Development of leptospirosis vaccine by using the combination of LipL32 and Loa22 antigens and immunization in a heterologous prime-boost regimen

การพัฒนาวัคซีนสำหรับโรคเลปโตสไปโรซิสโดยใช้แอนติเจน LipL32 ร่วมกับแอนติเจน Loa22 และให้ในรูปแบบ heterologous prime-boost

Name: Supawadee Umthong

ThaSH: Vaccines

ThaSH: Antigens

ThaSH: Leptospirosis

Abstract: Leptospirosis is a zoonotic disease caused by infection with pathogenic leptospira bacteria which comprise more than 250 serovars. This research aimed at developing vaccine by combining two antigens which are LipL32 and Loa22 as a vaccine and using a heterologous prime-boost regimen for immunization. The immunization was performed by priming with DNA vaccine encapsulated in chitosan (CS) nanoparticle which was used as a DNA delivery system and boosting with LipL32 and Loa22 recombinant proteins. CS was able to deliver DNA plasmid harboring lipL32 and loa22 and resulted in the expression of both genes in transfected HEK293T cell line. The study in mice showed that using the DNA vaccine encoding lipL32-loa22 genes in the same plasmid was better in stimulating antibody production than using co-administration of lipL32 and loa22 in different plasmids. Combination of two antigens for immunization provided neither synergistic nor antagonistic effect in induction of immune response including antibodies, lymphoproliferation, and cytokines production, compared with when using a single antigen. Therefore, combination of LipL32 and Loa22 and heterologous prime-boost regimen has potentials for further development which should be tested in an animal model of leptospirosis.

Abstract: เลปโตสไปโรซิสเป็นโรคติดต่อจากสัตว์สู่คน เกิดจากการติดเชื้อแบคทีเรียเลปโตสไปรา ชนิดก่อโรค ซึ่งมีความหลากหลายมากกว่า 250 ซีโรวาร์ งานวิจัยนี้มีวัตถุประสงค์ในการพัฒนาวัคซีนโดยใช้แอนติเจนสองชนิด คือ LipL32 และ Loa22 ร่วมกันเป็นวัคซีน และให้ในรูปแบบ heterologous prime-boost โดยให้วัคซีนครั้งแรก (prime) ในรูปของดีเอ็นเอวัคซีนที่บรรจุในอนุภาคนาโนไคโตซานซึ่งใช้เป็นระบบนำส่งดีเอ็นเอเข้าสู่เซลล์ และกระตุ้น (boost) ในรูปของ รีคอมบิแนนท์โปรตีนของ LipL32 และ Loa22 พบว่าอนุภาคนาโนไคโตซานสามารถนำส่ง ดีเอ็นเอพลาสมิดที่มียีน lipL32 และ loa22 ทำให้มีการแสดงออกของยีนทั้งสองในเซลล์ไลน์ HEK293T ที่ได้รับการทรานสเฟคชัน ผลจากการปลูกภูมิคุ้มกันในหนูไมซ์ พบว่าการใช้ พลาสมิดนี้เป็นดีเอ็นเอวัคซีนที่มียีน lipL32 ร่วมกับ loa22 ในพลาสมิดเดียวกันให้ประสิทธิภาพในการกระตุ้นการสร้างแอนติบอดีได้ดีกว่าการใช้ดีเอ็นเอวัคซีนที่มีพลาสมิดของสองยีนแยกกันแต่ให้ร่วมกัน อีกทั้ง การใช้สองแอนติเจนร่วมกันในการปลูกวัคซีนไม่ได้ส่งผลเสริมกันหรือหักล้างกันในการกระตุ้นภูมิคุ้มกันทั้งในการสร้างแอนติบอดี การเพิ่มจำนวนของทีลิมโฟซัยท์และการหลั่ง ไซโตไคน์ เมื่อเปรียบเทียบกับการใช้เพียงแอนติเจนเดียว ดังนั้น การใช้แอนติเจน LipL32 และ Loa22 ร่วมกันและให้ในรูปแบบ heterologous prime-boost จึงมีศักยภาพในการนำไปศึกษาในสัตว์ทดลองที่เป็นแบบจำลองของโรคต่อไป

Chulalongkorn University. Office of Academic Resources

Address: BANGKOK

Email: cuir@car.chula.ac.th

Name: Tanapat Palaga

Role: advisor

Name: Kanitha Patarakul

Role: advisor

Created: 2012

Modified: 2020-06-26

Issued: 2020-06-26

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

URL: http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/51924

eng

DegreeName: Master of Science

Level: Master's Degree

Descipline: Medical Microbiology

Grantor: Chulalongkorn University

©copyrights Chulalongkorn University

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	supawadee_um.pdf	3.14 MB

ใช้เวลา

0.032028 วินาที