The study of serotypes and virulence genes of vibrio parahaemolyticus in healthy carriers at frozen seafood plants

การศึกษาซีโรไทป์และยีนที่ควบคุมการก่อโรคของวิบริโอพาราฮีโมลัยติกัสในพาหะในโรงงานอาหารทะเลแช่แข็ง

Name: Thanuncha Athajariya

MeSH: Carriers

MeSH: Polymerase Chain Reaction

MeSH: Serotyping

MeSH: Vibrio parahaemolyticus

MeSH: Virulence

Abstract: Many studies show that Vibrio parahaemolyticus can be detected from healthy contacts of diarrheal patients, villagers living near the sea, and healthy employees from seafood processed plants without showing any symptom of diarrhea. The carrier state of these healthy carriers who harbour V. parahaemolyticus has not been characterized. In this research, serotypes and virulence genes of V. parahaemolyticus were studied in 10,214 rectal swab samples from healthy workers of the frozen seafood plant and frozen processed seafood plant at Samut Prakan province during July 2002 to August 2003. V. parahaemolyticus was found in 147 samples (1.4%) from 139 healthy workers throughout the year. Heiberg’s type VII and type V of V. parahaemolyticus were found in 64% and 18% of the samples, respectively. The isolates from another 18% of the samples tested positive for both Heiberg types. A total of 64 O:K serotypes were identified among 999 isolates of V. parahaemolyticus from 147 positive samples, with O1:KUT (untypable) which was the most dominant serotype (11.9%), followed by O5:KUT (11.5%), O10:KUT (8.0%) and O11:KUT (7.1%). Only 1.7% of 999 isolates produced both thermostable direct hemolysin (TDH) and urease enzyme (TRH), whereas 32.8% of isolates produced only TDH and 8% produced only urease enzyme. Furthermore, 269 of 999 isolates were selected on the basis of their different Heiberg types and serotypes from all positive samples to determine their virulence genes (tdh and trh) by using multiplex PCR and antimicrobial susceptibility pattern. Both tdh and trh genes were positive in 4.8% of the isolates, 25.3% contained only tdh+, 4.8% only trh+ and 65.1% only tdh-trh-. All isolates with trh+ produced urease enzyme and 7.4% of tdh+ isolates did not produce TDH. Antimicrobial susceptibility of the 269 isolates were tested with 8 antimicrobial agents, and more than 96% of them were susceptible to norfloxacin, nalidixic acid, nitrofurantoin, tetracycline, cotrimoxazole and gentamicin. Of the isolates, 27.9% and 17.8% were resistant to ampicillin and colistin, respectively. Multidrug resistant patterns were also found in 7.8% of 269 isolates, in which 5.9% showed resistance to ampicillin and colistin. Five transient healthy carriers from the frozen processed seafood plant were V. parahaemolyticus positive two to three times during the study period. However, all isolates from each transient healthy carrier were of different serotypes and strains. TDH with tdh+ isolate and TRH with trh+ isolate were identified in two carriers. This study has shown the significant findings and characteristics of V. parahaemolyticus among healthy carriers in the frozen seafood plants. Further research is suggested on the roles of carriers in transmission, pathogenic mechanism and virulence gene expression.

