Qualitative and quantitative determinations of anticonvulsants in centella asiatica (l.) urban

การวิเคราะห์หาชนิดและปริมาณสารสำคัญที่มีฤทธิ์ต้านชักในบัวบก

Name: Pornpak Sirathanarun

keyword: centella asiatica

Abstract: Ethyl acetate extract of the aerial part of Centella asiatica (L.) Urban (CA) was found to possess the anticonvulsant activity in the PTZ test model. Using the fractionation of the extract by conventional chromatographic technique together with the standard PTZ antiepileptic screening model, it was found that saturated very long-chain fatty acids (VLFAs) were the active principle in CA. Spectroscopic techniques were used to elucidate the chemical structure, IR and NMR data confirmed that active principle are VLFAs with the GC-MS technique to analyze the composition of the VLFAs, revealed that the sample contain C12 – C28 chain length acids, which contain C16 and C28 chain length acids as main component. A thin-layer chromatographic (TLC) method was developed to determine VLFAs by using silica gel plate GF254 as stationary phase and hexane: ethyl acetate: glacial acetic acid (14:6:1) as developing solvent, oleanolic acid as internal standard. The detection of the TLC spot was developed by spraying with 3% phosphomolybdic acid in methanol and scanned with densitometer at wavelength 550 nm. This method was validated according to ICH guideline. The percentage recovery was in the range of 98.68-102.99 and percentage of RSD was not more than 2. The developed method was applied to analyze the CA that collected from 12 locations of Thailand, such as Prachin Buri, Nakhon Si Thammarat (Ban Bo Lo local growth and Ban Bo Lo trade), Ubon Ratchathani, Trat, Rayong, Chon Buri, Nakhon Ratchasima, Sukhothai, Chiang Mai (green petioles), Chiang Mai and Phitsanulok. The maximum content of VLFAs was founded 0.27% w/w (Rayong), 0.24% w/w (Sukhothai and Nakhon Ratchasima). Furthermore, the content of those compounds in CA that collected from the commercial crops of Nakhon Pathom, Ubon Ratchathani and Nakhon Si Thammarat provinces. The maximum VLFAs of CA in sample collected from Nakhon Pathom province was observed also annually determine in November, from Ubon Ratchathani in September and from Nakhon Si Thammarat province was observed in May. Information obtained may be utilized as criteria for plant varieties selection and breeding programs for commercial cultivars of optimal VLFAs content for further isolation of pure VLFAs.

