การหาภาวะที่เหมาะสมในการนำพลาสมิดเข้าสู่ Escherichia coli สายพันธุ์ HB101 ด้วยอุปกรณ์อิเล็กโทรพอเรชัน

Optimization for plasmid transformation in Escherichia coli HB101 by using electroporation system

Name: วรพันธ์ บุญชัย

ThaSH: พลาสมิด

ThaSH: เอสเคอริเคียโคไล

Abstract: ในงานวิจัยนี้ได้ทำการศึกษาการทรานสฟอร์เมชันโดยวิธีอิเล็กโทรพอเรชัน ระหว่าง E. coli สายพันธุ์ HB101 กับ พลาสมิด pUC18 และ pBR 322 โดยใช้เครื่องอิเล็กโทรพอเรชันที่ให้กำเนิดคลื่นรูปพัลส์ที่ลดลงแบบเอกซ์โพเนนเซียลที่ประดิษฐ์ขึ้น ทำการศึกษาโดยแปรปัจจัยทางเคมีของสารละลายที่ใช้ในกระบวนการอิเล็กโทรพอเรชันได้แก่ ความเข้มข้นของสารละลาย อิออนในสารละลายและ ปัจจัยทางไฟฟ้า ได้แก่ ความเข้มสนามไฟฟ้า จำนวนครั้งการกดกระตุ้น จากการศึกษาพบว่า ภาวะที่เหมาะสมสำหรับการทรานสฟอร์เมชันโดยวิธีอิเล็กโทรพอเรชันระหว่าง E. coli สายพันธุ์ HB101 กับพลาสมิด pUC18 และ pBR 322 คือ ผสมสารแขวนลอยเซลล์ กับสารละลายกลีเซอรอลความเข้มข้น 80 % ในอัตราส่วน 1 : 6 (กลีเซอรอลความเข้มข้นสุทธิเท่ากับ69.8 %) ปริมาตร 100 µ∣ และสนามไฟฟ้าความเข้ม 4 kV /cm จำนวนครั้งการกดกระตุ้น 1 ครั้ง ได้ประสิทธิภาพการทรานสฟอร์เมชันเท่ากับ 5.93 x 10⁴ t/µɡ pUC18 และ 5 x 10³ t/µɡ pBR 322

จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย. สำนักงานวิทยทรัพยากร

Address: กรุงเทพมหานคร

Email: cuir@car.chula.ac.th

Name: มานะ ศรียุทธศักดิ์

Role: ที่ปรึกษา

Name: ไพเราะ ปิ่นพานิชการ

Role: ที่ปรึกษาร่วม

Created: 2540

Modified: 2564-09-14

Issued: 2564-05-29

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

URL: http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/56976

tha

DegreeName: วิทยาศาสตรมหาบัณฑิต

Level: ปริญญาโท

Descipline: เทคโนโลยีชีวภาพ

Grantor: จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย

©copyrights จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	Warrapan_bo_TDC.pdf	6.27 MB

ใช้เวลา

0.036681 วินาที