แจ้งเอกสารไม่ครบถ้วน, ไม่ตรงกับชื่อเรื่อง หรือมีข้อผิดพลาดเกี่ยวกับเอกสาร ติดต่อที่นี่ ==>
หากไม่มีอีเมลผู้รับให้กรอก thailis-noc@uni.net.th
หากไม่มีอีเมลผู้รับให้กรอก thailis-noc@uni.net.th
Jumnian Saikhun. Somatic cell cloning in swamp buffalo (Bubalus bubalis) . Doctoral Degree(Anatomy). Mahidol University. : Mahidol University, 2004.
Somatic cell cloning in swamp buffalo (Bubalus bubalis)
การโคลนนิ่งโดยใช้เซลล์ร่างกายในกระบือ
Name: Jumnian Saikhun
LCSH:
Buffaloes
LCSH:
Cloining
LCSH:
Embryo transplantation
LCSH:
Somatic cells
Abstract:
Somatic cell nuclear transfer or cloning has been developed and successfully
used to produce cloned animals in many mammalian species. However, the knowledge
of somatic cell cloning in swamp buffalo has been extremely rare. The objective of
the present study was to establish an effective somatic cell cloning protocol for this
species. Buffalo and bovine oocytes obtained from abattoir ovaries were matured in
vitro and used for parthenogenetic activation, in vitro fertilization and nuclear transfer
experiments.
The results showed that calcium ionophore or ethanol used in combination
with 6-dimethylaminopurine effectively induces buffalo oocyte activation and
parthenogenetic development. The cleavage, blastocyst rate, and total number of cells
did not significantly differ in the four cell groups used: cumulus cells, fetal, calf and
adult fibroblast cells. Buffalo fetal fibroblasts can be successfully synchronized in the
quiescent G0/G1 phase of the cell cycle by serum starvation or roscovitine treatment
and in G1/S phase by aphidicolin treatment. The rates of blastocyst development of
embryos reconstructed with quiescent G0/G1 cells synchronized by serum starvation
were improved as compared to those derived from roscovitine and aphidicolin
treatments. The nuclear remodeling event of cloned embryos derived from serum
starved cells can occur in enucleated oocyte, mitotic division and can reach more
advanced stages faster than serum fed cells. Telomerase activity detection indicates the
successful reprogramming of telomerase activity in cloned embryos follow a similar
pattern as in embryos derived from in vitro fertilization and parthenogenetic
activation. The interspecies cloning experiments showed that the cytoplasm of
enucleated bovine oocyte has the ability to support the mitotic division of buffalo
somatic nuclei up to the blastocyst stage, and buffalo fetal fibroblasts can support the
in vitro development of interspecies cloned embryos after transfer to enucleated
bovine oocytes better than that of cumulus and oviductal cells.
These findings indicate that an effective somatic cell cloning protocol in
swamp buffalo was established in the present study and buffalo somatic cell nuclei can
be reprogrammed in enucleated bovine oocytes, resulting in the production of
interspecies cloned blastocysts.
Abstract:
การถ่ายฝากนิวเคลียสหรือโคลนนิ่งโดยใช้เซลล์ร่างกายเพื่อผลิตสัตว์โคลนนิ่งประสบความ
สำเร็จในสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมหลายชนิด อย่างไรก็ตาม การโคลนนิ่งโดยใช้เซลล์ร่างกายในกระบือยังมีราย
