การศึกษาบริเวณเร่งปฏิกิริยาที่ตำแหน่ง S1-subsite ของเอนไซม์แอคทินิเดนบริสุทธิ์จากผลกีวีด้วยสับสเตรทสังเคราะห์ที่เป็นอนุพันธ์ของพารา-ไนโตรอะนิไลด์

Study on Active Site at S,-subsite Position of Purified Actinidain from Kiwifruit with Synthesizedp-nitroanilide Derivative Substrates

Name: วิระ สกุลนี

Organization : มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี

keyword: kiwifruit

; actinidain

; S1-subsite

; p-nitroanilide derivative

; covalent chromatography

; hydrophobic pocket

Abstract: The purpose of this work was to study on active site at S,-subsite position of actinidain, isolatedfrom kiwifruit (Actinidia chinensis).The actinidain was purified to homogeneity in a single step bycovalent chromatography with thiopropyl gel column. The enzyme has a molecular weight of 27kDa. The thiol content of the enzyme at pH 4 and 8 were 1 and 0.93, respectively. The pnitroanilidederivative substrate, N-Ac-L-Phe-Gly-p-nitroanilide, N-Ac-L-Phe-Leu-p-nitroanilide,N-Ac-L-Phe-Phe-p-nitroanilide, N-Ac-L-Phe-Arg-p-nitroanilide and N-Ac-L-Phe-Glu-p-nitroanilidewere synthesized in our laboratory and proved to be pure forms by melting point, optical rotation,mass spectrometry, 'H-NMR spectroscopy and elemental analysis. Kinetic study showed that thekeat/Km of the purified actinidain toward N-Ac-L-Phe-Gly-p-nitroanilide, N-Ac-L-Phe-Leu-pnitroanilide,N-Ac-L-Phe-Phe-p-nitroanilide, N-Ac-L-Phe-Arg-p-nitroanilide were 34.92, 47.60,69.10 and 2.6 mMกำลัง-1sกำลัง-1, respectively, whereas actinidain had very low activity toward N-Ac-L-Phe-Glu-p-nitroanilide. This result revealed the presence of the deeply hydrophobic pocket at S,-subsiteposition of the active site of actinidain.

มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี

Address: กรุงเทพมหานคร (Bangkok)

Email: info.lib@mail.kmutt.ac.th

Name: รศ.ดร. กนก รัตนะกนกชัย

Role: อาจารย์ที่ปรึกษา

Created: 2545

Issued: 2005-09-20

Modified: 2006-05-10

วิทยานิพนธ์/Thesis

ISBN: 9749551613

CallNumber: BIT386

tha

DegreeName: วิทยาศาสตรมหาบัณฑิต

Level: ปริญญาโท

Descipline: เทคโนโลยีชีวภาพ

Grantor: มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี

©copyrights มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	BIT386.pdf	14.32 MB	44	2020-02-23 11:55:13
2	BIT386ab.pdf	67.07 KB	17	2018-05-13 03:54:44
3	BIT386ab.txt	1.56 KB	6	2018-05-13 03:54:45

ใช้เวลา

0.035663 วินาที