Abstract: การศึกษาชนิดของสารที่มีฤทธิ์ต้านชักในบัวบกในการสกัดด้วยเอทิลอะซิเทต โดยการแยกสารสําคัญ ด้วยวิธีคอลัมน์โครมาโทกราฟี สารที่สกัดได้จะถูกนําไปทดสอบฤทธิ์การต้านชักทางเภสัชวิทยาด้วยการกระตุ้น การชักจากสารเพนทิลีนเตตตระโซล สารสําคัญที่มีฤทธิ์ตต้านชักถูกนําไปพิสูจน์เอกลักษณะด้วยวิธีสเปกโทรสโกปี ข้อมูลจากไออาร์และเอ็นเอ็มอาร์ยืนยันว่าสารสําคัญที่มีฤทธิ์ต้านชักที่สกัดได้จากบัวบก คือ เวรีลองเชนแฟตตีแอ ซิด และด้วยเทคนิกการวิเคราะห์ด้วยจีซีเอ็มเอสพบว่าสารสําคัญประกอบด้วยสายโซ่ซึ่งมีคาร์บอนจํานวน 12-28 อะตอม ซึ่งมีองค์ประกอบหลักที่มีสายโซ่ซึ่งมีคาร์บอนจํานวน 16 และ 28 อะตอม ได้พัฒนาวิธีทินแลโครมาโทกราฟี เพื่อวิเคราะห์เวรีลองเชนแฟตตีแอซิดในบัวบก โดยใช้แผ่นซิลิกาเจล เป็นวัฎภาคคงที่ และ เฮกเซนต่อเอทิลอะซิเทตต่อเกลเชียลอะซิติกแอซิด (14:6:1) เป็นวัฎภาคเคลื่อนที่ โดยมีสาร โอลิเอโนลิกแอซิด เป็นสารมาตรฐานอินเทอร์นอล การตรวจวัดจุดของสารโดยฉีดพ่นด้วยสารละลาย 3 เปอร์เซ็นต์ฟอสโฟโมลิบดิกแอซิดในเมทานอล และสแกนด้วยเดนซิโทมิเตอร ที่ความยาวคลื่น 550 นาโนเมตร วิธี วิเคราะห์ดังกล่าวได้ผ่านการตรวจสอบความใช้ได้ตามข้อกําหนดของไอซีเอชซึ่งพบว่าปริมาณร้อยละของการ กลับคืนอยู่ในช่วง 98.68-102.99 และ ร้อยละของความเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์ไม่เกิน 2 วิธีที่ได้พัฒนาขึ้นถูกนํามาใช้ในการวิเคราะห์ตัวอย่างพืชบัวบกที่เก็บจาก 12 แหล่งในประเทศไทยได้แก่ จังหวัดปราจีนบุรี, จังหวัดนครศรีธรรมราช (พันธุ์บ่อล้อพื้นเมือง และ พันธุ์บ่อล้อการค้า), จังหวัดอุบลราชธานี, จังหวัดตราด, จังหวัดระยอง, จังหวัดชลบุรี, จังหวัดนครราชสีมา, จังหวัดสุโขทัย, จังหวัดเชียงใหม่, จังหวัด เชียงใหม่ (ก้านเขียว) และ จังหวัดพิษณุโลก พบปริมาณเวรีลองเชนแฟตตีแอซิดสูงสุด 0.27 เปอร์เซ็นต์ (จังหวัด ระยอง), 0.24 เปอร์เซ็นต์ (จังหวัดสุโขทัย และจังหวัดนครราชสีมา) นอกจากนี้ ได้ศึกษาหาปริมาณสารสําคัญใน รอบปีจากบัวบกที่เก็บได้จาก จังหวัดนครปฐม จังหวัดอุบลราชธานี และ จังหวัดนครศรีธรรมราช จากการศึกษา พบว่าบัวบกจากจังหวัดนครปฐมที่เก็บในช่วงเดือนพฤศจิกายนมีปริมาณเวรีลองเชนแฟตตีแอซิดสูงสุด บัวบก จากจังหวัดอุบลราชธานีมีปริมาณสารสําคัญสูงสุดในช่วงเดือนกันยายน และ บัวบกจากจังหวัดนครศรีธรรมราช มีปริมาณสารสําคัญสูงสุดในช่วงเดือนพฤษภาคม จากข้อมูลที่ได้ในการศึกษาครั้งนี้สามารถนําไปใช้ในการ คัดเลือกสายพันธุ์บัวบก และวางแผนการเพาะปลูกเพื่อให้ได้ซึ่งปริมาณสารสําคัญเวรีลองเชนแฟตตีแอซิดสูงสุด

Chulalongkorn University. Center of Academic Resources

Address: BANGKOK

Email: cuir@car.chula.ac.th

Name: Chamnan Patarapanich

Role: advisor

Name: Suwanna Laungchonlatan

Role: advisor

Created: 2007

Modified: 2012-12-22

Issued: 2012-12-22

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

eng

DegreeName: Master of Science in Pharmacy

Level: Master's Degree

Descipline: Pharmaceutical Chemistry

Grantor: Chulalongkorn University

©copyrights Chulalongkorn University

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	pornpak_si.pdf	3.33 MB	72	2020-01-14 12:51:37

ใช้เวลา

0.02058 วินาที