Chlorophyll degradation in vacuoles of postharvest Japanese bunching onion (Allium fistulosum L. cv. Kujyo)

การศึกษาการสลายตัวของคลอโรฟิลล์ในแวคคิวโอของต้นหอมญี่ปุ่นระหว่างการเก็บรักษา

Name: Alisa Soontornwat

Name: อลิษา สุนทรวัฒน์

keyword: Japanese Bunching Onion

Abstract: The yellowing at a tip of Japanese bunching onion (Allium fistulosum L. cv. Kujyo) during storage is usually observed and this problem relates to the loss of external quality due to chlorophyll degradation. The chlorophyll catabolisms of Japanese bunching onion have been reported that it occurred in the chloroplast, however it may also occur inside the vacuole. Therefore, this experiment was subjected to study the changes of chlorophyll contents and its derivatives in Japanese bunching onion during storage. The vacuoles from Japanese bunching onion were separated for analyzing the chlorophyll catabolites. The purification of vacuoles from 1x1 05 protoplasts yielded vacuoles at 10 to 20 %. The contamination of other organelles in purified vacuole was found a low activity of the maker enzyme including catalase, NADH cytochrome C reductase, NADH malate dehydrogenase and alcohol dehydrogenase. Whereas, the maker enzymes of vacuole including acid phophatase and p-glucosidase had high activity. This indicated that the purified vacuoles were good enough for further step of analysis. In vitro test of vacuole and protoplasts extracted from Japanese bunching onion containing the reaction mixture was incubated for 0, 3, 6, 18, 24 hr. The formation of chlorophyllide a, pheophorbide a, pyropheophorboie a and C 132-hydroxychlorophyll a in protoplasts was higher than that in the vacuoles whereas the vacuoles shown higher formation of pheophytin a than that in the protoplasts. From the result of in vitro test found that chlorophyll catabolite were also found in vacuole of Japanese bunching onion. Therefore, in vivo test was initiated to study the changes of color, chlorophyll contents and chlorophyll derivative contents in Japanese bunching onion during storage at 4 C and 25 C. The hue angle level of Japanese bunching onion was declined during storage at 25 C, whereas leaves storage at 4 C shown unchanged of the hue angle level. The chlorophyll a and chlorophyll b contents of Japanese bunching onion were decreased in leaves storage at 25 C faster than that of stored at 4 C. Chlorophyll derivatives (chlorophyll ide a, pheophytin a, Cl32-hydroxychlorophyll a, pheophorbide a and pyropheophorbide a) in vacuoles of bunching onion stored at 25 C increased on day 1 while the vacuole of Japanese bunching onion storage at 4 C showed a slowly increased of chlorophyll derivatives during storage. From the results, the accumulation of chlorophyll catabolite was observed in vacuole of Japanese bunching onion during storage. This indicated that the chlorophyll degradation may also occur in the vacuole especially at high temperature, while the storage at 4 C retarded the chlorophyll catabolism in Japanese bunching onion.

