The molecular cause of loss of dengue virus infectivity in solution

สาเหตุในระดับโมเลกุลของการสูญเสียความสามารถในการทำให้ติดเชื้อของไวรัสไข้เลือดออกในสารละลาย

Name: Patchima Sithisarn

LCSH: Aggregation (Chemistry)

LCSH: Dengue viruses

LCSH: Electron microscopy

LCSH: Solution (Chemistry)

LCSH: Viruses

Abstract: The dengue virus is one of the mosquito-borne viruses, which is classified in the family Flaviviridae. The dengue viruses consist of four serotypes of Dengue 1 to 4 (DEN1 to 4). At present dengue viral disease is distributed throughout the world and has become one of the world’s health problems because of ineffective control of dengue vectors, no specific disease treatment and the absence of dengue vaccine. In a previous study of dengue virus behavior in solution, it was shown that the dengue virus lost its infectivity over time in an exponential decay and showed the difference between prototype strains of each dengue serotype. However, the molecular mechanism for the loss of dengue virus infectivity in solution is not known. Therefore, in this study the molecular mechanism of the loss of dengue virus infectivity in solution was investigated. Factors influencing the rate of the loss of dengue virus infectivity were determined from the difference in the rate and pattern of loss of dengue virus serotype 2 infectivity under various solution conditions by using the standard plaque assay and statistical analysis. In order to determine whether the structural integrity of the dengue virus particle is involved in the loss of dengue virus infectivity, the characteristics of the dengue virus particle in solution were determined by using TEM imaging and RT-PCR technique. The results showed that the rate of loss of dengue virus infectivity in solution was primarily determined by the pH and temperature of the viral solution. However, the mechanism for the loss of dengue virus infectivity is not involved in the loss of virus structural integrity, but rather with viral aggregation as shown by TEM images and PCR products of dengue viral RNA. The molecular mechanism for the loss of dengue virus infectivity in solution was proposed to be an irreversible conformational change of E protein, which caused dengue viral aggregation and loss of dengue virus infectivity in solution.

Abstract: ไวรัสไข้เลือดออก เป็นไวรัสในตระกูลฟลาวิวิริดีที่สามารถติดต่อผ่านทางยุง เนื่องจากการขาดประ สิทธิภาพในการควบคุมพาหะของโรค ไม่มีการรักษาที่จำเพาะเจาะจง และการขาดวัคซีนป้องกัน โรค จึงเป็นสาเหตุให้โรคไข้เลือดออกมีการระบาดไปทั่วโลกและถูกจัดเป็นหนึ่งในปัญหาสุขอนามัย โลกจากการศึกษาก่อนหน้าเกี่ยวกับพฤติกรรมของไวรัสไข้เลือดออกในสารละลายพบว่า ไวรัสมี การสูญเสียความสามารถในการทำให้ติดเชื้อเมื่อเวลาผ่านไปเป็นแบบทวีคูณ และการสูญเสียนี้มี ความแตกต่างกันระหว่างสายพันธุ์โปรโทไทป์ของเชื้อแต่ละซีโรไทป์ งานวิจัยนี้จึงจัดทำขึ้นเพื่อ ศึกษาถึงสาเหตุที่เป็นไปได้ในระดับโมเลกุลของการสูญเสียความสามารถในการทำให้ติดเชื้อของไว รัสไข้เลือดออกในสารละลาย จากการประเมินความแตกต่างของการสูญเสียการทำให้ติดเชื้อของไว รัสไข้เลือดออกซีโรไทป์ 2 ในสารละลาย ภายใต้สภาวะต่างๆ โดยวิธี Plaque assay มาตรฐาน และการประเมินผลทางสถิติ รวมทั้งเพื่อประเมินความเกี่ยวข้องของการสูญเสียอนุภาคไวรัสต่อการ สูญเสียความสามารถในการติดเชื้อ จึงได้ศึกษาคุณลักษณะของอนุภาคไวรัสไข้เลือดออกจากภาพ ถ่ายกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน และเทคนิค RT-PCR จากการศึกษาวิจัยพบว่า การสูญเสียความ สามารถในการทำให้ติดเชื้อของไวรัสไข้เลือดออกนั้น ขึ้นกับค่าความเป็นกรด-ด่างและอุณหภูมิของ สารละลาย และเป็นผลจากการจับกลุ่มของไวรัสในสารละลาย โดยไม่เกี่ยวข้องกับการสูญเสีย อนุภาคไวรัส จากผลการวิจัยดังกล่าวและการรวบรวมหลักฐานอ้างอิงสามารถสรุปได้ว่า การสูญเสีย ความสามารถในการทำให้ติดเชื้อของไวรัสไข้เลือดออกนั้น น่าจะมีสาเหตุมาจากการเปลี่ยนแปลง โครงสร้างโปรตีนเปลือกหุ้ม และทำให้เกิดการจับกลุ่มของไวรัสในสารละลาย

Mahidol University

Address: NAKHON PATHOM

Email: liwww@mahidol.ac.th

Name: Smith, Duncan R.

Role: Thesis Advisors

Created: 2003

Modified: 2553-02-08

Issued: 2009-12-24

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

ISBN: 9740436641

CallNumber: TH P294m 2003

eng

DegreeName: Master of Science

Level: Master's Degree

Descipline: Molecular Genetics and Genetic Engineering

Grantor: Mahidol University

©copyrights Mahidol University

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	4436442.pdf	5.61 MB	61	2018-05-29 01:58:33

ใช้เวลา

0.22824 วินาที