Antifungal susceptibility testing of Cryptococcus neoformans and Candida SPP. isolates using etest and disk diffusion method

การทดสอบความไวต่อยาต้านเชื้อราของเชื้อคริปโตคอคคัสนีโอฟอร์แมนและแคนดิดาสปีชีส์ที่แยกจากผู้ป่วยด้วยวิธีอีเทสและดีสดีฟฟิวชั่น

Name: Pakdee Watanatraibhob

LCSH: Antifungal agents

LCSH: Cryptococcus neoformans

LCSH: Candida

LCSH: Diffusion

Abstract: Antifungal susceptibility testing was performed on 42 strains of C. neoformans and 17 strains of Candida spp. isolated from patients admitted to Pramongkutklao Hospital, Bangkok, Thailand, from January 2001 to April 2003. The minimal inhibitory concentration (MIC) of amphotericin B and fluconazole for C. neoformans isolates from blood, cerebrospinal fluid or bone marrow, were determined by Etest. All clinical isolates of C. neoformans were susceptible to amphotericin B. Fifty-nine percent (25/42) of C. neoformans isolates were susceptible to fluconazole, 36% (15/42) were dose-dependent susceptible (S-DD), and 5% (2/42) were resistant. Treatment failure was found in 3 cryptococcosis patients who were infected with strains that had amphotericin B MICs of 0.032, 0.047, and 0.094 μg/ml. There was no correlation between amphotericin B MICs and the clinical outcome of 21 cryptococcosis patients treated with amphotericin B. Two of 7 strains of C. neoformans, isolated from patients who had previously received fluconazole as a suppressive therapy, were resistant to fluconazole. None of the 35 isolates obtained from patients who did not receive fluconazole suppressive therapy were fluconazole resistant. Statistical analysis showed a significant correlation between patients receiving fluconazole prophylactic therapy and infection with fluconazole resistant strains (P <0.05). In addition, patients infected with cryptococcal strains having dose dependent susceptibility to fluconazole did not show an increase in the occurrence of relapse/reinfection relative to patients infected with fluconazole sensitive strains (P = 0.299). Etest and a disk diffusion method were employed to measure the MICs and inhibition zones of amphotericin B and fluconazole in 17 strains of Candida isolates from blood. All clinical isolates of Candida spp. were susceptible to amphotericin B. Sixty-five percent (11/17) of the Candida isolates were susceptible to fluconazole, 12% (2/17) were S-DD, and 23% (4/17) were resistant to fluconazole. Regression analyses showed a correlation between Etest MICs of fluconazole and amphotericin B and inhibition zones to fluconazole and amphotericin B. Further analyses revealed that infection with Candida isolates that had high amphotericin B MICs was not associated with microbiological failure in patients treated with amphotericin B (P = 0.667 and 0.200).