งานน้อยมาก วัตถุประสงค์ของการศึกษานี้ เพื่อพัฒนาวิธีที่เหมาะสมสำหรับการโคลนนิ่งในกระบือโดย
การนำเซลล์ไข่จากรังไข่ของกระบือและโคที่ได้จากโรงฆ่าสัตว์มาเพาะเลี้ยงให้สุกเพื่อใช้ในการวิจัยครั้งนี้
ด้วยการกระตุ้นให้แบ่งตัวเอง ทำปฏิสนธินอกร่างกายและทำการถ่ายฝากนิวเคลียส ผลการวิจัยพบว่า
แคลเซียมไอโอโนฟอร์ หรือ เอธานอล เมื่อใช้ร่วมกับ 6-dimethylaminopurine มีผลต่อการกระตุ้น
และการพัฒนาของเซลล์ไข่อย่างมีประสิทธิภาพ ตัวอ่อนโคลนนิ่งที่ได้จากการถ่ายฝากเซลล์คูมูลัส และ
เซลล์ไฟโบรบลาสจากทั้งลูกอ่อนกระบือ ลูกที่เกิดใหม่และกระบือโตเต็มวัย สามารถแบ่งตัวและพัฒนา
ถึงระยะบลาสโตซีสไม่แตกต่างกัน เซลล์ไฟโบรบลาสจากลูกอ่อนกระบือสามารถชักนำให้อยู่ในระยะ
G0/G1 ของวงจรชีวิตเซลล์โดยใช้วิธีลดซีรั่มในการเพาะเลี้ยง หรือ ใช้รอสโคไวติน และให้อยู่ในระยะ
G1/S โดยใช้ อะฟิดิโคลิน อัตราการพัฒนาถึงระยะบลาสโตซีสของตัวอ่อนโคลนนิ่ง โดยใช้เซลล์ที่ลดซี
รั่มสามารถพัฒนาถึงระยะบลาสโตซีสได้ดีกว่าการใช้เซลล์ที่ได้จากการใช้รอสโคไวตินและอะฟิดิโคลิน
การศึกษาการรีโมเดลของนิวเคลียสในตัวอ่อนโคลนนิ่งพบว่า เซลล์ที่ได้จากการลดซีรั่มสามารถเกิดการรี
โมเดลของนิวเคลียส แบ่งตัวและพัฒนาได้เร็วกว่าการใช้เซลล์ที่ไม่ได้ลดซีรั่ม การศึกษาการทำงานของ
เอนไซม์เทโลเมอเรส พบว่า การทำงานของเอนไซม์เทโลเมอเรสในตัวอ่อนโคลนนิ่ง คล้ายกับการทำงาน
ของเอนไซม์ในตัวอ่อนที่ได้จากการปฏิสนธินอกร่างกายหรือการกระตุ้นให้แบ่งตัวเอง นอกจากนี้การ
ศึกษาการโคลนนิ่งระหว่างสายพันธุ์พบว่า เซลล์ไข่โคสามารถชักนำให้เซลล์ร่างกายกระบือมีการแบ่งตัว
และพัฒนาจนถึงระยะบลาสโตซีสได้เช่นเดียวกับการใช้เซลล์ไข่กระบือ และการใช้เซลล์ไฟโบรบลาส
จากลูกอ่อน ในการโคลนนิ่งระหว่างสายพันธุ์โดยใช้เซลล์ไข่โคมีประสิทธิภาพในการผลิตตัวอ่อนโคลน
นิ่งได้ดีกว่าการใช้เซลล์คูมูลัสและเซลล์โอวิดัค
การวิจัยนี้ได้พัฒนาวิธีการการโคลนนิ่งในกระบืออย่างประสิทธิภาพและเซลล์ไข่โคสามารถใช้
ในการโคลนนิ่งข้ามสายพันธุ์โดยใช้เซลล์ร่างกายของกระบือได้
Mahidol University
Address:
NAKHON PATHOM
Email:
liwww@mahidol.ac.th
Name: Kanok Pavasuthipaisit
Role:
Thesis Advisors
Created:
2004
Modified:
2553-04-26
Issued:
2010-02-01
วิทยานิพนธ์/Thesis
application/pdf
ISBN:
9740445314
CallNumber:
TH J94s 2004
eng
DegreeName: Doctor of Philosophy
Level: Doctoral Degree
Descipline: Anatomy
Grantor: Mahidol University
©copyrights Mahidol University
RightsAccess:
ใช้เวลา
0.391347 วินาที
Jumnian Saikhun
| Title | Contributor | Type |
|---|---|---|
| Somatic cell cloning in swamp buffalo (Bubalus bubalis)
มหาวิทยาลัยมหิดล Jumnian Saikhun | Kanok Pavasuthipaisit | วิทยานิพนธ์/Thesis |
| Aspects of fresh, chilled and frozen of Asian elephant semen (Elephas maximus) and its clinical uses
มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์ Sitthavee Thongtipsiridech;Sittidet Mahasawangkul;Jumnian Saikhun;Kornchai Kornkaewrat;Piyawan Suthanmapinanth;Mayurachat Sa-ardrit;Chatchote Thitatram;Waroot Wongkalasinh;Pornsawan Pongsopavijitr;Taweepoke Angkawanish | มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์ คณะสัตวแพทยศาสตร์ | บทความ/Article |
| Sexing of in vitro produced bovine embryos by chromosome analysis
มหาวิทยาลัยมหิดล Jumnian Saikhun | Kanok Pavasuthipaisit Boonserm Poolsanguan Yindee Kitiyanant | วิทยานิพนธ์/Thesis |
Kanok Pavasuthipaisit