Study of secondary metabolite(s) produced by Nomuraea Rileyi and entomopathogenic fungus

ศึกษาสารทุติยภูมิที่สร้างจากเชื้อราก่อโรคในแมลง Nomuraea Rileyi

Name: Pannipa Prompiboon

LCSH: Fungicides

LCSH: Nomuraea rileyi

LCSH: Plants -- Effect of fungicides on

LCSH: Pests -- Biological control

LCSH: Spodoptera littoralis

Abstract: This study searches for potential cytotoxic substances produced by Nomuraea rileyi, an active compound was isolated from mycosed Spodoptera litura through an activity guided fractionation process. The compound, cytotoxic against the Sf9 insect cell line, was identified to be ergosterol peroxide (5α, 8α-epidioxy-24(R)- methylcholesta-6, 22-dien-3β-ol) using nuclear magnetic resonance techniques, infrared spectrometry, and mass spectroscopy. Anticancer screens demonstrated that ergosterol peroxide inhibited the growth of hormone-dependent breast cancer cell line (T47D), hormone-independent breast cancer cell line (MDA-MB-231), human epidermoid carcinoma in mouth cell line (KB), human cervical carcinoma cell line (HeLa), lung cancer cell line (H69AR) and human cholangiocarcinoma cell line (HuCCA-1) at IC50 of 5.8, 28.0, 46.7, 58.4, 65.4 and 105.1 μM, respectively. Anti HIV-1 activity of ergosterol peroxide was determined by syncytium reduction assay. The HIV-1 inhibitory activity and cytotoxicity toward host cells were evaluated as EC50 of 15.96 μg/ml and IC50 of 150.77 μg/ml, respectively. The therapeutic index (IC50/EC50) of 9.45 was calculated for ergosterol peroxide. In respect of in vivo toxic activity, ergosterol peroxide showed moderate effects against S. litura larvae-46.7 % mortality via topical application after 7 day post-treatment whereas the per os application had no effect on insect survival. No significant mortality was observed by injecting ergosterol peroxide into Heliothis virescens. The amounts of ergosterol peroxide produced by N. rileyi cultures under in vitro and in vivo were quantified. The physiological levels of ergosterol peroxide detected in mycosed and mummified cadavers were at 0.40 and 5.94 μg/ g dried weight, respectively. The mycelia and hyphal bodies cultures contained ergosterol peroxide at levels of 3.93 and 5.14 μg/g dried weight, respectively. These amounts were less than those needed to cause cytotoxicity response.

Abstract: จากการศึกษาการสร้างสารพิษของเชื้อราก่อโรคในแมลง Nomuraea rileyi ที่เป็นสาย พันธุ์ที่พบได้ในประเทศไทยโดย พบว่าสารสกัดจากหนอนกระทู้ผัก(Spodoptera litura)ที่ตาย โดยเชื้อราดังกล่าว มีความเป็นพิษต่อเซลล์ของแมลง S. frugiperda (Sf9) จากนั้นได้ทำการ แยกบริสุทธิ์สารออกฤทธิ์โดยอาศัยกระบวนการactivity guided fractionation และพิสูจน์สูตร โครงสร้างโดยอาศัยเทคนิคของนิวเคลียร์แมกเนติกเรโซแนนซ์, อินฟราเรทสเปคโตรเมตรี และแมสสเปคโตรสโคปี พบว่าคือสาร ergosterol peroxide (5α, 8α-epidioxy-24(R)- methylcholesta-6, 22-dien-3β-ol) จากการทดสอบกับเซลล์มะเร็งพบการออกฤทธิ์ในการ ต้านการเจริญเติบโตต่อเซลล์มะเร็งเต้านมชนิดที่ขึ้นกับฮอร์โมน, เซลล์มะเร็งเต้านมชนิดที่ไม่ ขึ้นกับฮอร์โมน, เซลล์มะเร็งเยื่อบุช่องปาก, เซลล์มะเร็งปากมดลูก, เซลล์มะเร็งปอดและ เซลล์มะเร็งท่อน้ำดีในตับที่ค่า IC50 เท่ากับ 5.8, 28.0, 46.7, 58.4, 65.4 และ 105.1 μM ตามลำดับ นอกจากนั้นยังได้ทำการทดสอบผลกระทบต่อการต้านเชื้อเอชไอวีโดยอาศัยวิธี syncytium reduction assayตรวจสอบ พบการออกฤทธิ์ต้านเชื้อเอชไอวีที่ค่า EC50 เท่ากับ 15.96 μg/ml โดยมีผลกระทบต่อชนิดชองเซลล์ที่ใช้ในการทดสอบต่ำที่ค่า IC50 เท่ากับ 150.77 μg/mlจากการทดสอบดังกล่าวมีค่า therapeutic index เท่ากับ 9.45 ผลทดสอบการออกฤทธิ์ของ ergosterol peroxide ต่อหนอนแมลง พบว่ามีฤทธิ์ในการ ฆ่าหนอนปานกลางคือสามารถฆ่าหนอนกระทู้ผักได้ 46.7 %โดยวิธีทาบนตัวหนอนแต่ไม่ออก ฤทธิ์เมื่อทดสอบให้หนอนกิน และไม่สามารถทำให้หนอนตายได้เมื่อฉีดเข้าลำตัวของหนอน ชนิด Heliothis virescens นอกจากนั้นได้ทำการหาปริมาณของ ergosterol peroxide ต่อ น้ำหนักแห้ง พบ 0.40 μg และ5.94 μgในหนอนที่ตายด้วยเชื้อราระยะแรกและระยะหลัง อีกทั้ง สามารถพบสารดังกล่าวได้ในเส้นใยและhypahl bodyของเชื้อรา N. rileyi อีกโดยมีน้ำหนัก 3.93 และ 5.14 μg ต่อน้ำหนักแห้งของตัวอย่างเชื้อราหนึ่งกรัม

Mahidol University

Address: NAKHONPATHOM

Email: liwww@mahidol.ac.th

Name: Chanpen Wiwat

Role: Thesis Advisors

Created: 2008

Modified: 2553-06-17

Issued: 2010-06-17

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

CallNumber: TH P194s 2008

eng

DegreeName: Doctor of Philosophy

Level: Doctoral Degree

Descipline: Biopharmaceutical Sciences

Grantor: Mahidol University

©copyrights Mahidol University

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	4638490.pdf	12.83 MB	47	2021-08-03 17:36:49

ใช้เวลา

0.220825 วินาที