Characterization and purification of a bacteriocin produced by Lactobacillus plantarum PMU33 strain from fermented fish products

การศึกษาคุณสมบัติและการทำให้บริสุทธิ์ของสารยับยั้งแบคเทอรอโอซินจาก Lactobacillus plantarum สายพันธุ์ PMU33 แยกจากผลิตภัณฑ์อาหารหมักจากปลา

Name: Pensom Jumriangrit

LCSH: Bacteriocins

LCSH: Fishes

LCSH: Lactic and bacteria

LCSH: Lactobacillus plantarum

Abstract: Lactic acid bacteria play an important role in the fermentation process. They can produce many kinds of substances to preserve food by adding texture, aroma, and taste to the products. Studying of bacteriocin-producing strains may be useful to improve microbial safety in fermented food products. A total of 59,509 lactic acid bacteria isolates from ten fermented fish products were screened for bacteriocin activity using a direct plating method. Of these 0.27 % were detected. One isolate from som-fak (one type of fish products) was found to produce a bacteriocin and identified as Lactobacillus plantarum PMU33 strain. This strain produces a stable secretory bacteriocin that is inhibitory not only to the closely related species but also to many food-borne pathogenic bacteria including Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus and some species of Listeria. This bacteriocin is the peptide as it is inactivated by four proteases. It is heat stable and active over a wide pH range (2-10). This bacteriocin was purified to homogeneity through a three step process: hydrophobic adsorption (Amberlite XAD-16), cation exchange chromatography, and reverse phase chromatography. 10 residues of the N-terminal amino acid sequence of this purified bactericin showed a sequence similarity to one peptide of the two-peptide lantibiotic plantaricin W alpha (Plwα), a reported bacteriocin. The bacteriocin produced by L. plantarum PMU33 was confirmed to be plantaricin W by polymerase chain reaction using specific primers from the structural gene of plantaricin W. The amplified DNA fragment of about 591 base pairs was sequenced and shown to encode two peptides that are identical to the two- peptides (plwα, plwβ) lantibiotic plantaricin W.

Abstract: แบคทีเรียกรดแลกติกมีความสำคัญในกระบวนการผลิตอาหารหมัก แบคทีเรียนี้สามารถสร้างสารหลาย ชนิดซึ่งช่วยถนอมอาหารและคงลักษณะทางกายภาพ กลิ่น และรสของอาหาร การศึกษาเชื้อที่มีคุณสมบัติในการ สร้างแบคเทอริโอซินจึงมีประโยชน์ในการผลิตอาหารหมัก จากการตรวจสอบตัวอย่างการผลิตสารยับยั้งแบคเทอ ริโอซินในแบคทีเรียจำนวน 59,509 โคโลนีจากผลิตภัณฑ์อาหารหมักจากปลาจำนวน 10 ตัวอย่าง ด้วยวิธี Direct plating เปอร์เซ็นต์การตรวจพบเท่ากับ 0.27% ในจำนวนดังกล่าวพบ Lactobacillus plantarum สายพันธุ์ PMU33 ที่มีความเสถียรของการผลิตสารยับยั้งจุลชีพในอาหารเหลวยับยั้งการ เจริญเติบโตของเชื้อสายพันธุ์ใกล้เคียง รวมทั้ง Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus และ Listeria หลายชนิด สารยับยั้งแบคเทอริโอซินนี้มีคุณสมบัติเป็นโปรตีนเนื่องจากถูกยับยั้งด้วยเอนไซม์กลุ่มโปร ตีเอส 4 ชนิดทนความร้อนและมีความเสถียรต่อพีเอช (2-10) ทำการแยกบริสุทธิ์โดยผ่าน 3 ขั้นตอน hydrophobic adsorption (Amberlite XAD-16), cation exchange chromatography และ reverse phase chromatography พบว่าลำดับกรดอะมิโน 10 ตัวแรกของเปปไทด์บริสุทธิ์มีความคล้าย กับสายเปปไทด์ plantaricin W alpha (Plwα) ซึ่งเป็นสายเปปไทด็สายหนึ่งของแบคเทอริโอซินกลุ่มแลน ติไบโอติกที่ประกอบด้วย 2 สายเปปไทด์ชื่อ plantaricin W (Plw) ตรวจสอบสมมุติฐานนี้โดยวิธีพีซีอาร์ โดยออกแบบไพรเมอร์ที่จำเพาะยีนโครงสร้างของ plantaricin W ได้ PCR product ขนาด 591 bp ทำ การตรวจสอบลำดับเบสของ PCR Product พบยีนที่สร้างสายเปปไทด์ซึ่งเหมือนกันกับแบคเทอริโอซินกลุ่ม แลนติไบโอติกที่ประกอบด้วย 2 สายเปปไทด์ plantaricinW (plwα, plwβ)

Mahidol University

Address: NAKHON PATHOM

Email: liwww@mahidol.ac.th

Name: Wilai Noonpakdee

Role: Thesis Advisors

Created: 2004

Modified: 2553-04-26

Issued: 2010-02-05

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

ISBN: 9740446639

CallNumber: TH P418c 2004

eng

DegreeName: Master of Science

Level: Master's Degree

Descipline: Biochemistry

Grantor: Mahidol University

©copyrights Mahidol University

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	4336164.pdf	1.64 MB	59	2026-05-26 18:16:01

ใช้เวลา

-0.637065 วินาที