Characterization of ion channels in Thai cholangiocarcinoma cell lines

การศึกษาช่องไอออนในเซลล์มะเร็งท่อน้ำดีไทย

Name: Prattana Samasilp

MeSH: Cell Line -- Thailand

MeSH: Cholangiocarcinoma -- Thailand

MeSH: Ion Channels

Abstract: Cholangiocarcinoma (CCA), or bile duct carcinoma, is an important publichealth problem in northeasthern Thailand. The mechanism of carcinogenesis of CCA, however is still uncertain. On the other hand, some ion channels are reported to be involved in regulating proliferation and apoptosis in some cancer cells. The objective of this work was to characterize ion channels in Thai cholangiocarcinoma cell lines using the whole-cell patch clamp technique. Results: Average cell diameter, cell capacitance and series resistance were (mean ± S.E.M.) 22.25 ± 0.42 μm, 30.41 ± 1.73 pF and 7.00 ± 0.83 MΩ, respectively. Basal current response could be separated into three patterns, according to voltage dependence. Firstly, outwardly rectifying pattern (38%) which was composed of two currents with different kinetics: The timeindependent (TI) current was inhibited by 250 μM DIDS but not effected by 10 mM TEA, 2 mM Ba2+ and external Cl- ion substitution. The slowly activating (SA) current was found in a small number (6%) and the ionic basis was not tested. The other two current patterns were the linear pattern (LP, 54%) and the inwardly rectifying pattern (8%). The latter can be further classified by kinetics to timeindependent (TIir) and inactivating (IN) forms. Both LP and TIir were not affected by 250 μM DIDS, 10 mM TEA, 2 mM Ba2+ and external Cl- ion substitution. Furthermore, when CCA cells were exposed to 600 μM ATP, the outward and inward currents were increased by 4.4 times (p=0.0024, n=8) and 3.3 times (p=0.0156, n=8) in 53.33% of patched cells. ATP-activated outward current were blocked by 250 μM DIDS (p=0.0016, n=5) and 10 mM TEA (n=1). These findings indicate that some cells of Thai cholangiocarcinoma cell lines may possess a voltage-gated Cl- channel and ATP-sensitive Cl- and K+ channels. The identity of other ligand-gated ion channels in CCA cell lines and cholangiocytes, and the association with carcinogenesis need further investigation. Data from this study could provide a basic knowledge for future study into cholangiocarcinogenesis and treatment.

Abstract: มะเร็งท่อน้ำดีเป็นปัญหาสาธารณสุขที่สำคัญในประเทศไทย โดยเฉพาะภาคตะวันออกเฉียง- เหนือ แต่กลไกการเกิดมะเร็งท่อน้ำดีในขณะนี้ยังไม่เป็นที่ทราบแน่ชัด มีรายงานว่าช่องไอออนบาง ชนิดเกี่ยวข้องกับการควบคุมการแบ่งตัวและการตายในเซลล์มะเร็งบางชนิด จุดประสงค์ของการศึกษา นี้เพื่อจำแนกช่องไอออนในสายพันธุ์ของเซลล์มะเร็งท่อน้ำดีผู้ป่วยไทยโดยใช้เทคนิค whole-cell patch clamp ผลการทดลองพบว่าค่าเฉลี่ยเส้นผ่านศูนย์กลางเซลล์, ความจุไฟฟ้าของเซลล์ และความต้านทาน อนุกรมมีค่า 22.25 ± 0.42 μm, 30.41 ± 1.73 pF และ 7.00 ± 0.83 MΩ ตามลำดับ กระแสที่ ตอบสนองในภาวะปกติสามารถแบ่งออกได้ 3 รูปแบบตามการตอบสนองต่อศักย์ไฟฟ้าของเซลล์ รูปแบบแรกคือ outwardly rectifying (38%) ประกอบด้วยกระแส 2 ชนิดที่มี kinetic ต่างกันคือ time-independent (TI) ซึ่งถูกยับยั้งได้ด้วย 250 μM DIDS แต่ 10 mM TEA, 2 mM Ba2+ และ การแทนที่ Cl- ภายนอกเซลล์ไม่มีผล Slowly activating (SA) พบได้น้อยเพียง 6% จึงไม่สามารถ ทดสอบไอออนที่เกี่ยวข้องได้ อีก 2 รูปแบบคือ linear (LP) (54%) และ inward rectifying (8%) แบ่งออกได้อีก 2 ชนิด ตาม kinetic คือ time-independent (TIir) และ inactivating (IN) 250 μM DIDS, 10 mM TEA, 2 mM Ba2+ และการแทนที่ Cl- ภายนอกเซลล์ ไม่มีผลต่อทั้ง LP และ TIir นอกจากนี้เมื่อให้ 600 μM ATP พบว่ากระแสออกและกระแสเข้าเพิ่มเป็น 4.4 เท่า (p = 0.0024, n = 8) และ 3.3 เท่า (p = 0.0156, n = 8) ใน 53.33% ของเซลล์ที่ทำการทดลอง กระแสที่ถูกกระตุ้นด้วย ATP ถูกยับยั้งด้วย 250 μM DIDS (p = 0.0016, n = 5) และ 10 mM TEA (n = 1) จากผลการทดลองทั้งหมดชี้ว่าสายพันธุ์ของเซลล์มะเร็งท่อน้ำดีผู้ป่วยไทยบางเซลล์อาจมี voltage-gated Cl- channel และ ATP-sensitive Cl- และ K+ channels การจำแนก ligand-gated ion channels ชนิดอื่นๆในสายพันธุ์ของเซลล์มะเร็งท่อน้ำดีและเซลล์เยื่อบุผนังท่อน้ำดี และความ เกี่ยวข้องกับการเกิดมะเร็งท่อน้ำดี มีความจำเป็นที่จะศึกษาต่อไปข้อมูลในการทดลองครั้งนี้อาจเป็น ความรู้พื้นฐานสำหรับการศึกษาการเกิดมะเร็งท่อน้ำดีและการรักษาต่อไปในอนาคต

Mahidol University

Address: NAKHON PATHOM

Email: liwww@mahidol.ac.th

Name: Wattana B Watanapa

Role: Thesis Advisors

Created: 2004

Modified: 2553-03-16

Issued: 2010-02-09

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

ISBN: 9740447694

CallNumber: TH P913c 2004

eng

DegreeName: Master of Science

Level: Master's Degree

Descipline: Physiology

Grantor: Mahidol University

©copyrights Mahidol University

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	4436252.pdf	3.91 MB	6	2019-03-17 20:41:53

ใช้เวลา

0.337829 วินาที