แจ้งเอกสารไม่ครบถ้วน, ไม่ตรงกับชื่อเรื่อง หรือมีข้อผิดพลาดเกี่ยวกับเอกสาร ติดต่อที่นี่ ==>
หากไม่มีอีเมลผู้รับให้กรอก thailis-noc@uni.net.th
หากไม่มีอีเมลผู้รับให้กรอก thailis-noc@uni.net.th
Namthip Phironrit . การถ่ายยีนจากไวรัสสาเหตุโรคจู๋ของข้าวให้กับข้าวไร่ . ปริญญาโท(โรคพืช). มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์. : มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์, 2544.
การถ่ายยีนจากไวรัสสาเหตุโรคจู๋ของข้าวให้กับข้าวไร่
Transformation of upland rice with genes derived from rice ragged stunt virus
Name: น้ำทิพย์ พิรณฤทธิ์
Name: Namthip Phironrit
;
ไวรัส
Abstract:
การพัฒนาการถ่ายยีนในข้าวไร่ เริ่มจากการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อข้าวโดยการนำเมล็ดข้าวไร่ 4 พันธุ์ คือ ดอกพยอม น้ำรู เจ้าฮ่อ และอาร์258 มาเพาะเลี้ยงชักนำให้เกิดแคลลัส พบว่าอาหารสูตร MS ดัดแปลง (R3) ที่เติม 2, 4-D ปริมาณ 2 มิลลิกรัมต่อลิตร ร่วมกับ casein hydrolysare และ L-proline ชนิดละ 500 มิลลิกรัมต่อลิตร สามารถชักนำให้เกิดเอมบริโอจินิกแคลลัสได้มากที่สุดในข้าวไร่พันธุ์ดอกพยอม และน้ำรู คือ 100 และ 88 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ และพบว่าอาหารสูตร N6 ที่เติม 2, 4-D ปริมาณ 2 มิลลิกรัม ร่วมกับ casein hydrolysare 1000 มิลลิกรัมต่อลิตร และ L-proline 500 มิลลิกรัมต่อลิตร สามารถชักนำให้เกิดเอมบริโอจินิกแคลลัสได้มากที่สุดในข้าวไร่พันธุ์เจ้าฮ่อ และอาร์258 คือ 96 และ 80 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ อสหารสูตรที่เหมาะสมสำหรับการชักนำแคลลัสให้พัฒนาเป็นต้นของข้าวไร่พันธุ์ดอกพยอม และอาร์ 258 คือ อาหารสูตร CC ที่มีน้ำตาลซูโคลสปริมาณ 20 กรัมต่อลิตร เติม NAA ปริมาณ 1 มิลลิกรัมต่อลิตร ร่วมกับ BA ปริมาณ 4 มิลลิกรัมต่อลิตร ในพันธุ์เจ้าฮ่อสามารถชักนำให้เกิดต้นได้ดีในอาหารสูตรเดิมที่เติม IAA ปริมาณ 1 มิลลิกรัมต่อลิตร ร่วมกับ BA ปริมาณ 4 มิลลิกรัมต่อลิตร และพันธุ์น้ำรูในอาหารสูตรเดิมที่เติม NAA ปริมาณ 1 มิลลิกรัมต่อลิตร ร่วมกับ BA ปริมาณ 3 มิลลิกรัมต่อลิตร โดยเปอร์เซ็นต์การเกิดต้นของทุกพันธุ์ระหว่าง 43-52 เปอร์เซ็นต์ การทำให้แคลลัสขาดน้ำนาน 72 ชั่วโมง มีผลทำให้การพัฒนาเป็นต้นของข้าวไร่พันธุ์ดอกพยอม และเจ้าฮ่อ สูงขึ้นเป็น 82.14 และ 71042 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับการถ่ายยีนให้กับข้าวไร่พันธุ์เจ้าฮ่อด้วยวิธีเชื้อ Agrobacterium พบว่า Agrobacterium tumefaciens สายพันธุ์ EHA 105 มีค่า O.D.600 เท่ากับ 1.2 และ 1.5 เมื่อนำมาเจือจาง 1:100 มีความเหมาะสมสำหรับการส่งถ่ายยีน gus ได้ 12 และ 30 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ สำหรับการถ่ายยีนโดยใช้เครื่องยิงอนุภาคแบบ PDS-1000/He (BioRad gun) กับพลาสมิดดีเอ็นเอที่ใช้คือ p35SIGN และ pCAMBIA 1301 เคลือบอนุภาคทองขนาด 1 ไมครอน พบว่าที่สภาพแรงดันของแก๊สฮีเลียม 1,100 psi และระยะห่างระหว่างเนื้อเยื่อเป้าหมายกับ maccrocarrier launch assembly ที่ 6 กับ 9 เซนติเมตร เป็นระยะที่เหมาะสมหรับการถ่ายยีน เนื่องจากให้ผลการแสดงออกของยีน gus มากที่สุดและสามารถส่งถ่ายยีน PDR ซึ่งเป็น RRSV segment 5 antisense เข้าสู่ข้าวไร่พันธุ์ดอกพยอม และอาร์258 สามารถยืนยันการเข้าไปสอดแทรกของยีน PDR ในจีโนมของข้าวด้วยวิธี genomec Southern blot analysis
Abstract:
