Use of bacterial DNA extract for induction of immunity to malarial parasite in mice

การใช้ดีเอ็นเอของแบคทีเรียในการชักนำให้เกิดภูมิคุ้มกันต่อการติดเชื้อมาลาเรียในหนูทดลอง

Name: Renu Wattanaluangarun

MeSH: Antibodies

MeSH: Cytokines

MeSH: DNA, Bacterial

MeSH: Immunity

MeSH: Malaria -- parasitology

Abstract: Bacterial DNA has been known to be an immunostimulatory agent to induce immunity against infectious diseases. This study aimed to evaluate Lactobacillus DNA for induction of immunity against blood-stage malaria infection. Firstly, thirtyfour Lactobacillus isolates were tested in vitro for cell activation and induction of IL- 12 production. Lactobacillus DNA extracts No.24 and 28 were chosen since they gave the most immune response. Secondly, both DNA extracts were investigated for their induction of immune defenses against blood-stage P. yoelii infection in mice. Various doses and routes of Lactobacillus DNA were studied for treatment of P. yoelii–infected mice, but no mice survived after the infection. However, results showed that for observed parasitemia at day 6 or 7 post infection a single administration of Lactobacillus DNA via subcutaneous injection could reduce parasitemia more than the administration via intraperitoneal injection, and the optimal dose of Lactobacillus DNA was >100 μg per mouse. Three dose-injections at day 0, 2, and 4 did not reduce parasitemia but an additional dose at day –4 could reduce parasitemia significantly (p<0.01). Single dose-injection at only day –4 or –7 also reduced parasitemia significantly (p<0.01). Finally, for use as adjuvant, mice immunized with MSP119 mixed with Montanide ISA720 and Lactobacillus DNA extracts enhanced protective immunity against P. yoelii infection, compared to mice immunized with MSP119 and Montanide ISA720. Control unimmunized mice or mice immunized only with adjuvants died within 10 days with high parasitemia. The addition of Lactobacillus DNA as adjuvant enhanced both IgG1 and IgG2a isotype responses, but it had more effect on IgG2a production. These findings suggested that Lactobacillus DNA could be used as a curative agent and adjuvant for enhancing immunity to malaria infection.

Abstract: ปัจจุบันเราทราบแล้วว่า ดีเอ็นเอของแบคทีเรียมีความสามารถในการกระตุ้นภูมิคุ้มกันในการ ป้องกันโรคติดเชื้อต่างๆ การศึกษาครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาความสามารถของดีเอ็นเอของแลคโต บาซิลลัสในการชักนำให้เกิดภูมิคุ้มกันต่อการติดเชื้อมาลาเรียในหนูทดลอง ประการแรกนำดีเอ็นเอของแลค โตบาซิลลัสจำนวน 34 ชนิดมาทดสอบความสามารถในการกระตุ้นเซลล์และการสร้าง IL-12 จากเซลล์ พบว่า ดีเอ็นเอของแลคโตบาซิลลัสหมายเลข 24 และ 28 กระตุ้นการตอบสนองดังกล่าวได้ดีที่สุด ประการ ที่สองนำดีเอ็นเอของแลคโตบาซิลลัสทั้ง 2 ชนิดนี้มาทดสอบความสามารถในการชักนำให้หนูทดลองสร้าง ภูมิคุ้มกันต่อการติดเชื้อมาลาเรีย โดยฉีดดีเอ็นเอของแลคโตบาซิลลัสในปริมาณและทางที่ให้ต่างๆกันพบว่า ไม่มีหนู ทดลองตัวใดรอดชีวิตจากการติดเชื้อมาลาเรียได้ อย่างไรก็ตามเมื่อนับปริมาณเชื้อมาลาเรียในเลือด หลังจาก ได้รับเชื้อ 6 หรือ 7 วันพบว่า การฉีดดีเอ็นเอของแลคโตบาซิลลัสเข้าทางชั้นใต้ผิวหนังในปริมาณ มากกว่า 100 ไมโครกรัมเพียงหนึ่งครั้งสามารถลดปริมาณเชื้อมาลาเรียในเลือดได้มากกว่าการฉีดเข้าทาง หน้าท้อง การฉีดดีเอ็นเอของแลคโตบาซิลลัส 3 ครั้งเข้าทางชั้นใต้ผิวหนังในวันที่ 0, 2 และ 4 ของการติด เชื้อไม่สามารถลดปริมาณเชื้อมาลาเรียในเลือด แต่เมื่อเพิ่มการฉีดดีเอ็นเอของแลคโตบาซิลลัสอีกหนึ่งครั้ง 4 วัน ก่อนการติดเชื้อพบว่า สามารถลดปริมาณเชื้อมาลาเรียในเลือดลงอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (p<0.01) นอกจากนี้การฉีดดีเอ็นเอของแลคโตบาซิลลัส 7 วันและ 4 วันก่อนการติดเชื้อพบว่า สามารถลดปริมาณ เชื้อมาลาเรียในเลือดได้เช่นเดียวกัน (p<0.01) และประการที่สามทดสอบความสามารถของดีเอ็นเอของ แลคโตบาซิลลัสในการเป็น adjuvant โดยการให้ร่วมกับ MSP119 และ Montanide ISA720 พบว่า ดีเอ็นเอของแลคโตบาซิลลัสสามารถส่งเสริมการสร้างภูมิคุ้มกันต่อการติดเชื้อมาลาเรียได้ดีกว่าหนูที่ได้รับ เฉพาะ MSP119 และ Montanide ISA720 โดยภูมิคุ้มกันที่เพิ่มขึ้นเป็นทั้งชนิด IgG1 และ IgG2a แต่ระดับของ IgG2a เพิ่มขึ้นในอัตราส่วนที่มากกว่า IgG1 ดังนั้นจึงผลการศึกษานี้แสดงให้เห็นว่า ดีเอ็น เอของแลคโตบาซิลลัสสามารถบำบัดการติดเชื้อมาลาเรียและใช้เป็นตัวการสร้างภูมิคุ้มกันป้องกันการติดเชื้อ มาลาเรียได้

Mahidol University

Address: NAKHON PATHOM

Email: liwww@mahidol.ac.th

Name: Chakrit Hirunpetcharat

Role: Thesis Advisors

Created: 2004

Modified: 2553-06-09

Issued: 2010-02-05

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

ISBN: 9740445748

CallNumber: TH R423u 2004

eng

DegreeName: Master of Science

Level: Master's Degree

Descipline: Infectious Diseases and Epidemiology

Grantor: Mahidol University

©copyrights Mahidol University

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	4436080.pdf	3.3 MB	14	2018-06-20 16:12:50

ใช้เวลา

0.276393 วินาที