

0.015451 วินาที