Abstract: ภาวะพาหะของ วิบริโอ พาราฮีโมลัยติกัส นั้นไม่สามารถให้คำ จำ กัดความที่ชัดเจนได้ แต่มีหลายราย งานที่พบว่าสามารถตรวจพบ วิบริโอ พาราฮีโมลัยติกัส ได้ในคนปกติโดยที่ไม่มีอาการและอาการแสดงของ อุจจาระร่วง โดยเฉพาะผู้ที่สัมผัสกับผู้ป่วยดรคอุจจาระร่วง, ผู้ที่อาศัยอยู่ในหมู่บ้านที่ติดทะเล และในพนักงานที่ ทำ งานในโรงงานอาหารทะเลแปรรูปแช่แข็ง จากการศึกษาซีโรไทป์และยีนที่ควบคุมการก่อโรคของ วิบริโอ พาราฮีโมลัยติกัส จาก 10,214 ตัวอย่างอุจจาระของพนักงานในโรงงานอาหารทะเลแช่แข็งและโรงงานอาหาร ทะเลแปรรูปแช่แข็งในจังหวัดสมุทรปราการ ระหว่างเดือนกรกฎาคม 2545 ถึง สิงหาคม 2546 สามารถตรวจพบ เชื้อ วิบริโอ พาราฮีโมลัยติกัส ได้ตลอดทั้งปี จำ นวนทั้งสิ้น 147 ตัวอย่าง (ร้อยละ1.4) จากพนักงาน 139 คนโดยไม่ มีอาการและอาการแสดงของโรคอุจจาระร่วง จากการศึกษาเชื้อ วิบริโอ พาราฮีโมลัยติกัส ที่แยกจาก 139 ตัวอย่าง พบว่าร้อยละ 64 และ 18ของเชื้อ เป็น Heiberg’s type VІІ และ type V อีกร้อยละ 18 ของตัวอย่างตรวจพบทั้ง 2 ไทป์ ซีโรไทป์ของ วิบริโอ พาราฮีโมลัยติกัส ที่ตรวจพบทั้งหมดมี 64 ซีโรไทป์โดยพบ O1:KUT มากที่สุด ร้อยละ 11.9 รองลงมาคือ O5:KUT ร้อยละ 11.5, O10:KUT ร้อยละ 8.0 และ O11:KUT ร้อยละ 7.1 การศึกษาปัจจัยก่อ โรคโดยการตรวจฮีโมลัยซิน (TDH) และเอมไซม์ยูริเอส (TRH) พบว่ามีเพียงร้อยละ 1.7 จาก 999 ไอโซเลตที่พบ ปัจจัยการก่อโรคทั้ง 2 ชนิด, ร้อยละ 32.8 พบให้ผลบวกต่อ TDH (KP+) และร้อยละ 8 ผลิตเอนไซม์ยูริเอส (TRH+) การตรวจยีนที่ควบคุมการก่อโรค (tdh, trh) ด้วยวิธี multiplex PCR โดยเลือกจากผลของปฏิกิริยาทางชีวเคมีและซี โรไทป์ที่แตกต่างกัน 269 จาก 999 ไอโซเลต พบว่ามีเพียงร้อยละ 4.8 เท่านั้นที่มียีนควบคุมการเกิดโรคทั้ง 2 ชนิด (tdh+, trh+) ร้อยละ 25.3 มีเพียง tdh+อย่างเดียว และ วิบริโอ พาราฮีโมลัยติกัส ร้อยละ 65.1 ไม่พบยีน (tdh-, trh-) ทุกไอโซเลตที่มี trh+ สามารถผลิตเอนไซม์ยูริเอสได้ การศึกษาความไวของ วิบริโอ พาราฮีโมลัยติกัส ต่อยาต้าน จุลชีพ 8 ชนิด พบว่ามากกว่าร้อยละ 96 ของเชื้อมีความไวต่อยาต้านจุลชีพ 6 ชนิดคือ norfloxacin, nalidixic acid, nitrofurantoin, tetracycline, cotrimoxazole and gentamicin และร้อยละ 27.9 ดื้อต่อยา ampicillin ร้อยละ 17.8 ดื้อ ต่อยา colistin การดื้อต่อยามากกว่า 1 ชนิดพบได้ร้อยละ 7.8 จากทั้งหมด 269 ไอโซเลต ร้อยละ 5.9 ดื้อต่อยา ampicillin และ colistin จากการติดตามพาหะของ วิบริโอ พาราฮีโมลัยติกัส พบว่ามีเพียง 5 คนจากโรงงานอาหาร ทะเลแปรรูปแช่แข็งที่ตรวจพบเชื้อนี้ได้ซํ้า 2-3 ครั้งในคนเดียวกันตลอดระยะเวลาในการติดตาม โดยไม่มีอาการ และอาการแสดงของอุจจาระร่วง อย่างไรก็ตามทุกไอโซเลตของพาหะทั้ง 5 คนนี้ มีซีโรไทย์และสายพันธุ์ที่ต่าง กัน ในจำ นวนพาหะทั้ง 5 คนนี้มีเพียง 2 คนเท่านั้น ที่มีปัจจัยและยีนที่ก่อโรคคือ มี TDH+และ tdh+gene และ TRH+และ trh+gene การศึกษานี้ทำ ให้ได้ข้อมูลที่สำ คัญและลักษณะของ วิบริโอ พาราฮีโมลัยติกัส ที่ตรวจพบใน คนที่เป็นพาหะในโรงงานอาหารทะเล ซึ่งจะนำ ไปสู่การศึกษาต่อไปถึงบทบาทของพาหะ ในด้านการแพร่กระจาย เชื้อ การก่อโรค และการแสดงออกของยีนที่ก่อโรค

Mahidol University

Address: NAKHON PATHOM

Email: liwww@mahidol.ac.th

Name: Orasa Suthienkul

Role: Thesis Advisors

Created: 2004

Modified: 2553-06-26

Issued: 2010-02-12

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

ISBN: 9740449573

CallNumber: TH T367s 2004

eng

DegreeName: Master of Science

Level: Master's Degree

Descipline: Infectious Diseases and Epidemiology

Grantor: Mahidol University

©copyrights Mahidol University

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	4436073.pdf	3.79 MB	11	2019-05-28 18:58:11

ใช้เวลา

0.238529 วินาที