Cytotoxic T lymphocyte activity in HIV-1 infected Thais

การทำงานของ cytotoxic T lymphocytes ในผู้ติดเชื้อเอชไอวีชาวไทย

Name: Piraporn Utachee

MeSH: CD4 Lymphocyte Count

MeSH: HIV Infections

MeSH: HIV-1

MeSH: T-Lymphocytes, Cytotoxic

MeSH: Vaccinia

Abstract: Cytotoxic T lymphocyte (CTL) activity, as an important defence mechanism against HIV-1 infection, was determined in 30 HIV-1 infected Thais who had a CD4 count in the range of 5-1,420 cells/ml and with a viral load in the range of <400-246,000 copies/ml. CTL assay was performed in bulk culture with in vitro stimulation of CTL precursors. HIV/vaccinia recombinant-infected autologous peripheral blood mononuclear cells were used as stimulators for in vitro expansion of the specific T cell clones. Autologous EBV transformed B cells infected with recombinant viruses and labeled with 51Cr were used as target cells. The HIV/ vaccinia recombinants used in the experiments were vT 142 (A/gag) and vT 143 (A/pol) kindly provided by the NIH AIDS Research and Reference Reagent Program; and vP1170 (wild type vaccinia); and vP1536 (E/env) kindly provided by Virogenetics Corporation. HIV-1 viral load was determined by Roche/Amplicor HIV-1 MonitorTM test kit version 1.5. HIV-1 subtyping was performed by a V3 peptide ELISA. Subtype classification revealed 29 cases of HIV-1 subtype E and 1 case of subtype B. This study demonstrated the specific CTL activity to Gag, Env and Pol epitopes in 66.7, 63.3, and 16.7 % of subjects respectively. CTL activity was present even in subjects who had CD4 cell counts lower than 200 cell/ml. Among four of them, one case had CTL activity to all three HIV epitopes; and the other two had CTL activity against both Gag and Env epitopes. Regarding cross clade activity, one case of subtype B infection had CTL activity to A/gag, but not to other epitopes. Inverse correlation between the level of viral load and CD4 T cell counts was shown (Pearson, r = -0.55, p= 0.002), while no correlation was observed between the level of viral load or the level of CD8 T cell counts and values of CTL specific lysis; and also there was no correlation between CD4 count level and percentages of CTL specific lysis in any HIV epitopes analysed. A follow-up study of the subjects at every 3-6 months for one year did not show any significant change in CTL activity.

Abstract: โครงการวิจัยนี้เป็นการศึกษา การทำงานของ cytotoxic T lyphocyte (CTL) ซึ่งมีบทบาทสำคัญใน การป้องกันการติดเชื้อเอชไอวีไทป์ 1 โดยได้ทำการศึกษาในผู้ติดเชื้อเอชไอวีชาวไทย 30 ราย ซึ่งมีจำนวนเซลล์ CD4 (CD4 count) ระหว่าง 5-1,420 เซลล์/ไมโครลิตร และปริมาณไวรัส (viral load) ระหว่าง <400- 246,000 copies/มิลลิลิตร ในการทำการทดสอบ CTL assay จะใช้ autologous peripheral blood mononuclear cells ซึ่งติดเชื้อ HIV/vaccinia recombinant viruses เป็นตัวกระตุ้น (stimulators) ให้ specific T cell clones ในหลอดทดลองเพิ่มจำนวนมากขึ้น (in vitro expansion) และนำไปใช้เป็น effector cells และใช้ autologous EBV transformed B cells ที่ติดเชื้อด้วย recombinant viruses และติดสลากด้วย 51Cr เป็นเซลล์เป้าหมาย HIV/vaccinia recombinant ที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้คือ vT 142 (A/gag) และ vT 143 (A/pol) ซึ่งได้มาจาก NIH AIDS Research and Reference Reagent Program; และ vP1170 (wild type vaccinia) กับ vP1536 (E/env) ได้มาจาก Virogenetics Corporation สำหรับการตรวจหาปริมาณไวรัส (viral load) ใช้ชุดตรวจแอมพลิคอร์ เอชไอวี + มอนิเตอร์เทสต์ ของบริษัท โรส เวอร์ชั่น 1.5 ส่วนการตรวจหา HIV-1 subtype ใช้วิธี V3 peptide ELISA พบว่าผู้ร่วมโครงการที่ติด เชื้อเอชไอวี เป็น subtype E 29 ราย, subtype B 1 ราย ในการศึกษานี้พบว่า ผู้ร่วมโครงการ ร้อยละ 66.7, 63.3 และ 16.7 มี CTL ต่อ Gag, Env และ Pol proteins ตามลำดับ และในผู้ป่วย 4 ราย ที่มีจำนวนเซลล์ CD4 (CD4 count) น้อยกว่า 200 เซลล์/ไมโครลิตรพบว่า 1 ราย มี CTL activity ต่อ HIV epitopes ของทั้ง สามโปรตีน และอีก 2 ราย มี CTL activity ต่อ Gag และ Env proteins ในการศึกษา cross clade CTL activity ของผู้ร่วมโครงการ พบว่า 1 รายที่ติดเชื้อ subtype B มี CTL activity ต่อ A/Gag แต่ไม่มีต่อโปรตีน ตัวอื่น พบว่าค่า CD4 count มีความสัมพันธ์แบบแปรผกผันอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติกับค่าปริมาณไวรัส (Pearson, r =-0.55, p= 0.002) ในขณะที่ไม่มีความสัมพันธ์แบบแปรผกผันระหว่างปริมาณไวรัสและค่า เปอร์เซ็นต์ lysis ของ CTL และไม่มีความสัมพันธ์แบบแปรผกผันเช่นกันระหว่างจำนวนเซลล์ CD4 หรือ CD8 และค่า lysis ของ CTL ต่อทั้งสามโปรตีน การศึกษาติดตามผู้ป่วยทุก 3-6 เดือนเป็นเวลา 1 ปี ยังไม่พบการ เปลี่ยนแปลงของ CTL activity นี้ชัดเจน

Mahidol University

Address: NAKHON PATHOM

Email: liwww@mahidol.ac.th

Name: Pilaipan Puthavathana

Role: Thesis Advisors

Created: 2003

Modified: 2552-11-30

Issued: 2009-11-30

วิทยานิพนธ์/Thesis

application/pdf

CallNumber: TH P667c 2003

eng

DegreeName: Master of Science

Level: Master's Degree

Descipline: Microbiology

Grantor: Mahidol University

©copyrights Mahidol University

ลำดับที่.	ชื่อแฟ้มข้อมูล	ขนาดแฟ้มข้อมูล	จำนวนเข้าถึง	วัน-เวลาเข้าถึงล่าสุด
1	4136454.pdf	1.43 MB	8	2020-11-19 15:43:35

ใช้เวลา

-0.676094 วินาที