การจำแนกชนิดของเอนไซม์และการทำนายผลผลิตของโปรไบโอติกในอาหารเคเอ็มพี

Identification of Enzyme and Prediction of Growth Yield in Probiotics under KMP Medium

Name: พีรพงศ์ พูลพันธ์

keyword: โปรไบโอติกในอาหารเคเอ็มพี

Abstract: ศึกษาการผลิตเอนไซม์โปรติเอส ไซแลนเนส เซลลูเลส และอะไมเลส ในจุลินทรีย์ โปรไบโอติกของ บริษัทเอ็มพีไบโอเทคคือ 4 สายพันธุ์ แบคทีเรียแลคติก 2 สายพันธุ์ และยีสต์ 2 สายพันธุ์ เพื่อการนำไปใช้ประโยชน์ในอุตสาหกรรมอาหารสัตว์ต่อไป และเปรียบเทียบผลผลิตของจุลินทรีย์แต่ละชนิดในการเลี้ยงแบบขวดเขย่า และการสร้างกราฟมาตรฐานระหว่างน้ำหนักเซลล์แห้งและจำนวนเซลล์มีชีวิตที่ขึ้นบนอาหารแข็ง เพื่อใช้ทำนายค่าผลผลิตการเจริญเติบโตของ โปรไบโอติกที่เลี้ยงในอาหารเหลว KMP ซึ่งมีองค์ประกอบสารแขวนลอยปนอยู่ทำให้ไม่สามารถวัดน้ำหนักแห้งได้โดยตรง ผลการศึกษาการผลิตเอนไซม์โดยการวัดเส้นผ่าศูนย์กลางโซนใสบนอาหารแข็ง พบเอนไซม์โปรติเอส ไซแลนเนส เซลลูเลส และอะไมเลส ในแบซิลลัสทั้ง 4สายพันธุ์ คือ Bacillus subtilis CU340 B. subtilis KMP CU 9 B. licheniformis TISTR 004 LLll:: B. Iichenifonnis TISTR 005 โดยพบ เส้นผ่าศุนย์กลางโวนใสของโปรติเอส ไซลาเนส เซลลูเลส และอะไมเลส ใน B. subtilis CU340 = 23.35 23.80 20.65 และ 17.25 มิลลิเมตร ตามลำดับ ใน B. subtilis KMP CU 9 เท่ากับ 24.75 19.63 18.70 และ11.40 มิลลิเมตร ตามลำดับ ใน B. licheniformis TISTR 004 เท่ากับ 1126.35 19.63 18.70 และ 11.40 มิลลิเมตร ตามลำดับ และในB. Iichenifonnis TISTR 005 เท่ากับ 23.65 11.65 13.10 และ 24.10 มิลลิเมตร ตามลำดับ ผลการศึกษา การผลิตเอนไซม์โดยการวัดเส้นผ่าศุนย์กลาง ของแบคทีเลียแลคติก 2 สายพันธุ์ คือ Lactococcus plantarum CU 20 และ Pediococcus pentosaceus TISTR 954 ตรวจผบเฉพาะโปรติเอส ไม่พบไซแลนเนส เซลลูเลส และอะไมเลส โดยพบเส้นผ่าศุนย์กลางโซนใสของโปรติเอสใน L. plantarum CU 20 และ P. pentosaceus TISTR 954 คือ 11.15 une 6.35 มิลลิเมตร ตามลำดับ ตรวจไม่พบการสร้างเอนไซม์โปรติเอส ไซลาเนส เซลลูเลส และอะไมเลส ในยีสต์ 2 สายพันธุ์ที่ศึกษาคือ Saccharomyces cerevisiae TISTR 5020 และ S. cerevisiae TISTR 5094 ผลการสร้างกราฟมาตรฐานระหว่างน้ำหนักเซลล์แห้ง และจำนวนเซลล์ที่มีชีวิตบนอาหารแข็งเพื่อใช้ในการทำนายค่าน้ำหนักแห้งของจุลินทรีย์ ที่เลี้ยงบนอาหารเหลวเคเอ็มพีซึ่งไม่สามารถวัดน้ำหนักแห้งได้โดยตรง พบว่าได้สมการความสัมพันธุ์ระหว่างน้ำหนักเซลล์แห้ง และจำนวนเซลล์เป็นเส้นตรงคือ y= 3xl0 y= 2xl0 y= 9xl0 y= 8xlO y= 2xl0 y= lxl0 y= 2xlO และ y= 4xlO ใน B. subtilis CU 340 B. subtilis KMP CU 9 B. licheniformis TISTR 004 B. licheniformis TISTR 005 L. plantarum CU 20 P. pentosaceus TISTR 954 S. cerevisiae TISTR 5020 และ S. cerevisiae TISTR 5094 ตามลำดับ เมื่อ x คือจำนวนจุลินทรีย์ที่นับได้บนอาหารแข็งมีหน่วยเป็น CFU/ML UAE Y คือน้ำหนักแห้งของเซลล์มีหน่วยเป็น GIL แต่ไม่สามารถใช้เป็นกราฟมาตรฐานในการแปลงหรือทำนายผลจากจำนวนเซลล์ให้เป็นน้ำหนักแห้งได้โดยตรง โดยเฉพาะ ในกระณีแบบซิลลัส เนื่องจากผลที่ได้เบี่ยงเบนจากค่าความเป็นจริงหรือค่าทฤษฏีมาก และเมื่อเพื่อจำนวนตัวอย่างการสร้างกราฟมาตรฐานจากเดิม 4 ตัวอย่างเป็น 10 ตัวอย่าง การทำนายผลผลิต US. cerevisiae ให้ได้ค่าที่ดีขึ้น แต่ในเบซิลลัสยังไม่แตกต่างจากเดินมากนักโดยได้สมการความสัมพันธ์ระหว่างน้ำหนักเซลล์แห้งและจำนวนเซลล์คือ y= 2xlO ใน B. subtilis KMP-CU 9 และ y= 5xl0 ในS. cerevisiae TISTR 5094 สันนิษฐานว่าการสร้างกราฟมาตรฐานโดยวิธีนี้ จำเป็นต้องใช้ตัวอย่างที่มีจำนวนมากพอ เพื่อให้เกิดความแม่นยำสูงขึ้น ในการทำนายค่า โดยเฉพาะในแบคทีเรียเช่นแบซิลลัสซึ่งมีขนาดเล็กกว่ายีสต์ต้องใช้จำนวนตัวอย่างที่มากกว่ายีสต์จึงจะให้ผลทำนายที่ใกล้เคียง

