Abstract:
ผลการสำรวจและเก็บตัวอย่างเชื้อรา Bipolaris maydis สาเหตุโรคใบไหม้แผลเล็กของข้าวโพด (southerm corn leaf blight) จากแหล่งปลูกข้าวโพด 26 แห่ง ในพื้นที่ 19 จังหวัด ในปี 2542 และ 2543 เพื่อนำมาศึกษาความผันแปรด้านพันธุกรรมและความรุนแรงในการก่อให้เกิดโรค พบโรคใบไหม้แผลเล็กระบาดทุกแหล่งปลูก และสามารถแยกเชื้อบริสุทธิ์จากใบข้าวโพดที่เป็นโรคได้จำนวน 118 ไอโซเลท เมื่อนำเชื้อรา Bipolaris maydis มาศึกษาลักษณะทางสัณฐานวิทยาและสรีระวิทยาบนอาหาร potato dextrose agar พบว่ามีควมมผันแปรของลักษณะการเจริญของเส้นใยอาหาร ได้แก่ สีของโคโลนี ความสม่ำเสมอของสีทั้งโคโลนีความฟูของเส้นใย และการเกิดวงของสีโคโลนีและเส้นใย เมื่อนำเชื้อรา Bipolaris maydis มาศึกษาอัตราการเจริญเติบโตบนอาหาร PDA พบว่าเชื้อราจำนวน 39 ไอโซเลทที่คัดเลือกมาทดสอบมีอัตราการเจริญเติบโตของเส้นใยบนอาหารที่แตกต่างกันผลการทดสอบ mating tpye ของเชื้อรา Bipolaris maydis ทั้ง 118 ไอโซเลท บนอาหาร modified Sachs' medium (in vitro) พบ mating type ทั้งสองแบบ โดยมี mating tpye M1-1 จำนวน 50 ไอโซเลทและมี mating tpye M1-2 จำนวน 68 ไอโซเลท คิดเป็นร้อยละ 42.37 และ 57.63 ตามลำดับ ผลการทำ mating บนต้นข้าวโพด (in vivo) พบว่าไม่สามารถชักนำให้เกิดการสืบพันธุ์แบบอาศัยเพศบนใบข้าวโพด เมื่อนำเชื้อรา Bipolaris maydis จำนวน 21 ไอโซเลท ซึ่งเป็นตัวแทนจากแหล่งปลูกต่าง ๆ มาประเมินระดับความรุนแรงในการก่อให้เกิดโรคบนข้าวโพดสายพันธุ์แท้จำนวน 22 สายพันธุ์ พบว่ามีความผันแปรของระดับความรุนแรงในการก่อให้เกิดโรคของเชื้อแต่ละไอโซเลท โดยเชื้อแต่ละไอโซเลทมี virulent pattern ที่ไม่เหมือนกันผลการศึกษาความผันแปรทางพันธุกรรมของเชื้อรา Bipolaris maydis จำนวน 39 ไอโซเลท โดยใช้ข้อมูลลายพิมพ์ดีเอ็นเอที่ได้จากการวิเคราะห์ AFLP พบว่าลายพิมพ์ดีเอ็นเอของเชื้อรา Bipolaris maydis ส่วนใหญ่มีรูปแบบลายพิมพ์ดีเอ็นเอที่คล้ายกัน ยกเว้นบางไอโซเลท และเมื่อนำมาวิเคราะห์เพื่อจัดกลุ่มความสัมพันธ์ทางพันธุกรรมด้วยวิธี UPGMA (Dice's coefficient) ได้ dengrogram ที่แสดงให้เห็นว่าไอโซเลทของเชื้อรา Bipolaris maydis ค่อนข้างมีความใกล้ชิดทางพันธุกรรม Survey and collecting of the fungus Bipolaris maydis, the causal agent of southern corn leaf blight (SCLB), was conducted in 26 maize growing areas throughout 19 provinces in 1999 and 2000 and they were used for studying genetic and pathogenicity variation. The result suggested that SCLB has been found in almost maize growing areas. Pure culture of 118 isolates were collected and they were assessed for morphological and cultural characteristics variation on potato dextrose agar (PDA). The results showed variation among 118 isolates in colony colour, uniformity of colony colour, aerial mycelium growth and the zonationof colour and mycelium. Mycelial growth rate of 39 selected isolates of Bipolaris maydis was significantly different after growing the fungus on PDA.One hundred and eighteen isolates of Bipolaris maydis were investigated for mating type on modified Sach's medium (in vitro). Fifty isolates were classified to mating type M1-1 and 68 isolates were mating type M1-2, accounted for 42.37 and 57.63 percent respectively. Pairing of opposite mating type was done on maize plants (in vivo) and the result indicated that sexual reproduction has not been found. Twenty-one representative isolates were selected and evaluated for pathogenicity on 22 inbred lines of maize. Significant difference on pathogenicity was found among tested isolates and they showed no identical virulent pattern among them.Genetic variation among 39 isolates of Bipolaris maydis were investigated with DNA fingerprinting using amplified fragment length polymorphism (AFLP). The DNA fingerprints of tested isolates, excepted for some isolates, showed similar patterns. The dendrogram derived by cluster analysis using unweighted pair-group method using an arithmetic average (UPGMA) with Dice's similarity revealed close genetic relationship existed in Bipolaris maydis population.