Analysis of HIV-1 uncoating in different cell types and effect of capsid phosphorylation on uncoating

การศึกษาวิเคราะห์กระบวนการ Uncoating ของเชื้อเอชไอวี-1 ในเซลล์ชนิดต่าง ๆ และผลของการ Phosphorylation ของโปรตีน Capsid ต่อการ uncoating

Name: Pathawut Wacharapornin

MeSH: HIV-1

MeSH: Capsid

MeSH: Lymphocytes

MeSH: Phosphorylation

Abstract: Uncoating is an essential step in the viral replication cycle. Little is known about the mechanism and requirement of HIV uncoating. Using an in vitro uncoating model, this study demonstrated that the uncoating of HIV-1 was efficiently induced by lysate from activated CD4+ lymphocytes, while quiescent CD4+ lymphocyte lysate was unable to uncoat HIV-1 core. The uncoating activity was associated with an induction of in vitro reverse transcription of the viral genome. Serine-to-alanine mutation at each residue of the three major phosphorylation sites of HIV-1 capsid protein could significantly reduce the uncoating activity. Core stability of the mutants was lower than that of the wild-type virus so that the lack of efficient uncoating of each mutant could not be due to an increase in capsid physical stability. Serine-toaspartic acid mutation to mimic the negative charge of phosphor-serine could not restore either uncoating activity or infectivity. Suppression of virion-associated catalytic subunit of cAMP-dependent protein kinase (C-PKA) activity could slightly lower the uncoating activity. Taken together, these results suggested a requirement of cellular activation-dependent factors and capsid protein phosphorylation for HIV-1 uncoating.

Abstract: Uncoating เป็นกระบวนการหนึ่งที่จำเป็นต่อการเพิ่มจำนวนของไวรัส ความรู้เกี่ยวกับการ uncoating ของเชื้อเอชไอวี-1ในปัจจุบันยังมีอยู่อย่างจำกัด แบบจำลองการ uncoating ซึ่งใช้ใน การศึกษานี้แสดงให้เห็นว่าการ uncoating สามารถเกิดได้อย่างมีประสิทธิภาพใน activated CD4+ lymphocyte แต่ไม่สามารถเกิดได้ใน quiescent CD4+ lymphocyte การ uncoating มี ความสัมพันธ์กับการกระตุ้นให้การ reverse transcription เกิดได้สมบูรณ์ การเปลี่ยนกรดอะมิโน ของโปรตีน capsid จาก serine ไปเป็น alanine ที่ตำแหน่งสำคัญสำหรับการ phosphorylation ทำให้ความสามารถในการ uncoating ลดลงอย่างมีนัยสำคัญ ในขณะที่ความแข็งแรงของ core particle ก็ลดลงด้วย แสดงว่าการลดลงของความสามารถในการ uncoating ไม่ได้เกิดจากความ แข็งแรงทางกายภาพของ core particle ที่เพิ่มขึ้น การเลียนแบบผลของประจุลบของ serine ที่ถูก phosphorylation โดยการเปลี่ยนกรดอะมิโนจาก serine ไปเป็น aspartic acid ไม่สามารถช่วยให้ การ uncoating และการติดเชื้อกลับไปมีประสิทธิภาพเหมือนเดิม การยับยั้งการทำงานของหน่วย ย่อยที่ทำหน้าที่เร่งปฏิกิริยาของเอนไซม์ cAMP-dependent protein kinase (PKA) ที่ถูกบรรจุเข้า มากับอนุภาคไวรัสทำให้ความสามารถในการ uncoating ลดลงเล็กน้อย ผลการศึกษานี้แสดงให้ เห็นว่าการ uncoating ของเชื้อเอชไอวี-1 ต้องการส่วนประกอบที่จำเป็นจากเซลล์ซึ่งขึ้นกับสภาวะที่ เซลล์ถูกกระตุ้นและการ phosphorylation ของโปรตีน capsid

Mahidol University

Address: NAKHON PATHOM

Email: liwww@mahidol.ac.th

Name: Prasert Auewarakul

Role: Thesis Advisors

Created: 2006

Modified: 2553-06-14

Issued: 2010-05-07

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

ISBN: 9740468985

CallNumber: TH P297an 2006

eng

DegreeName: Doctor of Philosophy

Level: Doctoral Degree

Descipline: Medical Microbiology

Grantor: Mahidol University

©copyrights Mahidol University

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	4437262.pdf	3.03 MB	27	2025-01-22 15:37:27

ใช้เวลา

0.263422 วินาที