Study of lysogeny of bacteriophage VHS1 in Vibrio harveyi

การศึกษาไลโซเจนีของแบคเทอริโอฟาจ VHS1 ในเชื้อ Vibrio harveyi

Name: Krit Khemayan

LCSH: Bacteriophages

LCSH: Lysogeny

LCSH: Vibrio

Abstract: Exposure of a bacterial suspension to a temperate bacteriophage will result in lysis of many cells and lysogenic conversion of some that contain a prophage plasmid or prophage element integrated into the host bacterial chromosome. The result is a bacterial clone of variable stability that may express genes from the acquired prophage. In this study, the lysogenic bacteriophage VHS1 produced very few, relatively unstable lysogenic clones of V. harveyi. These unstable clones produced both infected (lysogenic) and uninfected (non-lysogenic) progeny clones in the same culture. The uninfected clones were very stable and showed no lytic plaques when lawns were challenged with VHS1. However, they did show turbid plaques in dot plaque assays. Thus, they differed phenotypically from the original parental isolate, suggesting that interaction with VHS1 resulted in permanent genetic change. Despite this, the clones failed to show evidence of genetic material from VHS1 by southern blot hybridization and PCR assay, suggesting that the change had occurred in the host genome. Such clones may be called pseudolysogenic since they show some phenotypic characteristics of lysogenic clones but do not contain phage genes. This phenomenon has not been previously reported and the mechanism for it is unknown. Experiments revealed that V. harveyi clones lysogenized by VHS1 carried the prophage as an episome that did not integrate into the host chromosome. The VHS1 prophage could be detected by both southern blot hybridization and by polymerase chain reaction (PCR) assay. This situation explained the rapid loss of virulence of lysogenic isolates on continuous subculture in the laboratory

Abstract: การสัมผัสกันระหว่างแบคทีเรียและเท็มเพอเรต (temperate) แบคเทอริโอฟาจใน สารละลาย ส่งผลให้เกิดการแตกของหลายเซลล์และเกิดกระบวนการเปลี่ยนปลงแบบไลโซจีนิก คือบางเซลล์มีโพรฟาจในรูปพลาสมิดหรือในรูปการแทรกสายพันธุกรรมเข้าไปในโครโมโซม ของแบคทีเรีย ผลของการเกิดกระบวนการนี้มีความหลากหลายทางความคงทนซึ่งอาจมีการ แสดงออกจากการได้มาของยีนส์จากโพรฟาจ ในการศึกษานี้ ไลโซเจนิกจากแบคเทอริโอฟาจ VHS1 เกิดขึ้นค่อนข้างน้อยและไม่คงทน ความไม่คงทนของโคลนที่ได้ให้ทั้งโคลนที่ติดเชื้อ (lysogenic) และที่ไม่ติดเชื้อ (non-lysogenic) ในอาหารเลี้ยงเชื้อเดียวกัน โคลนที่ไม่ติดเชื้อ ค่อนข้างมีควมอยู่ตัวและเกิดพลาด (plaque) แบบไม่ชัดเจนในการท้าทายด้วย VHS1 อย่างไรก็ ตาม พบว่ามีการเปลี่ยนแปลงลักษณะที่แสดงออกแตกต่างจากเชื้อเริ่มต้น บ่งบอกมีการเกิด ปฏิสัมพันธ์กับ VHS1 ส่งผลให้เปลี่ยนแปลงอย่างถาวรที่พันธุกรรม นอกจากนี้โคลนที่ได้ไม่ สามารถที่จะตรวจสอบด้วยวิธีเอ็นเอไฮบริไดเซชั่นและพีซีอาร์ว่ามี VHS1 อยู่ บ่งบอกว่ามีการ เปลี่ยนปลงที่จีโนม ซึ่งอาจเรียกโคลนที่ได้ว่าซูโดไลโซเจนิก (pseudolysogenic) เพราะว่ามี การแสดงออกลักษณะบางอย่างแบบไลโซเจนิกแต่ไม่มีการปรากฤของฟาจยีนส์ สิ่งทีปรากฏให้ เห็นนี้ไม่เคยมีการรายงานและก็ยังไม่ทราบถึงกลไกที่เกิดมาก่อน ผลการทดลองพบว่า V. harveyi โคลนเกิดการไลโซจิไนซื (lysogenize) โดย VHS1 ซึ่งอยู่ในรูป episome ซึ่งไม่เกิด การแทรกตัวเข้าไปในโครโมงโซมของเจ้าบ้าน VHS1 สามารถตรวจสอบด้วยวิธีเอ็นเอไฮบริได เซชั่นและพีซีอาร์ เหตุการณ์นี้สามารถอธิบายปรากฏการณ์การหายไปอย่างรวดเร็วของการเกิด พิษของไลโซเจนิกที่มากจากการเลี้ยงเชื้อแบบต่อเนื่องในห้องทดลอง

Mahidol University

Address: NAKHON PATHOM

Email: liwww@mahidol.ac.th

Name: Flegel, Timothy W

Role: Thesis Advisors

Created: 2004

Modified: 2553-03-16

Issued: 2010-02-09

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

ISBN: 9740448534

CallNumber: TH K92s 2004

eng

DegreeName: Master of Science

Level: Master's Degree

Descipline: Biotechnology

Grantor: Mahidol University

©copyrights Mahidol University

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	4536536.pdf	4.46 MB	25	2021-11-06 12:58:00

ใช้เวลา

0.263882 วินาที