In vitro plant multiplication of Gynura procumbens and chemical analysis of regenerants

การขยายพันธุ์แป๊ะตำปึงโดยวิธีในหลอดทดลองและการวิเคราะห์ทางเคมีของกล้าเพาะเลี้ยง

Name: Yuwalak Phaidee

LCSH: Gynura procumbens Merr.

MeSH: Chromatography, High Pressure Liquid

MeSH: Organogenesis

MeSH: Plants, Medicinal

MeSH: Tissue Culture Techniques

Abstract: Gynura procumbens Merr. is widely used for the treatment of inflammation skin rash, rheumatism, and viral diseases of the skin in traditional medicine. There for, to increase the supply, in vitro direct and indirect shoot multiplication techniques were developed in this research. The effects of plant growth regulators (TDZ, BA, NAA, and 2,4-D), duration of culture, and explant types were investigated for multiple shoot induction via direct and indirect shoot organogenesis. Multiple shoots were directly induced from node explants cultured on MS with 9.08 μM TDZ for 6 weeks prior to transfer to culture on MS medium without plant growth regulator for 8 weeks. The maximum shoot regeneration rate was 202.50±20.75 shoots/responding explant with a response rate of 100%. An efficient protocol for indirect shoot induction of G. procumbens was culturing node explants on MS medium with 8.87 μM BA and 0.45 μM 2, 4-D for 8 weeks prior to transfer to culture on MS medium with 4.44 μM BA for 4 weeks and further culture on MS medium without plant growth regulator for 4 weeks. After the total of 16 weeks of culturing, maximum shoot induction rates of 71.28±18.11 shoots/responding explant with a responding rate of 100% were achieved. Indirect shoot organogenesis of leaf and internode explants was also obtained, however, with lower induction and response rates than those of node explants. Rooting was spontaneously revealed on MS medium without PGR. Rooted plantlets were successfully transferred to a mixture of sand and rice shell ash with 95% survival. The regenerants grew as normal under field conditions. The amounts of stigmasteryl and sitosteryl-3-O-β-D-glucopyranosides from 2-5 monthsold plant materials were between 0.42 to 0.74 mg/g dried weight (calculation based on stigmasteryl-3-O-β-D-glucopyranoside). The established protocols can be used as a guideline for the production of high quality plant material of Gynura procumbens for the herbal industry.

Abstract: การพัฒนาวิธีการขยายพันธุ์โดยวิธีในหลอดทดลองสำหรับแป๊ะตำปึง (Gynura procumbens) ซึ่งเป็นสมุนไพร ที่ใช้ในการรักษาอาการอักเสบ โรคไขข้อ ปวดกล้ามเนื้อ และติดเชื้อไวรัสผิวหนัง โดยวิธีกระตุ้นการสร้างยอด โดยตรงและกระตุ้นการสร้างยอดผ่านแคลลัส ทำการศึกษาผลของสารควบคุมการเจริญเติบโต (TDZ, BA, NAA, และ 2,4-D), ระยะเวลาการเพาะเลี้ยง และชนิดชิ้นส่วนพืช ต่อการกระตุ้นการสร้างยอดใหม่ ในการกระตุ้นการ สร้างยอดโดยตรงพบว่าชิ้นส่วนข้อของแป๊ะตำปึงที่วางเลี้ยงในอาหารสูตร Murashige and Skoog (MS) ที่เติม 9.08 μM TDZ นาน 6 สัปดาห์ แล้วย้ายเลี้ยงต่อในอาหารสูตร MS ที่ไม่มีสารควบคุมการเจริญเติบโต นาน 8 สัปดาห์ สร้างยอดเฉลี่ยมากที่สุด 202.50±20.75 ยอดต่อชิ้นส่วน และมีอัตราการตอบสนองต่อการสร้างยอด 100% สำหรับ การกระตุ้นการสร้างยอดโดยผ่านแคลลัสจากชิ้นส่วนข้อของแป๊ะตำปึงในอาหาร สูตร MS ที่เติม 8.87 μM BA ร่วมกับ 0.45 μM 2,4-D นาน 8 สัปดาห์ แล้วย้ายเลี้ยงต่อในอาหารสูตร MS ที่เติม 4.44 μM BA นาน 4 สัปดาห์ และอาหารสูตร MS ที่ไม่มีสารควบคุมการเจริญเติบโต อีก 4 สัปดาห์ จำนวนยอดเฉลี่ยสูงสุดคือ 71.28±18.11 ยอด ต่อชิ้นส่วน และมีอัตราการตอบสนองการสร้างยอด 100% ชิ้นส่วนใบและปล้องสามารถกระตุ้นให้สร้างยอด ใหม่ได้ด้วยวิธีเดียวกันนี้ แต่มีอัตราการสร้างยอดน้อยกว่าชิ้นส่วนข้อ ยอดใหม่ที่ได้สามารถสร้างรากได้เองเมื่อย้าย ลงในอาหารสูตร MS ที่ไม่มีสารควบคุมการเจริญเติบโต เมื่อย้ายกล้าเพาะเลี้ยงลงในวัสดุเพาะชำทรายและขี้เถ้า แกลบ ต้นกล้าเพาะเลี้ยงมีอัตรารอดสูงถึง 95% และเจริญเติบโตได้ตามปกติในสภาพแปลงปลูก เมื่อวิเคราะห์ ปริมาณของ stigmasteryl-3-O-β-D-glucopyranoside และ sitosteryl-3-O-β-D-glucopyranoside (Ga) ในกล้า เพาะเลี้ยงอายุ 2-5 เดือน โดยวิธี HPLC พบว่า ในผงแห้งของส่วนใบและลำต้น 1 กรัม มีปริมาณ Ga อยู่ระหว่าง 0.42-0.74 มิลลิกรัม (คำนวณจาก stigmasteryl-3-O-β-D-glucopyranoside) จากการวิจัยนี้สามารถกำหนด วิธีการขยายพันธุ์แป๊ะตำปึงโดยวิธีในหลอดทดลองสำหรับผลิตต้นกล้าจำนวนมากและสามารถนำไปใช้เพื่อการ ผลิตวัตถุดิบในอุตสาหกรรมยาสมุนไพรต่อไป

Mahidol University

Address: NAKHON PATHOM

Email: liwww@mahidol.ac.th

Name: Sompop Prathanturarug

Role: Thesis Advisors

Created: 2008

Modified: 2552-11-30

Issued: 2009-11-26

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

CallNumber: TH Y95i 2008

eng

DegreeName: Master of Science

Level: Master's Degree

Descipline: Plant Science

Grantor: Mahidol University

©copyrights Mahidol University

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	4837066.pdf	2.06 MB	68	2026-08-06 17:18:09

ใช้เวลา

-0.675258 วินาที