Abstract: ปัญหาสำคัญของต้นหอมญี่ปุ่นระหว่างการเก็บรักษา คืออาการเหลืองของใบโดยเฉพาะบริเวณ ปลายใบ ซึ่งเกิดจากการสลายตัวของคลอโรฟิลล์ มีรายงานว่าการสลายตัวของคลอโรฟิลล์ ในต้นหอมญี่ปุ่นเกิดขึ้นภายในคลอโรพาสต์ และคาดว่าสามารถเกิดภายในแวคคิวโอด้วย งานวิจัยนี้จึงได้ศึกษาการเปลี่ยนแปลงปริมาณคลอโรฟิลล์และอนุพันธ์ของคลอโรฟิลล์ในแวคคิว โอของต้นหอมญี่ปุ่นระหว่างการเก็บรักษา โดยทการสกัดแวคคิวโอจากโปรโตรพลาสของต้น หอมญี่ปุ่น พบว่าโปรโตรพลาสจำนวน 1x10 5 เซลล์ สามารถสกัดแวคคิวไอได้ 10-20 เปอร์เซ็นต์ ของจำนวนโปรโตรพลาสทั้งหมด เมื่อนำแวคคิวโอที่ได้มาทำการตรวจสอบกิจกรรมของ Maker enzyme ที่เป็นตัวบ่งชี้ของออร์แกเนลล์อื่นๆ ประกอบด้วย Catalase NADH cytochrome C reductase NADH malate dehydrogenase และ Alcohol detrydrogenase พบว่ามีกิจกรรมของ Maker enzyme ที่เป็นตัวบ่งชี้ของออร์แกเนลล์อื่นๆ ในระดับต่ำ ซึ่งชี้ให้เห็นว่าแวคคิวโอที่สกัด ได้มีการปนเปื้อนออร์แกเนลล์อื่นๆ ในปริมาณน้อย จากการตรวจสอบกิจกรรมของ Maker enzyme ที่บ่งชี้อยู่ในแวคคิวโอ ประกอบด้วย Acid phophatase และ Beta-glucosidase พบว่ามีกิจกรรมของ Maker enzyme ที่บ่งชี้อยู่ในแวคคิวโอที่สกัดได้ในระดับสูง แสดงว่าแวคคิวโอที่สกัดได้มีความ บริสุทธิ์เพียงพอที่จะนำไปใช้ทำการทดลองต่อไป การศึกษาการเปลี่ยนแปลงอนุพันธ์ของคลอโรฟิลล์ได้แก่ Chlorophyllide a Pheophytin a C132 - hydroxychlorophyll a Pheophorbide a และ Pyropheophorbide a ในแวคคิวโอ และ โปรโตพลาสของต้นหอมญี่ปุ่นในสภาวะ in vitro โดยนำแวคคิวโอและโปรโตรพลาสมาบ่มเป็น เวลา 0 3 6 8 และ 24 ชั่วโมง พบว่ามีการเพิ่มขึ้นของปริมาณอนุพันธ์ของคลอโรฟิลล์ในโปรโตร พลาสสูงกว่าในแวคคิวโอ เนื่องจากภายในโปรโตรพลาสมีออร์แกเนลล์ชนิดต่างๆ บรรจุอยู่ เช่น คลอโรพลาสแต่ปริมาณของ pheophytin a ในแวคคิวโอมีปริมาณสูงกว่าในโปรโตรพลาส จากผล การทดลองแสดงว่ามีการสลายตัวของคลอโรฟิลล์ทั้งภายในโปรโตพลาสและแวคคิวโอ ดังนั้นจึง ทำการศึกษาการเปลี่ยนแปลงคุณภาพในต้นหอมญี่ปุ่นระหว่างการเก็บรักษา โดยศึกษาการเปลี่ยน แปลงค่า Hue angle ปริมาณคลอโรฟิลล์เอและคลอโรฟิลล์บี และอนุพันธ์ของคลอโรฟิลล์ในแวค คิวโอ ของต้นหอมญี่ปุ่นที่เก็บรักษาที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียล ในขณะที่การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส มีการเปลี่ยนแปลงของค่า Hue angle เพียงเล็กน้อย ซึ่งสอดคล้องกับปริมาณคลอ โรฟิลล์เอและคลอโรฟิลล์บีของต้นหอมญี่ปุ่นที่เก็บรักษาที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียล และมีอนุพันธ์ ของคลอโรฟิลล์มีค่าเพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็วในวันที่ 1 ของการเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียส ในขณะที่แวคคิวโอของต้นหอมญี่ปุ่นที่เก็บรักษาที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียลมีอนุพันธ์ของคลอโร ฟิลล์เพิ่มขึ้นอย่างช้าๆ จากผลการทดลองแสดงให้เห็นว่าการสลายตัวของคลอโรฟิลล์สามารถเกิด ขึ้นได้ภายในในแวดคิวโอของต้นหอมญี่ปุ่น โดยการเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส สามารถ ชะลอการเหลืองอันเนื่องมาจากการสลายตัวของคลอโรฟิลล์

King Mongkut's University of Technology Thonburi. KMUTT Library

Address: BANGKOK

Email: info.lib@mail.kmutt.ac.th

Name: Varit Srilaong

Role: Advisors

Created: 2011

Modified: 2012-06-21

Issued: 2555-06-06

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

CallNumber: PHT366

eng

DegreeName: Master of Science

Level: Master's Degree

Descipline: Postharvest Technology

Grantor: King Mongkut's University of Technology Thonburi

©copyrights King Mongkut's University of Technology Thonburi

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	PHT366.pdf	1.57 MB	106	2022-10-17 11:18:54
2	PHT366ab.pdf	32.51 KB	63	2020-02-26 14:37:35

ใช้เวลา

0.026441 วินาที