The application of flow cytometry in kidney transplantation ‪(flowpra tm and pronase digested FCXM)‬

การประยุกต์การตรวจโดยใช้เครื่องโฟลไซโตมิเตอร์ในผู้ป่วยเปลี่ยนไต

Name: Wichitchai Bintaprasit

MeSH: Blood Grouping and Crossmatching -- methods

MeSH: Flow Cytometry

MeSH: Pronase

Abstract: The objective of this study was to compare different methods in PRA testing and crossmatching using pronase. The CDC, AHG-CDC and FlowPRA methods were evaluated in 30 renal transplant patients for class I and 41 for class II. DTT treatment was also performed in CDC. The PRA were measured in the percentage and PRA>10% considered to be positive. Evaluated FCXM using pronase was used to compare with undigested FCXM. For HLA class I antibodies, PRA were compared using CDC, AHG-CDC and FlowPRA. There was only one positive for all three different techniques. Of these 29 CDC negative, 4 (14%) and 5 (17%) were positive by AHG-CDC and FlowPRA, respectively. PRA percentage showed <30% by CDC and AHG-CDC, whereas 3/5 of FlowPRA positive showed percentage >30%. For HLA class II antibodies, CDC and FlowPRA were compared. Three patients were positive by CDC and by FlowPRA. Nevertheless, when observed PRA percentage 2/3 of these positive showed PRA>50% by FlowPRA, but CDC showed <30%. For pronase FCXM, in non T-cell MCF of NC and PC were declined, on average, from 476±45 to 318±50 and 559±28 to 482±41 (p<0.0001), respectively. For T-cell MCF of PC, it declined from 501±58 to 461±56 but increased from 168±37 to 243±28 in NC. This study showed discrepancies in the results of PRA by different methods. We suggest that, FlowPRA is the most sensitive and AHG-CDC is more sensitive than CDC-PRA in detecting CYNAP antibodies. However, the cost and clinical correlation of FlowPRA should be considered. In the FCXM, pronase treatment could decrease background fluorescence or false positive, especially for non-T cell FCXM

Abstract: การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์ เพื่อเปรียบเทียบวิธีการต่างๆทีใช้ในการตรวจหา PRA กลุ่มตัวอย่างเป็นผู้ป่วย เปลี่ยนไตจำนวน 31 รายสำหรับตรวจหา PRA-HLA class I โดยวิธี CDC, AHG-CDC และ FlowPRA และ 41 ราย สำหรับ PRA-HLA class II โดยวิธี CDC และ FlowPRA ในส่วนของวิธี CDC มีการใช้ DTT ร่วมด้วย ผู้ป่วยรายใด ที่ให้ค่า PRA มากกว่า 10 เปอร์เซ็นต์ ถือว่าให้ผลบวก ส่วนในการทำ FCXM จะเปรียบเทียบระหว่างการใช้ และไม่ ใช้เอนไซม์ pronase ผลการศึกษาพบว่า ในการตรวจหา PRA-HLA class I มีผู้ป่วยเพียงรายเดียวที่ให้ผลบวกทั้ง 3 วิธี และใน จำนวน 29 รายที่ให้ผลลบโดยวิธี CDC มี 4 ราย (14%) ที่ให้ผลบวกโดยวิธี AHG-CDC และ 5 ราย (17%) ที่ให้ผล บวกโดยวิธี FlowPRA ในรายที่ให้ผลบวกโดยวิธี CDC และ AHG-CDC ให้ค่า PRA น้อยกว่า 30% ส่วนวิธี FlowPRA พบว่า 3 ใน 5 ราย ให้ค่า PRA มากกว่า 30% สำหรับการตรวจหา PRA-HLA class II มี 3 รายที่ให้ผล บวกทั้งวิธี CDC และวิธี FlowPRA ทั้ง 3 รายนี้ให้ค่า PRA น้อยกว่า 30%โดยวิธี CDC ในขณะที่ 2 ใน 3 รายให้ค่า PRA มากกว่า 50% โดยวิธี FlowPRA ส่วนในการทำ FCXM พบว่า เมื่อใช้เอนไซม์ pronase สำหรับ non-T cell FCXMค่า MCF ของ NC และ PC ลดลงจากที่ไม่ใช้เอนไซม์ โดยลดลงจาก 476±45 เป็น 318±50 และจาก 559±28 เป็น 482±41 (p<0.0001) ตามลำดับ สำหรับ T cell FCXM ค่า MCF ของ PC ลดลงจากที่ไม่ใช้เอนไซม์โดยลดลง จาก 501±58 เป็น 461±56 แต่ MCF เพิ่มขึ้นจาก 168±37 เป็น 243±28 ในส่วนของ NC การศึกษาในครั้งนี้แสดงให้เห็นถึงผลของ PRA ที่ได้ ว่ามีความแตกต่างกันในแต่ละวิธี และชี้ให้เห็นว่า วิธี FlowPRA เป็นวิธีที่มีความไวมากที่สุดเมื่อเปรียบเทียบกับวิธีอื่นๆ และวิธี AHG-CDC เป็นวิธีที่มีความไวกว่า วิธี CDC ในการตรวจพบ CYNAP แอนติบอดี้ อย่างไรก็ตามค่าใช้จ่าย และความสัมพันธ์ทางด้านคลินิกของวิธี FlowPRA ควรจะมีการพิจารณา สำหรับในการทำ FCXM การใช้เอนไซม์ pronase จะช่วยลดผลบวกปลอมที่ได้ โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับ non-T cell FCXM

Mahidol University

Address: NAKHON PATHOM

Email: liwww@mahidol.ac.th

Name: Sasijit Vejbaesya

Role: Thesis Advisors

Created: 2006

Modified: 2553-06-24

Issued: 2010-06-05

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

ISBN: 9740477496

CallNumber: TH W634a 2006

eng

DegreeName: Master of Science

Level: Master's Degree

Descipline: Transfusion Science

Grantor: Mahidol University

©copyrights Mahidol University

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	4437487.pdf	3.32 MB	21	2018-05-29 11:12:44

ใช้เวลา

-0.589367 วินาที