Pattara Wongjaroen. Development of Campylobacter cultivation system using oxygen-reducing membrane fragment. Master's Degree(Medical Technology). Mahidol University. : Mahidol University, 2009.
Development of Campylobacter cultivation system using oxygen-reducing membrane fragment
Abstract:
The purpose of this study is to develop a Campylobacter cultivation method under
normal atmosphere by using oxygen-reducing membrane fragments. Membrane fragments
were extracted from Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa isolates. The isolates with
the highest efficiency of oxygen reduction were selected to obtain purified membrane
fragments. The purified membrane fragments were characterized and investigated for
supporting Campylobacter jejuni growth in broth. Appropriated concentration of membrane
fragments were choosen for formulating the developed culture model of agar-type media. The
culture model was evaluated by culturing Campylobacter from pure culture, artificially
inoculated and contaminated chicken samples.
Purified membrane fragments from E. coli showed good oxygen reduction at 42°C and 50
°C, and at pH 7.5 to pH 8.5, while membrane fragments from P. aeruginosa worked well at
37°C and 42°C, and at pH 7.0 to pH 7.5. Campylobacter growth in the broth containing
purified membrane fragments could be observed within 6 to 12 hours of incubation. Using
0.025 U of membrane fragments in the developed culture model could support Campylobacter
growth from pure culture, artificially inoculated and contaminated chicken samples. Using
developed culture model with oxygen-reducing membrane fragments demonstrates a
possibility for substitution of the conventional method.
Abstract:
การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อการพัฒนาการเพาะเลี้ยงเชื้อ Campylobacter ภายใต้บรรยากาศ
ปกติ โดยใช้ oxygen-reducing membrane fragment เติมลงในอาหารเลี้ยงเชื้อ membrane
fragment จาก Escherichia coli และ Pseudomonas aeruginosa สายพันธุ์ที่ให้ความสามารถ
สูงสุดในการลดออกซิเจน ได้รับการเลือกไปสกัด membrane fragment ให้บริสุทธิ์ขึ้น นำผนัง
เซลล์สกัดบริสุทธิ์มาศึกษาคุณสมบัติและทดสอบประสิทธิภาพในการสนับสนุนการเจริญเติบโต
ของเชื้อ Campylobacter jejuni ในอาหารเลี้ยงเชื้อเหลว และเลือกระดับความเข้มข้นที่เหมาะสม
ของmembrane fragment เพื่อใช้ในการพัฒนารูปแบบการเพาะเลี้ยงสำหรับอาหารเลี้ยงเชื้อบน
จานเพาะเลี้ยง ทำการประเมินรูปแบบการเพาะเลี้ยงที่พัฒนาขึ้น โดยใช้เชิ้อ Campylobacter จาก
เชื้อบริสุทธิ์ เชื้อที่ใส่ผสมกับเชื้อประจำถิ่น และเชื้อที่ปนเปื้อนอยู่ในตัวอย่างไก่
Membrane fragmentที่เตรียมให้บริสุทธิ์ จาก E. coli สามารถลดออกซิเจนได้ดีที่อุณหภูมิ
42 และ 50 องศาเซลเซียส และที่ค่า pH 7.5 ถึง 8.5 ส่วน membrane fragment จาก P.
aeruginosa พบว่าทำงานได้ดีที่อุณหภูมิ 37 และ 42 องศาเซลเซียส และที่ค่า pH 7.0 ถึง 7.5 พบ
การเจริญของ Campylobacter ในอาหารเหลวที่ผสม membrane fragment เมื่อเพราะเลี้ยงนาน
6-12 ชั่วโมง รูปแบบการเพาะเลี้ยงที่พัฒนาขึ้นโดยผสม membrane fragment ความเข้มข้น 0.025
ยูนิต สามารถสนับสนุนการเจริญของ Campylobacter ทั้งจากเชื้อบริสุทธิ์ เชื้อที่ใส่ผสมกับเชื้อ
ประจำถิ่น และเชื้อที่ปนเปื้อนอยู่ในตัวอย่างไก่ ผลการทดลองแสดงให้เห็นถึงความเป็นไปได้ที่จะใช้
รูปแบบการเพาะเลี้ยงบนจานเพาะเชื้อที่ผสม membrane fragment มาใช้แทนวิธีการเพาะเชื้อแบบ
ดั้งเดิม