Determination of atorvastatin in human plasma with solid phase micro-extraction followed by LC MS/MS method and its application to pharmacokinetics study

การวัดยาอาทอร์วาสตาตินในเลือดมนุษย์ด้วยวิธีการ Solid Phase Micro-Extraction ตามด้วย LC MS/MS และการประยุกต์ใช้ในการศึกษาเภสัชจลนศาสตร์

Name: Pattarawit Rukthong

MeSH: Atorvastatin

MeSH: Blood -- drug effects

MeSH: Pharmacokinetics

MeSH: Solid Phase Micro-Extraction

Abstract: Determination of drugs in human plasma using the HPLC technique has been widely accepted as an effective method owing to its practical applicability in routine drug analysis in clinical trials. Nevertheless, the method sensitivity can be compromised once limited sample volume is available. This problem is typically encountered in pharmacokinetics studies from which small volume of plasma samples either form humans or animals can be obtained. Atorvastatin, an HMG-CoA reductase inhibitor widely prescribed for the treatment of hypercholesterolemia and the prevention of cardiovascular diseases was selected as a model drug in this study. Drug extraction from human plasma was performed with the aid of reversed-phase C18 solid phase micro-extraction. The detection was accomplished by triple quandruple mass spectrometer interfaced operated in electrospray positive ion mode. Quantitation was achieved by using multiple reaction monitoring (MRM) precursorproduction transitions at m/z 559.2 and 440.1 for atorvastatin and m/z 412.2 and 224.2 for fluvastatin (internal standard). Linearity was found within the atorvastatin concentration range of 0.2-80 ng/ml. The limit of detection was found to be 0.05 ng/ml. The lower limit of quantification was 0.1 ng/ml with a relative standard deviation (%RSD) of less than 12%. Acceptable precision and accuracy were obtained for the concentrations within the calibration curve range. The average recovery at low, medium and high of atorvastatin concentrations from spiked plasma: quality control samples, were 84.16 ± 7.99%, 96.82 ± 6.14%, and 102.84 ± 6.73%, respectively. The need for less than 250 ml of plasma volume each sample made it possible to decrease sample preparation time. The method was successfully validated and proved appropriate for the analysis of atorvastatin in human plasma and can be applied for pharmacokinetics, bioavailability and bioequivalence studies.

Abstract: การหาปริมาณยาในเลือดด้วยวิธี HPLC นั้นเป็นที่ยอมรับอย่างกว้างขวางในการวิเคราะห์ ยาในทางคลินิก อย่างไรก็ตามเมื่อสารตัวอย่างมีปริมาณน้อยและต้องการความไว (sensitivity) ในการตรวจพบยาซึ่งเป็นปัญหาทางเภสัชจลนศาสตร์เมื่อทำการวัดระดับยาในเลือดมนุษย์และ สัตว์ โดยยาอาทอร์วาสตาตินเป็นยากลุ่มยับยั้งเอนไซม์ HMG Co-A reductase ซึ่งมีการใช้อย่าง แพร่หลายในการลดไขมันในเลือดและป้องกันการเกิดภาวะโรคหัวใจโดยวิธีการสกัดยาออกจาก พลาสมานั้นใช้วิธีการ solid phase micro-extraction และตามด้วย LC MS/MS ในการหาปริมาณ ยานั้นและใช้ electrospray ด้านบวกและ multiple reaction monitoring (MRM) โดยมีมวลต่อ ประจุของยาอาทอร์วาสตาตินที่ 559.2 และ 440.1 สำหรับ Internal standard ใช้ยาฟลูวาสตาติน ซึ่งมีประจุต่อมวลเท่ากับ 412.2 และ 224.2 ในการทดลองครั้งนี้พบว่าความสัมพันธ์เชิงเส้นอยู่ ในช่วงความเข้มข้นที่ 0.2-80 นาโนกรัม/มิลลิลิตร ความเข้มข้นที่สามารถตรวจพบอยู่ที่ 0.05 นา โนกรัม/มิลลิลิตร และมีความเข้มข้นของยาต่ำสุดที่สามารถหาปริมาณได้อยู่ที่ 0.1 นาโนกรัม/ มิลลิลิตรโดยมีค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์ไม่เกิน 12 % ค่าการค้นพบยาหลังจากการสกัดที่ ความเข้มข้น ต่ำ กลาง สูง พบ 84.16±7.99%, 96.8±6.14และ102.84±6.73 ตามลำดับ จากการ วิเคราะห์พบว่าจะใช้ปริมาณพลาสมาไม่เกิน 250 ไมโครลิตรซึ่งสามารถลดปริมาณตัวอย่างและ เวลาในการสกัดโดยสามารถนำมาประยุกต์ใช้ในการศึกษาเภสัชจลนศาสตร์, ชีวประสิทธิผล และชีวสมมูลของยาอาทอร์วาสตาติน

Mahidol University

Address: NAKHONPATHOM

Email: liwww@mahidol.ac.th

Name: Korbtham Sathirakul

Role: Thesis Advisor

Created: 2007

Modified: 2553-06-17

Issued: 2010-06-15

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

CallNumber: TH P315d 2007

eng

DegreeName: Master of Science

Level: Master's Degree

Descipline: Pharmaceutics

Grantor: Mahidol University

©copyrights Mahidol University

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	4637606.pdf	1.77 MB	31	2023-06-09 20:26:48

ใช้เวลา

0.289042 วินาที