The protective role of epstein-barr virus (EBV) - specific cytotoxic T lymphocytes in immunocompromised hosts with EBV infection

บทบาทของ Epstein-Barr Virus (EBV)-Specific Cytotoxic T Lymphocytes ต่อการควบคุมการติดเชื้อ EBV ในผู้ป่วยภูมิคุ้มกันบกพร่อง

Name: Patcha Incomserb

LCSH: Epstein-Barr virus -- Infections

LCSH: Immunological deficiency syndromes

LCSH: T cells

Abstract: Epstein-Barr virus (EBV)-specific cytotoxic T lymphocytes (CTL) play protective role in the pathogenesis of EBV infection. In the present study, the EBV-specific CTL responses in healthy donors and HIV-infected patients were investigated by vaccinia-based ELISpot assay. Furthermore, the correlations between EBV viral load and CD8⁺ T cell responses against various EBV proteins were analysed. Moreover, the feasibility to established EBV-CTL from either patients or healthy controls was studied. To evaluated cell-associated EBV DNA, EBNA-1 based real-time PCR was developed. The assay showed high sensitivity (as few as 10 copies could be detected), specificity (no cross-amplification of other Herpesviruses was demonstrated) and reproducibility (inter- and intra-assay variations within a 0.5-logl0- difference range). Quantitative of EBV-DNA revealed that EBV viral load in HIV-infected patients was significantly higher than that in healthy donors (P<0.05). On the other hand, the study of EBV-specific CTL responses showed that E BNA-3 family was the I mmunodominant protein which could be recognised by both healthy donors and HIV-infected patients. Indeed, EBNA-3b was the most immunodominant followed by EBNA-3a and EBNA-3c. The number of EBV proteins recognised was lower in HIV-infected patients than in control. This study clearly confirmed the importance of EBV-specific T cell responses in controlling EBV infection. However, the detailed study involving larger sample size may be needed to elucidate the correlate of protective immunity to EBV infection.

Abstract: Epstein-Barr virus (EBV)-specific cytotoxic T lymphocytes (CTL) มีบทบาทสำคัญในการควบคุมการ ติดเชื้อ EBV ในการวิจัยนี้จึงทำการศึกษาการตอบสนองของ CTL ที่จำเพาะต่อเชื้อ EBV ในคนปกติและในผู้ป่วยเอดส์ ที่ติดเชื้อ EBV และศึกษาความสัมพันธ์ระหว่างปริมาณไวรัสและการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันของ EBV-specific CD8⁺ T cell ต่อ โปรตีนของไวรัส ด้วยวิธี vaccinia-based ELISpot assay นอกจากนี้เราศึกษาความเป็นไปได้ในการสร้าง CTL ที่มีความจำเพาะต่อเชื้อ EBV (EBV-CTL) จากผู้ติดเชื้อ HIV และคนปกติ ในการวัดปริมาณไวรัส EBV เราได้การพัฒนาการตรวจด้วยวิธี real-time PCR ขึ้นมา และพบว่าวิธีที่พัฒนาขึ้นมานี้มีทั้งความไว (sensitivity) ความจำเพาะ (specificity) และความถูกต้องแม่นยำ โดยสามารถตรวจวัดปริมาณ EBV-DNA ได้อย่างน้อย 10 copies และไม่พบการเพิ่มจำนวนสารพันธุกรรมข้ามสายพันธุ์ (cross amplification) ของเชื้อไวรัสที่อยู่ในกลุ่ม Herpeseviruses ด้วยกัน นอกจากนี้เมื่อทำการหาปริมาณ EBV-DNA จากกลุ่ม ผู้ติดเชื้อ HIV และคนปกติ พบว่าในผู้ติดเชื้อ HIV มีปริมาณไวรัสมากกว่าในคนปกติอย่างมีนัยสำคัญ (P<0.05) และ จากการศึกษาการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันของ EBV-specific CD8⁺ T cell ต่อโปรตีนของไวรัส แสดงให้เห็นว่าโปรตีน กลุ่ม EBNA-3 เป็นโปรตีนที่มีการตอบสนองของ T เซลล์มากที่สุด โดย EBNA-3b มีการตอบสนองสูงสุดตามมาด้วย EBNA-3a และ EBNA-3C อย่างไรก็ตามเมื่อแยกพิจารณาการตอบสนองของ T cell จากกลุ่มคนปกติและกลุ่มผู้ป่วย พบว่าในกลุ่มคนปกติมีการตอบสนองต่อ EBV proteins หลากหลายชนิดกว่ากลุ่มผู้ป่วย นอกจากนี้ยังพบอีกว่าในกลุ่ม ผู้ป่วยนั้นมีการลดลงของการตอบสนองของ T cell ต่อ EBV อย่างเห็นได้ชัด จากการศึกษานี้แสดงให้เห็นถึงความสำคัญของ EBV-CTL ต่อการควบคุมการติดเชื้อ EBV ในผู้ติดเชื้อ HIV แต่อย่างไรก็ตามการสรุปว่ากลไกทางภูมิคุ้มกันส่วนใดจะเป็นประโยชน์ต่อการป้องกัน และควบคุมการติดเชื้อ EBV อาจจะทำไม่ได้จนกว่าจะมีการศึกษาเพิ่มเติมในประชากรกลุ่มใหญ่กว่านี้

Chulalongkorn University. Office of Academic Resources

Address: BANGKOK

Email: cuir@car.chula.ac.th

Name: Pokrath Hansasuta

Role: advisor

Name: Pavapan Bhattarakosol

Role: advisor

Name: Wanla Kulwichit

Role: advisor

Created: 2004

Modified: 2560-08-18

Issued: 2017-06-28

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

URL: http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/23414

ISBN: 9745312487

eng

DegreeName: Master of Nursing Science

Level: Master's Degree

Descipline: Medical Microbiology

Grantor: Chulalongkorn University

©copyrights Chulalongkorn University

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	Patcha_in_front.pdf	4.09 MB	1	2018-06-08 20:15:21
2	Patcha_in_ch1.pdf	712.89 KB	1	2018-06-08 20:15:23
3	Patcha_in_ch2.pdf	277.98 KB	1	2018-06-08 20:15:24
4	Patcha_in_ch3.pdf	12.7 MB	1	2018-06-08 20:15:25
5	Patcha_in_ch4.pdf	6.51 MB	1	2018-06-08 20:15:29
6	Patcha_in_ch5.pdf	15.83 MB	1	2018-06-08 20:15:30
7	Patcha_in_ch6.pdf	1.84 MB	1	2018-06-08 20:15:33
8	Patcha_in_back.pdf	8.64 MB	1	2018-06-08 20:15:34

ใช้เวลา

0.049869 วินาที