Effects of curcumin on in vitro invasion of human cholangiocarcinoma cell lines

ผลของสารเคอร์คิวมินที่มีต่อการบุกรุกและแพร่กระจายของเซลล์มะเร็งท่อน้ำดีในคน

Name: Kanittha Sangkachantaranon

LCSH: Metastasis -- Treatment

LCSH: Microbial invasiveness

MeSH: Cholangiocarcinoma

MeSH: Curcumin

Abstract: Curcumin (Diferuloylmethane), a yellow pigment from the rhizome of Curcuma longa Linn (Khamin Chan), has been widely used in the South and Southeast Asian cosmetic and cookery for centuries. Curcumin is well known for its anti-oxidant, anti-inflammatory and anti-carcinogenic properties. Recently, it has been shown to exhibit anti-metastatic activities against several cancer cell types. In this research, the anti-metastatic property of curcumin was examined by using human cholangiocarcinoma cell lines (CCA) developed from Thai patients, KKU-100, KKU-213 and HuCCA-1 as models. In this study, the effects of curcumin on cell cytotoxicity and proliferation were determined by MTT assay. Effects on in vitro invasion and motility were determined by using Transwell assay. Gelatinase and uPA activities of the cancer cells were assayed using Gelatin zymography. ERK1/2 phosphorylation in response to curcumin treatment was determined by using western blot and immunofluorescence labeling. Effects of curcumin on the actin cytoskeleton were assayed by immunofluorescence using Rhodamine-Phalloidin staining. The data showed that, treatment with non-toxic concentrations of curcumin resulted in a dose-dependent reduction of proliferation, in vitro invasion, motility, gelatinase and uPA activities of the three cell lines. This is accompanied by alterations of actin organization and cells morphology, although there is no effect on chromatin condensation as determined by DAPI staining. Upon curcumin treatment, ERK1/2 phosphorylation is activated, which can be suppressed by a MEK1 inhibitor, PD98059. These findings suggest that curcumin suppressed invasiveness of cancer cells at non-toxic doses by inhibiting motility, and gelatinase and uPA activities, but not adhesiveness. The inhibitory effects of curcumin on in vitro invasion and motility are associated with functional alteration in cytoskeletal organization. Curcumin-mediated inhibition of in vitro invasion is accompanied by an increase in ERK1/2 phosphorylation, but it is unlikely that this increase is responsible for suppression of invasiveness of the cancer cells.

Abstract: สารเคอร์คิวมิน (ไดเฟอรูโลอิลมีเทน) เป็นสารสีเหลืองที่พบมากในรากของต้นขมิ้นชัน โดยทั่วไป แล้วมักจะถูกใช้ในเครื่องสำอางหรือ เครื่องปรุงอาหารในแถบเอเชียใต้ และเอเชียตะวันออกเฉียงใต้ เคอร์คิวมิ นถูกพบว่าเป็นสารที่มีคุณสมบัติ ต่อต้านสารอนุมูลอิสระ, ต่อต้านการอักเสบ และต่อต้านการก่อมะเร็ง นอกจากนี้ยังพบว่าเคอร์คิวมินสามารถที่จะยับยั้งการแพร่กระจายของเซลล์มะเร็งได้หลายชนิด ในที่นี้เราได้ ทำการศึกษาคุณสมบัติของสารเคอร์คิวมินที่มีต่อการยับยั้งการบุกรุกและแพร่กระจายของเซลล์มะเร็งท่อน้ำดี ที่ได้พัฒนามาจากคนไข้ในประเทศไทย ได้แก่ KKU-100, KKU-213 และ HuCCA-1 ในการวิจัยนี้ ศึกษาผลของสารเคอร์คิวมินที่มีต่อการเป็นพิษ หรือการเจริญเติบโตของเซลล์โดยวิธี MTT assay ศึกษาผลของสารเคอร์คิวมินที่มีต่อการบุรุกและการเคลื่อนที่ของเซลล์โดยวิธี Transwell assay ศึกษาผลของสารเคอร์คิวมินที่มีต่อการทำงานของเอนไซม์ Gelatinase และ uPA โดยวิธี Gelatin zymography ศึกษาผลของสารเคอร์คิวมินที่มีต่อ ERK1/2 phosphorylation โดยวิธี Western blot และ Immunofluorescence labeling และศึกษาผลของสารเคอร์คิวมินที่มีต่อ Actin cytoskeleton โดยการย้อมสี Rhodamine-Phalloidin ผลของการวิจัยนี้พบว่า ที่ความเข้มข้นของเคอร์คิวมินที่ไม่เป็นพิษต่อเซลล์ สามารถลดอัตราการ เจริญเติบโต, การบุกรุก, การเคลื่อนที่ และการทำงานของเอนไซม์ Gelatinase และ uPA ในเซลล์มะเร็ง ท่อน้ำดีทั้งสามชนิดได้ ในขณะเดียวกันก็เกิดควบคู่ไปกับการเปลี่ยนแปลงของ Actin organization และ Cells morphology แต่อย่างไรก็ตามกลับพบว่าไม่มีผลต่อการเกิด Chromatin condensation ที่ ศึกษาโดยวิธีการย้อมด้วยสาร DAPI ในขณะที่มีการเลี้ยงเซลล์ด้วยสารเคอร์คิวมินพบว่า กระตุ้นการเกิด ERK1/2 phosphorylation ซึ่งสามารถถูกยับยั้งได้ด้วย MEK1 inhibitor หรือ PD98059 ในงานวิจัยนี้สรุปได้ว่า ความเข้มข้นของสารเคอร์คิวมินที่ไม่เป็นพิษต่อเซลล์มะเร็ง สามารถยับยั้ง การบุกรุกและแพร่กระจายของเซลล์มะเร็งได้ โดยการยับยั้งการเคลื่อนที่ รวมไปถึงการทำงานของเอนไซม์ Gelatinase และ uPA โดยที่ไม่มีผลต่อการยึดเกาะพื้นผิวของเซลล์ ซึ่งผลของการยับยั้งการบุกรุกและ แพร่กระจายของเซลล์มะเร็งโดยสารเคอร์คิวมินนี้เนื่องมาจากการเปลี่ยนแปลงการจัดเรียงตัวของ Cytoskeletal นอกจากนี้ยังพบว่าการที่สารเคอร์คิวมินกระตุ้นให้เกิดการทำงานของ ERK1/2 phosphorylation นั้นไม่ได้มีส่วนเกี่ยวข้องกับการที่สารเคอร์คิวมินยับยั้งการบุกรุกแพร่กระจายของ เซลล์มะเร็งท่อน้ำดีทั้งสามชนิดนี้แต่อย่างใด

Mahidol University

Address: NAKHON PATHOM

Email: liwww@mahidol.ac.th

Name: Rutaiwan Tohtong

Role: Thesis Advisors

Created: 2006

Modified: 2553-06-14

Issued: 2010-06-01

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

ISBN: 9740470483

CallNumber: TH K16e 2006

eng

DegreeName: Master of Science

Level: Master's Degree

Descipline: Biochemistry

Grantor: Mahidol University

©copyrights Mahidol University

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	4536155.pdf	4.2 MB	43	2025-09-15 10:49:30

ใช้เวลา

-0.559329 วินาที