การศึกษาคุณลักษณะของโปรตีนไฮโดรโฟบินในเห็ดทางการค้าและเห็ดป่าที่คัดเลือกได้จากประเทศไทย

Characterization of hydrophobins in selected commercial and wild mushrooms from Thailand

Name: วศภณ เฟื่องสวัสดิ์

ThaSH: มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์ -- วิทยานิพนธ์. วท.ม. (จุลชีววิทยา) 2560

Classification :.LCCS: QK609.T35

ThaSH: มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์. สาขาจุลชีววิทยา -- วิทยานิพนธ์

ThaSH: เห็ด

ThaSH: เห็ดที่เป็นอาหาร

ThaSH: ไฮโดรโฟบิน

Abstract: งานวิจัยนี้มีจุดมุ่งหมายในการคัดเลือกและประเมินความเหมาะสมเห็ดในท้องตลาด 12 ชนิดและเห็ดที่แยกได้จากธรรมชาติอีก 1 ชนิด เพื่อใช้ในการผลิตโปรตีนไฮโดรโฟบินโดยอาศัยการเปรียบเทียบความไม่ชอบน้ำของผิวหน้าโคโลนี ผลการคัดเลือกพบว่าเห็ดยานางิ (Agrocybe cylindracea) และเห็ดป่า Trametes maxima Unk14 ให้ค่าองศาน้ำสูงและใช้เวลาในการเพาะเลี้ยงสั้น โดยมีค่าองศาน้ำเป็น 134.7o±1.2 และ133.5o±2.9 ตามลำดับ สารสกัดไฮโดรโฟบินจากเห็ดทั้งสองให้ผลผลิตไฮโดรโฟบินเท่ากับ 6.42 และ3.85 มก. โปรตีน/กรัม เส้นใยแห้งตามลำดับ สารสกัดไฮโดรโฟบินของเห็ดทั้งสองประกอบด้วยโปรตีนที่มีขนาดในช่วง 8.0 - 25.0 kDa และ 6.6-21.5 kDa ตามลำดับ นอกจากนี้ ในสารสกัดไฮโดรโฟบินจำกัดอกเห็ดยานางิให้ผลผลิตไฮโดรโฟบินที่สูงและตรวจพบแถบโปรตีนหลายแถบที่คาดว่าเป็นโปรตีนไฮโรโฟบิน เมื่อเคลือบพื้นผิวแผ่น Teflon ด้วยสารสกัดหยาบไฮโดรโฟบินที่ได้พบว่าสามารถปรับเปลี่ยนคุณสมบัติ พื้นผิวจากไม่ชอบน้ำเป็นชอบน้ำได้อย่างมีนัยสำคัญ (p<0.05) ในขณะเดียวกันก็เพิ่มค่าองศาน้ำของกระจกสไลด์ที่ชอบน้ำได้จนเกือบเปลี่ยนเป็นไม่ชอบน้ำ เป็นที่น่าสนใจว่าสารสกัดหยาบไฮโดรโฟบินจากอาหารเลี้ยงเชื้อเห็ดยานางิแสดงคุณสมบัติการเป็นอิมัลซิไฟเออร์เมื่อนำไปผสมกับเฮกเซน และสามารถลดค่าแรงตึงผิวของ 60% ethanol และน้ำ deionized ได้อย่างมีนัยสำคัญเมื่อนำแถบโปรตีนที่แสดงคุณสมบัติของโปรตีนไฮโดรโฟบินขนาดประมาณ 8 kDa มาวิเคราะห์ ด้วยเทคนิค LC-MS/MS พบว่ามีชิ้นส่วนโปรตีนชิ้นหนึ่งที่มีลำดับกรดอะมิโนคล้ายคลึงกับไฮโดรโฟบิน class I ที่พบในเชื้อรากลุ่ม Basidiomycetes เมื่อพิจารณาจากผลการทดลองทั้งหมด งานวิจัยนี้ประสบความสำเร็จในการผลิตและสกัดโปรตีนที่แสดงคุณสมบัติของโปรตีนไฮโดรโฟบินจากอาหารเลี้ยงเชื้อเห็ดยานางิ เห็ดยานางิถือเป็นตัวเลือกที่เหมาะสมในการผลิตไฮโดรโฟบิน The aims of this study were to screen and evaluate of 12 commercial and 1 wild mushrooms from Thailand for hydrophobin production based on their colony surface hydrophobicities. One commercial mushroom, Yanagi mutsutake (Agrocybe cylindracea), and one wild mushroom, Trametes maxima Unk14 were selected due to their high water contact angles (WCA) of colony surfaces and short cultivation periods. WCA values of colony surfaces of A. cylindracea and T. maxima Unk14 were 134.7o ± 1.2 and 135.5o ± 2.9, respectively. The yields of extracted hydrophobin of A. cylindracea and T. maxima Unk14 were 6.42 and 3.85 mg protein/g dried mycelia weight, respectively. The putative hydrophobins of A. cylindracea and T. maxima Unk14 were approximately in the range of 8.0-25.0 and 6.6-21.5 kDa, respectively. Additionally, high yield and multiple protein bands of putative hydrophobin were observed in the fruiting body of A. cylindracea. Coating of crude hydrophobin extracts significantly (p < 0.05) converted surface property of Teflon from hydrophobic to hydrophilic whereas increased hydrophobicity of glass slide surface from hydrophilic to nearly hydrophobic. Promisingly, crude hydrophobin extracts from culture media of A. cylindrace showed the emulsifying activity when mixed with hexane and significantly reduced surface tension of 60% ethanol and deionized water. When the 8.0 kDa putative hydrophobin band from the crude extract was analyzed using LC-MS/MS technique, one of protein fragments showing a amino acid sequence similarity to class I hydrophobin proteins from Basidiomycetes was observed. Taken together, we successfully produced and extracted the putative hydrophonin of A. cylindracea from culture medium. Yanagi mutsutake could be a good candidatefor hydrophobin production.

มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์. สำนักหอสมุด

Address: กรุงเทพมหานคร

Email: tdckulib@ku.ac.th

Name: เจษฎา โพธิรัตน์

Role: อาจารย์ที่ปรึกษาวิทยานิพนธ์หลัก

Name: ชุรภา ธีรภัทรสกุล

Role: อาจารย์ที่ปรึกษาวิทยานิพนธ์ร่วม

Created: 2560

Modified: 2566-05-11

Issued: 2566-05-11

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

URL: https://kasetsart.idm.oclc.org/login?url=https://www.lib.ku.ac.th/KUthesis/2560/wasapon-fua-all.pdf

CallNumber: QK609.T35.ว18

tha

DegreeName: วิทยาศาสตรมหาบัณฑิต

Level: ปริญญาโท

Descipline: จุลชีววิทยา

Grantor: มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์

©copyrights มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	wasapon-fua-all.pdf	20.5 MB

ใช้เวลา

0.0373 วินาที