แจ้งเอกสารไม่ครบถ้วน, ไม่ตรงกับชื่อเรื่อง หรือมีข้อผิดพลาดเกี่ยวกับเอกสาร ติดต่อที่นี่ ==>
หากไม่มีอีเมลผู้รับให้กรอก thailis-noc@uni.net.th
หากไม่มีอีเมลผู้รับให้กรอก thailis-noc@uni.net.th
Piyarat Srisawang. Functional characterization of sodium-carboxylate cotransporters in human hepatoma cell lines. Doctoral Degree(Physiology). Mahidol University. : Mahidol University, 2008.
Functional characterization of sodium-carboxylate cotransporters in human hepatoma cell lines
การทดสอบลักษณะการทำงานของตัวขนส่งสารโซเดียม-คาร์บอกซีเลตแบบร่วมในเซลล์เพาะเลี้ยงเฮบปาโตมาของมนุษย์
Name: Piyarat Srisawang
MeSH:
Citric Acid
MeSH:
Protein Kinase C
MeSH:
Succinic Acid
Abstract:
The cellular transport of the tricarboxylic acid cycle (TCA) intermediates are
mediated mainly by sodium-dicarboxylate cotransporters (NaDCs), which can be
classified into the low-affinity (NaDC-1), high-affinity (NaDC-3) and sodium-citrate
(NaCT) transporters based on its substrate affinity. These transporters are expressed in
the epithelial cells of kidneys, intestine, liver, bronchiole alveolar, epididymis,
placenta, brain and pancreas. Since the transport pathways for these intermediates in
liver cells are not well characterized, the present study examined the transport of
succinate and citrate in the human epithelial hepatoma cell lines, Hep G2 and Huh-7
and other human epithelial cell lines, T-84, U-87 MG, HuCCA-1 and MCF-7. This
study found the expression of succinate and citrate transporters, human NaDC-3
(hNaDC-3) and hNaCT transcripts in Hep G2 and only hNaCT transcript found in
Huh-7. Hep G2 cells exhibited a higher rate of succinate compared to citrate transport,
which was sodium dependent. Citrate transport was predominant in Huh-7 cells where
approximately half of it was sodium-dependent. Comparison of the transport
properties between Hep G2, Huh-7 cells and of human retinal pigment epithelial
(HRPE) cells transfected with human sodium dicarboxylate transporters, hNaDC-1,
hNaDC-3, and hNaCT indicated that Hep G2 cells express a combination of hNaDC-3
and hNaCT, while Huh-7 cells express hNaCT and unknown sodium/citrate
transporter(s). Due to its abundance, the regulation of hNaDC-3 by PKC and PKA
were evaluated. Short period activation of protein kinase C (PKC) by phorbol 12-
myristate, 13-acetate (PMA) and α–adrenergic receptor agonist, phenylephrine (PE),
downregulated sodium-dependent succinate transport presumably via hNaDC-3. The
inhibition by PMA was partially prevented by cytochalasin D, suggesting that PKC
reduces the hNaDC-3 activity, at least in part, by increased endocytosis. In contrast,
activation of PKA by both forskolin and epidermal growth factor (EGF) had no effect
on succinate transport. This study suggested that Hep G2 cells provide a useful model
for studies of di- and tricarboxylate regulation of human liver.