Abstract: The production ofenzyme protease, xylanase, cellulose and amylase were studied in probiotics from KMP BIOTECH Co., LTD. ,4 strains of Bacillus spp., 2 strains of Lactic Acid Bacteria (LAB) and 2 strains of Saccharomyces cerevisiae. The standard curve between cell dry weight and viable cells was purposed for yield prediction of cell grown in KMP medium. Since KMP medium contains suspended solids such as wheat flour and fish meal in the medium, and then it is difficult to measure cell dry weight directly.The enzyme production was tested by radial diffusion enzyme method by measurement of the clearzone in agar plate. It was found protease xylanase cellulase and amylase in all 4 tested strains of Bacillus. Results of clear zone's diameter of protease xylanase cellulase and amylase in Bacillus subtilis CU340 are 23.35, 23.80, 20.65 and 17.25 mm., respectively; in B.subtilis KMP CU 9 are 24.75,19.63 ,18.70 and 11.40 mm., respectively; in B. licheniformis TISTR 004 are 26.35 19.63, 18.70, 11.40 mm., respectively; in B.licheniformis TISTR 005 are 23.65, 11.65, 13.10 and 24.10 mrn., respectively.In Lactic Acid Bacteria, it was found only protease activity from Lactococcusplantarum CU 20 and Pediococcus pentosaceus TISTR 954. No amylase, xylanase and cellulose was detected in the strains. The clear zone's diameter of protease activities in L. plantarum CU 20 and P.pentosaceus TISTR 954 are 11.15 and 6.35 mm., respectively. Furthermore, none of protease amylase, xylanase and cellulose were found in Saccharomyces cerevisiaeTISTR 5020 and S. cerevisiaeTISTR 5094. The standard curve between cell dry weight and cell number grown in KMP medium was presented for dry weight prediction. The linear relation was observed in the models of y= 3x10-9x , y= 2x10-9x -9x -9x -!Ill -9x ?7.. -7>. , y= 9x10 ,y= 8x10 , y= 2xlO , y= 1xlO ,y= 2x10 and y= 4x10 in B. subtilisCU 340, B. subtilisKMP CU 9, B. Iicheniformis TISTR 004, B. Iicheniformis TISTR 005, L. plantarumCU 20, P. pentosaceusTISTR 954, S. cerevisiaeTISTR 5020 and S.cerevisiaeTISTR 509, respectively , where x is cell number (cfu/ml) and y is cell dry weight (g/L). But the model can't effectively predict cell dry weight, especially in Bacillus group. The predicted yield is deviated from theoretical yield. Number of preparation samples in the standard curved was then increased from 4 to 10. The yield prediction in S. cerevisiae is much better improvement than in Bacillus. The new yield prediction models in B. subtilis KMP-CU 9 and S. cerevisiae TISTR 5094 were y= 2x10-9x and y= 5x10-h, respectively, where x is cell number (cfu/ml) and y is cell dry weight (gil). It is thought that the method required many samples for representative data in the standard curve used for prediction in the model, particularly in Bacillus which having a smaller size than yeast.

มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี. สำนักหอสมุด.

Address: กรุงเทพมหานคร

Email: info.lib@mail.kmutt.ac.th

Name: ยุวพิน ด่านดุสิตาพันธ์

Role: อาจารย์ที่ปรึกษา

Created: 2552-11-07

Modified: 2552-11-07

Issued: 2552-11-07

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

CallNumber: BIT585

tha

DegreeName: วิทยาศาสตรมหาบัณฑิต

Level: ปริญญาโท

Descipline: เทคโนโลยีชีวภาพ

Grantor: มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี

©copyrights มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	BIT585.pdf	1.12 MB	156	2025-09-11 15:01:56
2	BIT585ab.pdf	64.95 KB	85	2023-12-13 14:17:51

ใช้เวลา

0.029376 วินาที