Genetic transformation was developed in 4 upland rice varieties namely Dog Payom, Nam Rhu, jaw Hor and R258. Mature seeds were subjected to callus induction and plantlet regeneration. The modified MS medium (R3) containing 2 mg/L 2,4-D and 500 mg/L each of casein hydrolysate and L-proline induced 100 and 88 percent embryogenic calli in Dog Payom and Nam Rhu, respectively. While the N6 medium containing 2 mg/L 2,4 D, 1000 mg/L casein hydrolysate and 500 mg/L L-proline induced 96 and 80 percent embryogenic calli in Jaw Hor and R258, respectively. For Dog Payom and $258, plantlets were successfully regenerated in the CC medium medium containing 20 g/L sucrose, 1 mg/L NAA and 4 mg/L BA. The Cc medium could also induce plantlet regeneration in Jaw Hor and Nam Rhu by adding 1 mg/L IAA and 4 mg/L BA, and 1 mg/L NAA and 3 mg/L BA, respectively. Callus dehydration up to 72 hrs. resulted in the increasing of planlets regeneratin to 82.14 percent in Dog Payom and 71.42 percent in Jaw Hor.Agrobacterium transformation was carried out to transform Jaw Hor with gus gene by using Agrobacterium tumefaciens strain EHA 105. Incubation of Jaw Hor Calli with 1:100 dilutions of AGrobacterium suspension having O.D.600 of 1.2 and 1.5, transformation percentages based on Gus activity were 12 and 30 percent, respectively. The PDS-1000/He particle gun was employed to bombard embryogenic calli. Two plasmids designated as p35SIGN and pCAMBIA 1301, both contain gus gene, were coated on 1 mu gold particles for target gene delivering. The highest expression of gus gene was obtained when embryogenic calli were bombarded under 1,100 psi helium pressure and the target distance between macrocarrier launch assembly and embryogenic calli at 6 and 9 cm. The PDR gene containing RRSV segment 5 antisense was successfully transformed into Dog Payom and R258 as confirmed by the genomic Southern blot analysis.
มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
Address:
กรุงเทพมหานคร (Bangkok)
Name: สุพัฒน์ อรรถธรรม
Role:
, ประธานกรรมการที่ปรึกษา
Created:
2544
Issued:
2548-08-27
Modified:
2548-09-24
วิทยานิพนธ์/Thesis
URL: http://www.lib.ku.ac.th/KUthesis/NamthipPhi/index.html
ISBN:
974-461-718-7
CallNumber:
SB608.R5 .น214
tha
DegreeName: วิทยาศาสตรมหาบัณฑิต
Level: ปริญญาโท
Descipline: โรคพืช
Grantor: มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
©copyrights มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
RightsAccess:
ใช้เวลา
0.058266 วินาที
น้ำทิพย์ พิรณฤทธิ์
| Title | Contributor | Type |
|---|---|---|
| การถ่ายยีนจากไวรัสสาเหตุโรคจู๋ของข้าวให้กับข้าวไร่
มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์ น้ำทิพย์ พิรณฤทธิ์ ;Namthip Phironrit | สุพัฒน์ อรรถธรรม | วิทยานิพนธ์/Thesis |
Namthip Phironrit
| Title | Contributor | Type |
|---|---|---|
| การถ่ายยีนจากไวรัสสาเหตุโรคจู๋ของข้าวให้กับข้าวไร่
มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์ น้ำทิพย์ พิรณฤทธิ์ ;Namthip Phironrit | สุพัฒน์ อรรถธรรม | วิทยานิพนธ์/Thesis |
สุพัฒน์ อรรถธรรม