การตรวจหาเชื้อ Brucella melitensis โดยวิธี Real-time PCR และวิธีการเพาะแยกเชื้อจากตัวอย่างอวัยวะของแพะเนื้อในประเทศไทย

Detection of Brucellamelitensis using real-time PCR isolation from organs of meat goat in Thailand

Name: ลัขณา รามริน

ThaSH: มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์ -- วิทยานิพนธ์. วท.ม. (จุลชีววิทยาทางการสัตวแพทย์) 2560

Classification :.LCCS: SF969.B78

ThaSH: มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์. สาขาจุลชีววิทยาทางการสัตวแพทย์ -- วิทยานิพนธ์

ThaSH: บรูเซลโลซิสในแพะ

ThaSH: แพะ -- โรคเกิดจากเชื้อไวรัส

Abstract: Brucella melitensis เป็นสาเหตุหลักของโรคบรูเซลโลสิสในแพะ ทำให้แพะเกิดการแท้งลูก และผลผลิตลดลง นอกจากนี้โรคบรูเซลโลสิสยังเป็นโรคติดต่อระหว่างสัตว์และคนที่สำคัญ วิธี มาตรฐานสำหรับการชันสูตร โรคบรูเซลโลสิสคือวิธีการเพาะแยกเชื้อ แต่เชื้อบรูเซลลาเป็นเชื้อที่ ก่ออันตรายต่อผู้ปฏิบัติงาน และต้องใช้เวลานานในการวิเคราะห์ ดังนั้นงานวิจัยครั้งนี้มีวัตถุประสงค์ เพื่อประเมินความสามารถวิธีการตรวจหาเชื้อ B. melitensis โดยวิธี Real-time PCR เปรียบเทียบ กับวิธีการเพาะแยกเชื้อ โดยเก็บตัวอย่างอวัยวะจากแพะเนื้อในประเทศไทยที่ให้ผลบวกทางซีรัมวิทยา ได้แก่ liver spleen mammary/inguinal lymph node mandibular lymph node popliteal lymph node parotid lymph node pre-femoral lymph node และpre-scapular lymph node ทั้งหมด 40 ตัวจำนวน 320 ตัวอย่างโดย่ primers และprobe ที่ใช้มีความจำเพาะต่อยีน IS711ของเชื้อบรูเซลลา ผลการศึกษาพบว่า จากตัวอย่างแพะเนื้อจำนวน 40 ตัว วิธี Real-time PCR มีค่าความไวร้อยละ 100 ค่าความจำเพาะร้อยละ 66.67 และค่าความถูกต้องร้อยละ 77.50 และตัวอย่างอวัยวะแพะเนื้อจำนวน 320 ตัวอย่างวิธี่ Real-time PCR มีค่าความไวร้อยละ 92.45 ค่าความจำเพาะร้อยละ 92.88 และค่าความถูกต้องร้อยละ 92.81 ความเข้มข้นของดีเอ็นเอต่ำสุดที่วิธี Real-time PCR สามารถวิเคราะห์ได้ คือ 2 เฟมโตกรัม ไม่มีปฏิกิริยาข้ามกับแบคทีเรียชนิดอื่น ดังนั้นวิธี Real-time PCR สามารถนำมา ใช้ในการตรวจหาเชื้อบรูเซลลาที่มีความไว ความจำเพาะ รวดเร็ว และปลอดภัย Brucella melitensis is the most prevalent causative agent of goat brucellosis: one of the most important zoonotic diseases related to the abortion and reproductive losses. Conventional culture method is considered the gold standard for brucellosis diagnosis. However, this method is hazardous, labor-intensive and time-consuming. Therefore, the present study aims to evaluate an efficiency of Real-time PCR diagnosis method: the more convenient and less time consuming method by comparing to culture method. Total forty meat goats 320 samples of liver, spleen, mammary/inguinal lymph node, mandibular lymph node, popliteal lymph node, parotid lymph node, pre-femoral lymph node and pre-scapular lymph node were collected from seropositive meat goats in Thailand. Primer and probe specific for the insertion sequence (IS711) gene of B. melitensis were used. The results showed that, real-time PCR assay contains 100% sensitivity, 66.67% specificity and 77.50% accuracy from forty meat goats. Real-time PCR assay contains 92.45% sensitivity, 92.88% specificity and 92.81% accuracy from 320 samples. The limit of detection (LoD) of Real-time PCR assay is 2 femtogram (fg) with no cross reactions with other pathogens. In conclusion, real-time PCR assay is sensitivity and specificity method for the rapid and safe detection of Brucella organisms.

มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์. สำนักหอสมุด

Address: กรุงเทพมหานคร

Email: tdckulib@ku.ac.th

Name: องอาจ เลาหวินิจ

Role: อาจารย์ที่ปรึกษาวิทยานิพนธ์หลัก

Created: 2560

Modified: 2566-05-09

Issued: 2566-05-09

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

URL: https://kasetsart.idm.oclc.org/login?url=https://www.lib.ku.ac.th/KUthesis/2560/luckana-ram-all.pdf

CallNumber: SF969.B78.ล111

tha

DegreeName: วิทยาศาสตรมหาบัณฑิต

Level: ปริญญาโท

Descipline: จุลชีววิทยาทางสัตวแพทย์

Grantor: มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์

©copyrights มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	luckana-ram-all.pdf	2.08 MB	4	2024-12-06 15:02:16

ใช้เวลา

0.031051 วินาที