Abstract: การศึกษาความไวของเชื้อยีสต์ C. neoformans และ Candida spp. ต่อยาต้านเชื้อราที่เพาะ แยกเชื้อได้จากคนไข้ที่เข้ามารับการรักษา ณ โรงพยาบาลพระมงกุฎเกล้าฯในระหว่างเดือนมกราคม 2544- เมษายน 2546 โดยทำการหาค่าความเข้มข้นของยาแอมโฟเทอริซินบีและยาฟลูโคนาโซลที่ต่ำที่สุดที่สามารถ ยับยั้งการเจริญเติบโต (minimal inhibition concentration or MIC) ที่มีต่อเชื้อ C. neoformans จำนวน 42 สายพันธุ์ ซึ่งเพาะแยกเชื้อได้จากเลือด น้ำไขสันหลังหรือไขสันหลังโดยใช้วิธี Etest ผลการศึกษาพบว่าเชื้อ C. neoformans จำนวน 2 สายพันธุ์ (ร้อยละ 5) ดื้อต่อยาฟลูโคนาโซล เชื้อ C. neoformans จำนวน 15 สายพันธุ์ (ร้อยละ 36) มีความไวปานกลางต่อยาฟลูโคนาโซล และเชื้อ C. neoformans จำนวน 25 สายพันธุ์ (ร้อยละ 59) มีความไวต่อยาฟลูโคนาโซล เชื้อ C. neoformans จำนวน 35 สายพันธุ์ที่เพาะได้จากคนไข้ซึ่งไม่เคยได้รับยาฟลูโคนาโซลมา ก่อนนั้นไม่พบเชื้อสายพันธุ์ที่ดื้อต่อยาฟลูโคนาโซล นอกจากนี้ยังพบเชื้อ C. neoformans จำนวน 2 จาก 7 สายพันธุ์ที่เพาะแยกเชื้อได้จากคนไข้ซึ่งได้รับยาฟลูโคนาโซลเพื่อควบคุมโรคมีการดื้อต่อยาฟลูโคนาโซล จากการ ทดสอบทางสถิติพบความสัมพันธ์ระหว่างคนไข้ซึ่งเคยได้รับยาฟลูโคนาโซลมาก่อนและการติดเชื้อสายพันธุ์ที่ดื้อ ต่อยาฟลูโคนาโซลอย่างมีนัยสำคัญ (P <0.05) จากการทดสอบทางสถิติไม่พบความสัมพันธ์ระหว่างคนไข้ที่ติดเชื้อสายพันธุ์ที่มีความไวปานกลาง ต่อยาฟลูโคนาโซลและการเพิ่มขึ้นของการเกิด relapse หรือ reinfection เมื่อเทียบกับคนไข้ที่ติดเชื้อสาย พันธุ์ที่มีความไวต่อยาฟลูโคนาโซลอย่างมีนัยสำคัญ (P = 0.299) เชื้อ C. neoformans จำนวน 42 สายพันธุ์ (ร้อยละ 100) มีความไวต่อยาแอมโฟเทอริซินบี พบ คนไข้โรค cryptococcosis จำนวน 3 รายที่ไม่ตอบสนองต่อการรักษา โดยมีค่า amphotericin B MICs = 0.032 0.064 และ 0.094 μg/ml จากการทดสอบทางสถิติไม่พบความสัมพันธ์ระหว่าง amphotericin B MICs กับ clinical outcome ของคนไข้ที่ติดเชื้อ C. neoformans จำนวน 21 รายที่ได้รับการรักษา ด้วยยาแอมโฟเทอริซินบี การหาค่า MIC และ inhibition zone ของยาแอมโฟเทอริซินบีและยาฟลูโคนาโซลที่มีต่อเชื้อ Candida spp. จำนวน 15 สายพันธุ์ซึ่งเพาะแยกเชื้อได้จากเลือดโดยใช้วิธี Etest และ disk diffusion test พบเชื้อ Candida spp. จำนวน 4 สายพันธุ์ (ร้อยละ 23) ดื้อต่อยาฟลูโคนาโซล พบเชื้อเพียง 2 สาย พันธุ์ (ร้อยละ 12) ที่มีความไวปานกลางต่อยาฟลูโคนาโซล และเชื้อจำนวน 11 สายพันธุ์ (ร้อยละ 65) มีความ ไวต่อยาฟลูโคนาโซล นอกจากนี้ยังพบว่า เชื้อ Candida spp. ทุกสายพันธุ์มีความไวต่อยาแอมโฟเทอริซินบี จากการทดสอบทางสถิติโดยใช้วิธี regression analysis พบความสัมพันธ์ระหว่างค่า MIC จากการทำ Etest และความกว้างของ inhibition zone จากการทำ disk diffusion test ของยาแอมโฟ- เทอริซินบีและฟลูโคนาโซลอย่างมีนัยสำคัญ ผลการทดสอบทางสถิติไม่พบความสัมพันธ์ระหว่างคนไข้ที่ติดเชื้อ Candida ที่มีค่า amphotericin B MICs สูงกับ microbiological failure ของคนไข้ที่ได้รับการ รักษาด้วยยาแอมโฟเทอริซินบีอย่างมีนัยสำคัญ (P = 0.667 และ 0.200)

Mahidol University

Address: NAKHON PATHOM

Email: liwww@mahidol.ac.th

Name: Padungsri Dubbs

Role: Thesis Advisors

Created: 2004

Modified: 2553-03-20

Issued: 2010-02-24

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

ISBN: 9740453325

CallNumber: TH P152a 2004

eng

DegreeName: Master of Science

Level: Master's Degree

Descipline: Microbiology

Grantor: Mahidol University

©copyrights Mahidol University

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	4236995.pdf	2.68 MB	57	2020-05-28 18:16:23

ใช้เวลา

0.335169 วินาที