Abstract:
ตัวกลางในวัฏจักร Tricarboxylic acid cycle ถูกขนส่งเข้าเซลล์โดยผ่านตัวขนส่งโซเดียม-ได
คาร์บอกซีเลตแบบร่วม (NaDCs) พบว่ามีการจัดจำแนกออกเป็นกลุ่มตามความสามารถในการจับกับ
ซับสเตรตซัคซิเนตคือ กลุ่มที่มีความสามารถในการจับกับซัคซิเนตต่ำ (low-affinity NaDC-1) และกลุ่ม
ที่มีความสามารถในการจับกับซัคซิเนตสูง (high-affinity NaDC-3) และตัวขนส่งที่มีความสามารถใน
การจับกับซับสเตรตซิเตรต คือ โซเดียม-ซิเตรต (NaCT) การแสดงออกของตัวขนส่ง NaDC พบมากบน
เซลล์เยื่อบุผิวของไต ลำไส้ ตับ หลอดลม ท่อพักเชื้ออสุจิ รก สมอง และตับอ่อนเป็นต้น แต่การแสดงออก
และหน้าที่ของตัวขนส่ง NaDC ในเซลล์เยื่อบุผิวของตับยังไม่มีการศึกษาอย่างละเอียด ดังนั้น
วัตถุประสงค์ของการวิจัยครั้งนี้เพื่อศึกษาการแสดงออกของตัวขนส่ง NaDCs ในการขนส่งซัคซิเนตและ
ซิเตรตในเซลล์เพาะเลี้ยงเฮบปาโตมาของมนุษย์ Hep G2 และ Huh-7 รวมทั้งเซลล์มะเร็งเยื่อบุผิวใน
ลำไส้ใหญ่ (T-84) สมอง (U-87 MG) ท่อน้ำดี (HuCCA-1) และต่อมน้ำนม (MCF-7) ผลการทดลองนี้
พบว่า Hep G2 มีการแสดงออกของ NaDC-3 ชนิดที่พบในมนุษย์ (hNaDC-3) และ hNaCT ส่วน
Huh-7 มีการแสดงออกของ hNaCT เท่านั้น นอกจากนี้ยังพบว่า Hep G2 มีความสามารถในการขนส่ง
ซัคซิเนตมากกว่าซิเตรต และเป็นการขนส่งแบบอาศัยโซเดียม ส่วน Huh-7 มีความสามารถในการขนส่ง
ซิเตรต และครึ่งหนึ่งเป็นการขนส่งแบบอาศัยโซเดียม เมื่อเปรียบเทียบคุณสมบัติในการขนส่งซัคซิเนต
และซิเตรตในเซลล์ retinal pigment epithelial (HRPE) ของมนุษย์ซึ่งถูก transfected ด้วย hNaDC-1,
hNaDC-3 และ hNaCT สามารถสรุปได้ว่า Hep G2 มีการแสดงออกของ NaDC ชนิด hNaDC-3 และ
hNaCT ส่วน Huh-7 มีการแสดงออกของ hNaCT และอาจมีการแสดงออกของตัวขนส่งซิเตรตแบบ
อาศัยโซเดียมชนิดอื่นด้วย เนื่องจากการขนส่งซัคซิเนตผ่าน hNaDC-3 มีความโดดเด่น ดังนั้นการทดลอง
นี้จึงการศึกษากลไกการควบคุมตัวขนส่ง hNaDC-3 โดยโปรตีนไคเนสซี (PKC) และโปรตีนไคเนสเอ
(PKA) พบว่าการกระตุ้น PKC ด้วยสาร phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) และการกระตุ้น
การทำงานของ PKC ด้วยสาร phenylephrine (PE) ผ่านตัวรับชนิด α1−adrenergic ผลยับยั้งการขนส่ง
ซัคซิเนตแบบอาศัยโซเดียมผ่านทางตัวขนส่ง hNaDC-3 ซึ่งผลการยับยั้งการขนส่งโดย PMA สามารถ
ป้องกันได้เป็นบางส่วนด้วยสาร cytochalasin D จากผลการทดลองนี้สามารถบอกได้ว่า PKC มีผล
ยับยั้งการทำงานของตัวขนส่ง hNaDC-3 โดยเพิ่มขบวนการเอนโดไซโทซิส ในทางตรงกันข้าม การ
กระตุ้นการทำงานของ PKA ด้วยสาร forskolin และ epidermal growth factor (EGF) ไม่มีผลต่อการ
ขนส่งซัคซิเนตผ่านทางตัวขนส่ง hNaDC-3 ข้อมูลที่ได้จากการทดลองนี้สนับสนุนข้อสรุปที่ว่า Hep
G2 สามารถนำไปใช้เป็นเซลล์จำลองในการศึกษากลไกการควบคุมการทำงานของ NaDC ในตับของ
มนุษย์เพิ่มเติมต่อไปได้
Mahidol University
Address:
NAKHON PATHOM
Email:
liwww@mahidol.ac.th
Name: Varanuj Chatsudthipong
Role:
Thesis Advisors
Created:
2008
Modified:
2553-06-22
Issued:
2010-06-12
วิทยานิพนธ์/Thesis
application/pdf
CallNumber:
TH P694f 2008
eng
DegreeName: Doctor of Philosophy
Level: Doctoral Degree
Descipline: Physiology
Grantor: Mahidol University
©copyrights Mahidol University
RightsAccess:
ใช้เวลา
-0.58799 วินาที
Piyarat Srisawang
| Title | Contributor | Type |
|---|---|---|
| Functional characterization of sodium-carboxylate cotransporters in human hepatoma cell lines
มหาวิทยาลัยมหิดล Piyarat Srisawang | Varanuj Chatsudthipong | วิทยานิพนธ์/Thesis |
Varanuj Chatsudthipong